人间皮瘤细胞

NCI-H2452 [H2452]是从一名男性间皮瘤患者的肺中分离出来的具有上皮形态的细胞系。该细胞株在癌症研究中有应用。该细胞株于1990年11月从一位不吸烟的间皮瘤患者开始创立。

细胞在本库通过支原体检测阴性（可供检测报告）。
细菌检测结果：阴性；真菌检测结果：阴性
细胞在本库通过STR检测无误（可供检测报告）。



STR鉴定结果：
Amelogenin: X,Y
D5S818:11,12
D13S317: 12
D7S820: 9,11
D16S539: 11,13
vWA: 17,18
TH01: 6,9.3
TPOX: 8,11
CSF1PO: 11,12
D19S433: 13
D21S11: 28,32.2
D18S51: 15NCI-H2452 [H2452]细胞是于1990年11月建株，组织提供者不抽烟。其它肿瘤细胞将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。人男性疾病：间皮瘤 ；肺贴壁生长（Adherent）Adult;Male上皮细胞， 贴壁生长

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53mMEDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

肿瘤细胞间皮瘤（Mesothelioma）

1）准备1640培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2）人间皮瘤细胞培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）人间皮瘤细胞冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。