无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液 性质
无血清非程序冻存液是一种即用型的细胞冻存试剂，添加了细胞沉降稳定剂，可延缓细胞在冻存过程中的沉降速率，防止细胞互相挤压，影响细胞冻存效果。另外，添加了细胞膜保护剂、渗透性细胞膜内保护剂、非渗透性细胞保护剂等多种冷冻保护剂，这些成分在溶液中同水分子结合，发生水合作用，弱化水的结晶过程使溶液的粘性增加从而减少冰晶的形成，能大大降低细胞在冻存过程中冰晶对于细胞的损伤，有效提高细胞复苏存活率。该产品配方成分明确，不含血清、不含动物源性蛋白，可减少各类细菌、病毒和支原体等污染，保证冻存细胞的安全；不仅适用于常规细胞系、原代细胞，同时亦适合于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。 在细胞体外培养工作中，为了达到长期保存细胞的生物活性的目的，须将细胞进行冷冻保存，并在实验需要的时候将其重新复苏和培养。目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用添加适量保护剂使细胞缓慢降温至指定温度范围，从而到达保护细胞的目的。该产品添加了细胞沉降稳定剂，可延缓细胞在冻存过程中的沉降速率，防止细胞互相挤压，影响细胞冻存效果。另外，添加了细胞膜保护剂、渗透性细胞膜内保护剂、非渗透性细胞保护剂等多种冷冻保护剂，这些成分在溶液中同水分子结合，发生水合作用，弱化水的结晶过程使溶液的粘性增加从而少冰晶的形成，能大大降低细胞在冻存过程中冰晶对于细胞的损伤，有效提高细胞复苏存活率。该产品配方成分明确，不含血清、不含动物源性蛋白，可减少各类细菌、病毒和支原体等污染，保证冻存细胞的安全；不仅适用于常规细胞系、原代细胞，同时亦适合于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。与传统冻存液相比，无需繁琐费时的程序冻存步骤或价格高昂的程序降温仪，可直接重悬细胞后置于-80°C超低温冰箱长期保存，但需保证超低温冰箱温度稳定。若想更长期、稳定的保存细胞，可将冻存细胞置于-80°C超低温冰箱过夜冻存后（> 16 h），再转移至液氮罐中长期保存。
1、即用型细胞冻存液，随用随取，2-8℃稳定保存1年以上；
2、无需繁琐的程序冻存步骤或昂贵的程序降温仪，直接放入-80℃冰箱，节省大量的时间和精力；
3、细胞复苏率高达90%以上，适用于大多数哺乳动物细胞的冻存；
4、不含血清，批次间差异小；
5、能够有效维持干细胞的多向分化潜能；
6、化学成分明确，没有添加任何外源蛋白，减少细胞污染机会，同时减少外源蛋白对细胞正常生长和分化的影响。
1、选择对数生长期的细胞（90%左右），并保证在冻存前24 h内换液一次，收集细胞，并将细胞制备成单细胞悬液（贴壁细胞可能需要用胰酶消化），计数；
2、将细胞悬液1000 r/min 离心5 min，弃上清；
3、向细胞沉淀物中加入细胞冻存液，轻轻吹打，重悬细胞，使细胞密度达到5×10⁵-1×10⁷个/mL；
4、将上述细胞悬液按0.5 mL或1.0 mL的量，分装于无菌细胞冻存管内，拧紧管盖，并做好标记；
5、直接将分装好的细胞冻存管直接置于-80℃超低温冰箱中，可长期冷冻保存。
6、如果想液氮中长期保存，需先放入-80℃超低温冰箱至少一天时间，方可移至液氮罐中保存。