DLD-1（人结直肠腺癌上皮细胞）

人结直肠腺癌上皮细胞是1977-1979年间D.L.Dexter和同事分离的两株结直肠腺癌细胞株中的一株。人结直肠腺癌上皮细胞DLD-1细胞是1977年至1979年间由Dexter DL和同事们从结肠癌患者的大肠中分离出来的两株结直肠腺癌细胞中的一株，被广泛用于肿瘤研究。DNA印迹和细胞遗传学分析表明，DLD-1与HCT-15、HCT-8、HRT-18高度相似，说明这四株细胞来源于同一个人。尽管DNA印迹分析证实这些细胞的遗传起源，但细胞遗传学分析显示它们缺乏标记染色体或染色体数目的同步改变。据报道，该细胞通过免疫过氧化物酶染色显示角蛋白和波形蛋白表达呈阳性，p53抗原表达呈阳性（p53蛋白有一个C→T点突变导致第241位氨基酸Ser→Phe）。此外，该细胞表达癌胚抗原（CEA）、结肠抗原3和癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis、fos等，并能在裸鼠体内成瘤。
DLD-1细胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分离的两株结直肠腺癌细胞株中的一株。在ATCC和其它地方进行的DNA指纹鉴定和染色体组型分析表明DLD-1细胞与HCT-15细胞相似，说明这两者是来自同一个人的不同克隆。DLD-1细胞和HCT-15细胞的遗传起源可通过DNA指纹鉴定证实，但染色体组型分析显示它们缺乏染色体标记一致改变或数目上一致改变。DLD-1细胞的CSAp阴性（CSAp-），p53抗原表达呈阳性（p53抗原产生了一个C→T点突变导致241位的Ser→Phe）。DLD-1细胞角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性，癌基因N-myc的表达未做检测。DLD-1细胞表达肿瘤特异性核基质蛋白CC-2、CC-3、CC-4、CC-5和CC-6。1979年提交到ATCC的DLD-1细胞代数不明且污染了支原体，其后经过12周多种抗生素联合培养处理，处理之后每周用Hoechst染色和标准培养法检测。其后连续11个月不加抗生素培养，DLD-1细胞所有的检测呈阴性。肠癌细胞

1）准备RPMI-1640培养基；优质胎牛血清，10%；双抗1%。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

人，白人男性，成人大肠，结肠；疾病：结直肠腺癌（Dukes' type C）

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

贴壁生长 (Adherent）成人 (Adult)待人结直肠腺癌上皮细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x106~ 1x107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。上皮样，贴壁生长肿瘤细胞

人结直肠腺癌上皮细胞可以用于Notch3、DLL1、CD133在结直肠腺癌组织中的表达及意义。

结肠腺癌 (Colorectal adenocarcinoma)