9046-27-9
中文名称
γ-谷氨酰转移酶
英文名称
EC 2.3.2.2
CAS
9046-27-9
更新日期
2025/10/23 10:05:27
基本信息
中文别名
Γ谷氨酰转肽酶Γ-谷氨酰转移酶
Γ-谷氨酰转肽酶
Γ-谷氨酰转移酶
GAMMA-谷氨酰转移酶
Γ-谷氨酰基转氨酶(牛肾)
Γ-谷氨酰转肽酶 来源于马肾脏
Γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺单盐
Γ-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺单胺盐
Γ-谷谷氨酰转移酶(催化浓度)(低温运输)
英文别名
GGTPEC 2.3.2.2
GGTP TYPE VI
GGTP TYPE IV
GAMMA-GT TYPE IV
GAMMA-GT TYPE VI
GLUTAMYL TRANSFERASE
L-Glutamyltransferase
γ-glutamyltransferase
g-Glutamyltranspeptidase
所属类别
分析化学:标准物质常见问题列表
生理作用
γ-谷氨酰转肽酶又称γ-谷氨酰转移酶、GGT、γ-GT、EC 2.3.2.2,是一种转移酶,在γ-谷氨酸官能团从谷胱甘肽等分子上转移至受体时起催化作用,受体可能是一种氨基酸、一种肽或水。γ-谷氨酰转肽酶在γ-谷氨酰循环中起着关键作用。许多人体组织中都有γ-谷氨酰转肽酶,例如肝脏。 操作步骤
1. 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3. 加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。 4. 温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。 5. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。 6. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 7. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。 8. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 9. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。检测原理
本试剂盒应采用双抗体夹心法测定标本中小鼠γ-谷氨酰转肽酶(GGT)水平。用纯化的γ-谷氨酰转肽酶(GGT)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入γ-谷氨酰转肽酶(GGT),再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的γ-谷氨酰转肽酶(GGT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中γ-谷氨酰转肽酶(GGT)含量。样本
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。 7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。用途
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中γ-谷氨酰转肽酶(GGT)的含量。
