FLAG标签(FLAG-TAG)ELISA检测试剂盒

FLAG标签(FLAG-TAG)ELISA检测试剂盒性质、用途与生产工艺

检测类型

竞争法

种属

通用

特异性

可检测样本中通用种属的Flag-tag，且与其类似物无明显交叉反应。

背景信息

FLAG标签，或FLAG八肽，或FLAG表位，是一种多肽蛋白质标签，可以用重组DNA技术添加到蛋白质中，其序列图案为DYKDDDDK（其中D=天冬氨酸，Y=酪氨酸，K=赖氨酸）。它是最特异的标签之一，是一种通用种属工抗原，已经开发出特异的、高亲和力的单克隆抗体，因此可用于亲和层析法的蛋白质纯化，也可用于定位活细胞内的蛋白质。它已被用于分离重组的、过量表达的蛋白和宿主生物体表达的野生型蛋白。它还可用于分离具有多个亚单位的蛋白质复合物，因为其温和的纯化过程往往不会破坏这种复合物。它已被用于获得足够纯度和质量的蛋白质，以通过X射线晶体学进行三维结构测定。FLAG标签可用于许多需要抗体识别的不同检测中。如果没有针对某一特定蛋白的抗体，在蛋白上添加FLAG标记，就可以用针对FLAG序列的抗体来研究该蛋白。例如通过免疫荧光、免疫沉淀或通过SDSPAGE蛋白电泳和Western印迹检测进行细胞定位研究。从N端到C端的FLAG标签的肽序列是。DYKDDDDK（1012Da）。此外，它还可以串联使用，常见的是3xFLAG肽。DYKDHD-G-DYKDHD-I-DYKDDDDK（最后一个标签编码一个肠激酶裂解位点）。它可以与蛋白质的C端或N端融合，或插入到蛋白质内。一些市售的抗体（如M1/4E11）只有在N端出现时才能识别该表位。然而，其他可用的抗体（如M2）则对位置不敏感。FLAG标签中的酪氨酸残基可以被硫酸化，这可能会影响抗体对FLAG表位的识别。FLAG标签可以与其他亲和力标签一起使用，例如多组氨酸标签（His标签）、HA标签或myc标签。

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