细胞核提取试剂盒
一、产品简介。
细胞核是细胞内的细胞器，也是遗传物质分布的重要场所，分离细胞核，可用于转录调控相关的生物学实验。本产品利用蔗糖密度梯度离心法，能够快速且完整的分离细胞核。
二、运输与存储条件。
本产品常温运输，4 ℃保存，有效期 12 个月。
三、特点与优势。
1. 本产品操作简单，可以快速分离细胞核。
2. 本产品分离的细胞核完整，纯度高。
四、自备试剂与耗材。
PBS、RIPA 裂解液（不含 SDS）、1.5 ml 离心管、震荡混匀仪（Vortex mixer）、冷冻离心机。
五、使用说明。
1. 细胞处理。胰酶消化法收集贴壁生长细胞，或离心法直接收集悬浮培养细胞，每个样品中细胞数量为 2×107，加入 1 ml Buffer NA，震荡（Vortex），重悬细胞。
2. 细胞裂解。将细胞重悬液转入匀浆器，匀浆 50-100 次，至显微镜下观察到 80%以上细胞都破碎为止。
3. 离心。将细胞匀浆液转移至 1.5 ml 离心管，600×g，4 ℃离心 10 min，上清转移至新的 1.5 ml离心管，即为细胞浆（可保存在-80 ℃），沉淀为粗细胞核。
4. 粗细胞核中加入 1 ml Buffer NA 重悬，600×g，4 ℃离心 10 min，弃上清。
5. 细胞核纯化。向细胞核沉淀中加入 1 ml Buffer NB，震荡（vortex）重悬，16,000×g，4 ℃离心15-30 min，弃上清。
6. 细胞核洗涤。向细胞核沉淀中加入 1 ml Buffer NA，震荡（vortex）重悬，600×g，4 ℃离心 10 min，弃上清，沉淀即为纯化细胞核。
7. 细胞核可暂时存放在-80 ℃冰箱中，也可立即裂解，抽提核蛋白。
8. 细胞核裂解。主要包括以下二种方式。
1) 变性裂解液裂解。利用本公司的细胞裂解液（Laemmli Buffer，2×）重悬细胞核沉淀，裂解细胞核，提取细胞核蛋白，用于 western blot 分析。但提取蛋白已经变性，不可用于酶活性测定。
2) RIPA 裂解液裂解。利用温和的 RIPA 裂解液（不含 SDS）重悬细胞核沉淀，裂解细胞核，提取蛋白，用于酶活性测定及 western blot 等实验。
六、注意事项
1. 整个操作过程需在低温条件下进行，所用试剂提前预冷。
2. 为了减少其它细胞器污染，提取的细胞浆溶液可以12,000×g，4 ℃离心15 min，弃沉淀，上清即为纯化后的细胞浆，转移至新的离心管，冻存。
3. 为了抑制蛋白降解，实验过程中可添加蛋白酶抑制剂（如cocktail等）。
关键字： 细胞核提取试剂盒;高纯细胞核分离;
公司是一家新设立的以新药研发、技术服务、医药研究服务为主要业务的公司，主要经营范围为：医药、生物领域内的技术开发、服务、咨询、转让；医学研究和试验发展；销售化工产品（不含危险化学品及一类易制毒化学品）、仪器仪表、机械设备、电子产品、计算机软件、及辅助设备、第二类医疗器械。
公司一贯坚持“顾客至上，质量第一，信誉第一"的经营宗旨，通过规范、专业的优质服务，以“热忱、周到、及时”的工作原则服务于各医药研究机构和药品研发企业，建立了优质完善的经营网络。公司的品牌和服务得到了广大客户的认可，赢得了人民群众的信赖。经营业绩年年增长年年上新台阶。
公司将致力于不断提高服务水平，希望能与广大客户共同努力共同进步不断进取！