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以3-氯-4-氟苯胺和4-氨基-1,2,5-噁二唑-3-氯化甲醛肟为原料，合成4-氨基-N'-(3-氯-4-氟苯基)-N-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒的一般步骤如下：在40毫升乙醇中，加入4-氨基-N-羟基-1,2,5-噁二唑-3-甲亚胺酰氯（3; 1.63克，10.020毫摩尔）和3-氯-4-氟苯胺（1.60克，11.0毫摩尔）。随后，加入由碳酸氢钠（2.10克，25.0毫摩尔）溶于20毫升水形成的溶液。将反应混合物在60℃下搅拌加热1小时。反应完成后，使用旋转蒸发器浓缩反应混合物，将浓缩物溶解于100毫升乙酸乙酯中，用50毫升盐水洗涤两次，并用无水硫酸钠干燥。蒸发溶剂后，残余物在乙酸乙酯/己烷混合溶剂中重结晶，得到目标产物IDO5L（2.38克，收率88%），为棕色固体。薄层色谱（TLC）分析（展开剂：乙酸乙酯/己烷=1/1，v/v）显示Rf值为0.45。1H-NMR（400 MHz, DMSO-d6）δ：11.41（s, br, 1H），8.91（s, br, 1H），7.21（dd, J = 9.2和9.2 Hz, 1H），6.98（dd, J = 6.4和2.8 Hz, 1H），6.72-6.76（m, 1H），6.27（s, 2H）。13C-NMR（100 MHz, DMSO-d6）δ：155.3, 152.2（d, JCF = 239.3 Hz）, 140.4, 139.3, 137.9（d, J3CF = 2.9 Hz）, 122.0, 120.8（d, J3CF = 6.8 Hz）, 118.7（d, J2CF = 18.5 Hz）, 116.2（d, J2CF = 21.7 Hz）。高分辨质谱（HRMS）计算值C9H8ClFN5O2 [M + H]+：m/z = 272.0345，实测值272.0340。

参考文献：

[1] Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals, 2015, vol. 58, # 4, p. 156 - 162

[2] Patent: WO2016/40458, 2016, A2. Location in patent: Page/Page column 26

[3] Journal of Medicinal Chemistry, 2009, vol. 52, # 23, p. 7364 - 7367

[4] Patent: WO2018/83241, 2018, A1. Location in patent: Page/Page column 50

在HeLa细胞中，INCB024360对IDO1显示出较高的抑制活性，IC50 为19 nM。在人同种异基因淋巴细胞的树突细胞或肿瘤细胞的共培养体系中，INCB024360，通过IDO1抑制，逆转IDO表达的HeLa细胞或DCs介导的T细胞抑制，并增加CD4+ T细胞，CD8+ T 细胞，和NK细胞的分化和功能活性。

负荷GM-CSF-分泌型B16肿瘤的小鼠体内，INCB024360 (75 mg/kg b.i.d)引起肿瘤生长的剂量依赖性抑制。 INCB024360显著抑制具有免疫活性的小鼠体内的肿瘤生长，但是对免疫缺陷的小鼠，没有抑制作用。