酶联免疫吸附测定
双抗夹心法
血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本
该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中IgG2a浓度。
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体,将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
可检测样本中的IgG2a,且与其它类似物无明显交叉反应。
IgG 是血清中五类哺乳动物免疫球蛋白中最丰富的一种。IgG 分子(约 150 kDa)由两条约 50 kDa 的重链和两条 25 kDa 的轻链组成,通过二硫键连接。抗体的特异性是由可变区域内的体细胞重排和超突变共同赋予的。小鼠 IgG 同型 IgG1、IgG2a 和 IgG2b 在重链恒定区域(CH1、CH2 和 CH3)内有大约 64-78%的氨基酸序列相同,并且在与补体、NK 和肥大细胞的相互作用、特定细胞因子的诱导或抑制以及穿过胎盘的能力方面可能有所不同。