C-33 A（人子宫颈癌细胞）

C-33 A细胞是由N·Auersperg从宫颈癌切片中建立的一系列细胞株中的一株。C-33 A细胞一开始就表现出亚二倍体核型及上皮细胞形态，C-33 A细胞经连续传代可以观察到核型不稳定。C-33 A细胞存在成视网膜细胞瘤蛋白（pRB），但大小不正常；C-33 A细胞p53表达上调，且有一个273位密码子的点突变导致Arg→Cys的替换。宫颈癌细胞细胞内存在成视网膜细胞瘤蛋白(pRB)，但大小不正常；P53表达上调，第273位密码子突变，从而导致Arg氨基酸替换为Cys，经检测发现人乳头瘤病毒（HPV）DNA及RNA阴性。复苏人子宫颈癌细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL*培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。人源（Homo sapiens）宫颈（Cervix）贴壁生长（Adherent）66 岁（66 years）表皮细胞（Epithelial）肿瘤细胞

人子宫颈癌细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1、对于贴壁人子宫颈癌细胞，传代可参考以下方法：

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的*培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，*脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4.按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

癌症（Carcinoma）