SK-N-SH

SK-N-SH细胞是由L.Bieder J等人建立的两株神经组织来源的细胞中的一株（另一株是SK-N-MC）。与SK-N-MC所不同的是，SK-N-SH细胞倍增时间更长，且表达较高水平的多巴胺-β-羟基酶。该细胞常用作细胞介导的细胞毒性试验中的靶细胞系。该细胞引进时为P34代（该代数为细胞建系以来的准确代数），目前提供P42代左右。
SK-N-SH细胞是由J·L·Bieder建系，它与SK-N-MC细胞所不同的是倍增时间较长，且多巴胺-β-羟基酶水平较高。SK-N-SH细胞在细胞介导的细胞毒性试验中用作靶细胞系。神经母细胞瘤细胞复苏SK-N-SH细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。人，白人女性，4岁脑；来自转移灶：骨髓贴壁生长 (Adherent)4岁 (4 years)上皮样，贴壁生长

SK-N-SH细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4.将细胞悬液按1：2比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

肿瘤细胞神经母细胞瘤 (Neuroblastoma)

SK-N-SH细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为类；

1.SK-N-SH细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2.4 min 1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。

3.将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。