hTERT-HPNE细胞 (人正常胰腺导管细胞) (STR鉴定正确)
| 中文名称 | hTERT-HPNE细胞 (人正常胰腺导管细胞) (STR鉴定正确) |
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| 中文同义词 | HTERT-HPNE CELLS:人胰腺导管上皮细胞系;HTERT-HPNE CELLS|人胰腺导管上皮贴壁细胞;HTERT-HPNE CELLS(赠送STR鉴定报告)|人胰腺导管上皮细胞;HTERT-HPNE CELLS|人胰腺导管上皮克隆细胞;HTERT-HPNE细胞;HTERT-HPNE CELLS人正常胰腺导管细胞系;HTERT-HPNE CELLS人正常胰腺导管复苏细胞系(有STR鉴定图谱);HTERT-HPNE CELLS人正常胰腺导管贴壁细胞系(赠送STR基因图谱) |
| 英文名称 | hTERT-HPNE Cells Line |
| 英文同义词 | hTERT-HPNE Cells;hTERT-Human Pancreatic Nestin-Expressing cells;hTERT-HPNE Cells Line |
| CAS号 | |
| 分子式 | |
| 分子量 | 0 |
| EINECS号 | |
| 相关类别 | 实验室细胞系;生物试剂 |
| Mol文件 | Mol File |
| 结构式 |
hTERT-HPNE细胞 (人正常胰腺导管细胞) (STR鉴定正确) 性质
hTERT-HPNE 是一种 hTERT 永生化上皮细胞,从一名 52 岁男性患者的胰腺中分离出来。该细胞系由 M Ouellette 沉积,可用于药物开发研究。
人
胰腺、导管贴壁生长上皮细胞样完全培养基:75% DMEM(无糖,2 mM L-谷氨酰胺和 1.5 g/L 碳酸氢钠)+ 25% M3 碱 + 5%FBS + 添加剂(10 ng/ml 人重组 EGF、5.5 毫米 D-葡萄糖 (1g/L)和 750 ng/ml 嘌呤霉素)
气相:95% 空气 + 5% CO2
温度:37℃
1.刚收到细胞后的复苏:为确保较高水平的活力,请在收到样品瓶后尽快解冻并开始培养。如果在到达时需要储存冷冻培养物,请将样品瓶储存在液氮气相中,而不是在 –70°C 下储存。 在 –70°C 下储存会导致活力损失。
准备一个 25 cm2或 75 cm2含有推荐完全培养基的培养瓶。在加入样品瓶内容物之前,应将装有生长培养基的容器放入培养箱中至少 15 分钟,以使培养基达到其正常 pH 值(7.0 至 7.6),并避免在细胞回收过程中培养基的碱度过高。
(1)在 37°C 水浴中轻轻搅拌解冻样品瓶。为减少污染的可能性,请将 O 形圈和盖子放在水里。解冻应迅速(约 2 分钟)。
(2)内容物解冻后立即从水浴中取出样品瓶,然后浸入或喷洒 70% 乙醇进行去污。从那时起,所有作都应在严格的无菌条件下进行。
(3)将样品瓶内容物转移至含有 9.0 mL 完全培养基的离心管中,并以约 125 x g 的离心速度离心细胞悬液 5 至 7 分钟。
(4)弃去上清液,将细胞重悬于新鲜生长培养基中(有关推荐的稀释比例,请参阅批次特异性信息)。将此悬浮液添加到准备好的培养容器中。
(5)在 37°C 的合适培养箱中孵育培养物。
2.冻存后复苏:将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻;加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀;在1000 rpm 条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞;将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养。
冻存液配制:90% FBS + 10% DMSO 或 95%完全培养基 + 5% DMSO
冻存方法:消化并离心收集细胞,计数,推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml;将 1 mL 细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;将冻存管转入程序冻存盒,放入-80℃冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4℃静置5-10min,再-20℃静置2h后转入-80℃过夜,第二天转入液氮保存。
hTERT-HPNE细胞 (人正常胰腺导管细胞)STR鉴定位点及结果图:
