JeKo-1
JeKo-1 性质
细胞在本库通过支原体检测阴性(可供检测报告)。
细菌检测结果:阴性;真菌检测结果:阴性
细胞在本库通过STR检测无误(可供检测报告)。
STR鉴定结果:
Amelogenin: X
D5S818:10,13
D13S317: 8,9
D7S820: 10,11
D16S539: 12
vWA: 14
TH01: 7
TPOX: 8
CSF1PO: 9,12
D19S433: 13
D21S11: 30,33.2
D18S51: 13,15一位套细胞淋巴瘤患者的巨细胞变种显示白血病转变,从其外周血单核细胞出发建立了MCL细胞株JeKo-1。JeKo-1细胞EB病毒阴性,并表达一种B细胞表型的IgM。JeKo-1细胞过表达cyclin D1、Bcl-2、c-Myc及Rb蛋白。Bcl-1/J (H)基因重排得到了PCR证实,JeKo-1细胞在SCID小鼠中高成瘤。1) 来源: 外周血 组织: 套细胞淋巴瘤
2) 形态:淋巴母细胞,悬浮生长淋巴瘤细胞复苏JeKo-1细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
JeKo-1细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于JeKo-1细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗JeKo-1细胞1-2次。
2.加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打JeKo-1细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将JeKo-1细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
人女性器官: 外周血组织: 套细胞淋巴瘤悬浮生长(Suspension)78(78 years)淋巴母细胞, 悬浮生长肿瘤细胞淋巴瘤(Lymphoma)1、JeKo-1细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待JeKo-1细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、用适量的冻存液重悬JeKo-1细胞,并放置于冻存管中;
4、先将JeKo-1细胞冻存管放置于-20℃1.5h,然后将其移入-80℃。