SUPER TUBE狗肾细胞

SUPER TUBE狗肾细胞是从表观正常的成年雌性可卡犬中建立了细胞株MDCK(ATCCCCL-34)，从中克隆建立了狗上皮样细胞株SuperTube。当维持高细胞浓度时，Supertube形成大量的小管(据报道，24孔板的每孔铺7x105细胞，３天内就能形成小管)。要形成小管，细胞需要每天两次换液以提供足够养分。与原始细胞株相比，SuperTube的c-AMP的检测水平低得多，在forskolin刺激下读出的腺苷环化酶水平也低；它的跨上皮抗性也比SuperDome(ATCCCRL-2286)和MDCK都低。Super Tube是通过克隆MDCK（ATCC CCL-34）细胞系而建立的犬上皮样细胞系，MDCK细胞源自一只明显正常的成年雌性可卡犬的肾脏。当维持高细胞浓度时，Super Tube细胞形成大量的小管(据报道，24孔板的每孔铺7×10^5细胞，3天内就能形成小管)。要形成小管，Super Tube细胞需要每天两次换液以提供足够养分。与原始细胞株相比，Super Tube细胞的c-AMP的检测水平低得多，在毛喉素刺激下读出的腺苷环化酶水平也低；Super Tube细胞的跨上皮抗性也比Super Dome和MDCK都低。体外细胞培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等。将细胞所需的上述物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，因此在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。上皮细胞样(梭形、多角形)1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。营养物质：无机物（无机盐、微量元素等），有机物（糖、氨基酸、促生长因子等）；血清和血浆(提供细胞生长必须的营养成份)；温度和pH（36.5±0.5℃，7.2～7.4）；气体环境（95%的空气+5%CO₂的混合气体）；其中5%CO₂气体是为保持培养液的pH稳定。1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）正常肾贴壁细胞