HT-29人结肠癌细胞

HT-29细胞是由J·Fogh在1964年用移植培养方法从一名44岁白人女性结肠直肠癌患者的原发肿瘤中分离出来，在和含15S的F12培养液中培养。近来，已建株的HT-29细胞用含10%血清McCoy's5A培液培养。HT-29细胞在裸鼠中致瘤，也能在类固醇处理的地鼠中致瘤。HT-29细胞合成IgA、CEA、TGFβ结合蛋白和黏液素等；表达尿激酶受体，但没有检测到血浆酶原活性；不表达CD4，但细胞表面表达半乳糖神经酰胺（HIV的可能替代受体）。HT-29细胞的超微结构特征包括微绒毛、微丝、带有深色颗粒的大空泡线粒体、带有游离核糖体的光滑粗面内质网、脂滴、少量初级溶酶体和许多次级溶酶体。细胞表达尿激酶受体，但不具有可检测的纤溶酶原激活活性。HT-29细胞CD4呈阴性，但细胞表面存在半乳糖神经酰胺（一种可能的HIV替代受体）的表达。HT-29细胞c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis和fos癌基因表达阳性，但未检测到N-myc癌基因表达，p53抗原过度产生，p53基因的密码子273存在G->a突变，导致Arg->His取代。

1） 来源：结肠癌
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长上皮细胞样(卵圆形成片生长)

气相 ：空气 ，95% ；二氧化碳 ，5%。温度 ：37摄氏度。

1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）结肠腺癌；女性；44岁贴壁细胞HT-29细胞可以用于3D细胞培养、高通量筛选、癌症研究和毒理学研究，也是一种合适的转染宿主。