酶联免疫吸附测定
双抗夹心法
血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本
该试剂盒采用“一步”夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)体外定量检测血清、血浆、组织、细胞或其他相关生物液体中IL-13浓度。
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体,将未结合的抗体洗净后再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
可检测样本中的IL-13,且与其它类似物无明显交叉反应。
白细胞介素 13 是一类可广泛抑制单核巨噬细胞单核炎症因子产生, 具有抗炎及抗肿瘤作用的新型多效性细胞因子, 在生物学功能上与 IL-4 有许多相似之处, 并主要由活化 T 细胞合成和分泌。人 IL -13 (hIL-13, human IL-13) 基因组全长 4. 6kb, 由 4 个外显子和 3 个内 含子组成, 染色体定位于 5q31, 与其他免疫造血因子( IL- 3、IL- 4、 IL- 5、GM -CSF) 位于同一基因簇, 并与 IL -4 最近(2.4kb)。hIL-13 全长 cDNA 约 1. 3 kb, 编码由 132 个氨基酸构成的多肽蛋白, 成熟 蛋白起始于 Gly21, 其非糖基化重组单体活性蛋白分子量约为 10kDa。IL-13 的生物学活性包括趋化单核细胞,延长单核细胞在体 外存活时间,抑制 LPS 诱导单核细胞、巨噬细胞 IL-1、IL-6、IL-8 和 TNF-α等炎症因子产生。协同抗 IgM 活化 B 细胞的增殖,诱导和上 调 B 细胞 MHCⅡ类抗原、CD23 和 CD72 的表达, 诱导 B 细胞产 生 IgM、IgG 和 IgE。诱导大颗粒淋巴细胞(LGL)产生 IFN-γ,并可与 IL-2 协同刺激 LGL 产生 IFN-γ,因而在诱导 LAK 活性以及 Th1 型细 胞免疫中可能有重要作用。