TNE缓冲液

TNE缓冲液（Tris-NaCl-EDTA）是一种用于核酸或蛋白质实验的通用洗涤缓冲液。以下是配置TNE缓冲液的方法。
配方：
10 mM 三氯甲烷酸（Tris-HCl），pH 7.5
100 mM 氯化钠（NaCl）
1 mM 乙二胺四酸（EDTA），pH 8.0

制备步骤：
在容器中加入适量的去离子水。
加入10 mM三氯甲烷酸（Tris-HCl），搅拌均匀，调节pH至7.5。
加入100 mM氯化钠（NaCl），继续搅拌至完全溶解。
加入1 mM乙二胺四酸（EDTA），调节pH至8.0，继续搅拌至溶解。TNE缓冲液(10×,pH7.4)主要由Tris、EDTA、NaCl组成，所以简称为NTE缓冲液。该试剂主要用于吸收和荧光光谱学定量RNA和DNA，只要考虑了污染物和缓冲液组分的作用，吸收测量时很直接简单的方法，荧光分析比A260更不易受干扰。

操作步骤（仅供参考）：
使用前需用去离子水稀释到1×。
取1ml 1×TNE缓冲液吸入石英杯，放入单光束或双光束分光光度计中，在352nm处读值，仪器调零。该空白溶液作为双光束仪器的参照。对于单光束分光光度计，去除空白杯，插入含有DNA样品或标准品的石英杯，读书。在280nm（蛋白）、260nm（核酸）、230nm（肽、酚、尿素）重复该过程。
用A260读数带入如下方程计算核酸的浓度（C）：用A260/A280比值和A230和A325处的读值来估计核酸样品的纯度，比值在1.8-1.9显示DNA纯度高，比值在1.9-2.0显示RNA纯度高。