91080-16-9
基本信息
小牛胸腺DNA
小牛胸腺DN-1
小牛胸腺DNA溶液
小牛胸腺DNA标准品
小牛胸腺DNA对照品
DNA 来源于小牛胸腺
脱氧核糖核酸(胸腺提取)
小牛胸腺DN-1 50MG
脱氧核糖核酸 来源于小牛胸腺
dna single stranded
DNA from calf thymus
DEOXYRIBONUCLEIC ACI
Deoxyribonucein acid
CalfthymusDNApyrolyzate
DNABOVINE (CALF) THYMUS
Calf ThyMus DNA Solution
DNA, Na Salt, Calf Thymus
Deoxyribonucleic acids, thymus
常见问题列表
小牛胸腺DNA(CT-DNA)是一种天然的DNA广泛用于研究DNA绑定抗癌剂和DNA绑定代理,调节DNA结构和功能。
小牛胸腺,鱼类精子和植物种子的胚等含有丰富的DNA,可作为提取DNA的良好材料。
动物和植物组织的脱氧核糖核蛋白可溶于水或浓盐溶液(如1mol/L氯化钠溶液),但在0.14mol/L盐溶液中的溶解度很低,而核糖核蛋白(RNP)则溶于0.14mol/L盐溶液中,利用这一性质可将脱氧核糖核蛋白与核糖核蛋白以及其他杂质分开。
1.取新鲜(或冰冻)的小牛胸腺,除去血水和结缔组织,在冰浴上切成小块,称取 20g,加入2倍体积的0.1mol/L氯化钠-0.05mol/L,pH=7.0柠檬酸钠缓冲溶液,于组织捣碎机上高速匀浆5分钟。
2.组织糜用转速为;3000r/min的离心机离心15分钟,将沉淀用50 mL上述缓冲溶液洗涤2次,洗涤时用匀浆器研磨洗涤,每次如前离心。
3.向后得到的细胞核沉淀中加入6倍体积的10%氯化钠溶液,充分搅匀置冰箱中过夜,以充分提取DNP,溶液为粘稠状。
4.将所得的半透明粘稠状液体,用滴管慢慢注入冷蒸馏水中,边加边轻轻搅动(NaCl的终浓度为0.14mol/L),这时有白色丝状物——核蛋白析出,在冰箱中静置数小时,收集沉淀。
5.将沉淀物再溶于4倍体积的10%氯化钠溶液中,迅速搅拌以加速溶解。加入1/2体积的氯仿-异戊醇混合液,剧烈振荡5分钟左右,用转速为3000r/min的离心机离心15分钟,得三层:上层为含有DNA和DNA核蛋白的水层,下层为氯仿-异戊醇的有机溶剂层,变性蛋白质介于两层之间。
6.吸出上面的水层,再用氯仿-异戊醇如前进行脱蛋白,直至界面处不再出现变性蛋白质为止。
7.后吸出上清液并将其注入两倍体积的95%乙醇中,用玻璃棒搅起白色纤维状DNA沉淀,沥干,用80%乙醇洗涤,后用少量无水乙醇洗涤。尽量沥干乙醇后,铺开在表面皿上。置于真空干燥器内干燥,即得白色纤维DNA钠盐。DNA在生物体内是以与蛋白质形成复合物的形式存在的,因此提取出脱氧核糖核酸蛋白复合物(DNP)后,必须将其中的蛋白质除去。
用于药物与DNA相互作用的光谱学研究;用于聚合酶分析实验及其它分子生物学实验。