超快转膜缓冲液（20X）

产品信息

产品简介

超快转膜液使用独特配方，能高效超快地将蛋白转移到印迹膜（PVDF或硝纤膜）上。湿转法（Tank blot）或半干转法（Semi-dry blot）都可以使用。 
产品特点：

超快和环保：能在15-35分钟内完成转膜过程。超快转膜液不使用甲醇，减轻了对实验者和环境的伤害。
兼容性好：超快转膜液能兼容Laemmli胶，预制胶，Bis-Tris胶等多种凝胶。
转移效率高：超快转膜液对分子量跨度较大的蛋白也有保存与运输方法

使用说明

转膜前准备：5-6张裁好的滤纸：裁好的转印膜；足够的1×超快转移buffer。

一、湿转法（Tank blot）

1、配制1×超快转膜液

1升1×Western超快转膜液：取50ml 20×超快转膜液，胶乳750ml双蒸水，混匀后胶乳200ml甲醇，混匀即可，现配现用，配好后置于冰上存放）。

2、将滤纸和海绵浸泡在1×超快转膜液中，完全浸湿。

3、将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟，去除胶表面的SDS；随后将凝胶浸泡在1×超快转膜液中（注意：在使用6%或8%分离胶转移大分子蛋白时，应该降低甲醇含量至10%，以获得更好转移效果）。

按照以下顺序做好转印三明治结构。

一、半干转（Semi-dry blot）

  1、按照下表配制1×超快转膜液

2、将滤纸浸泡在1×超快转膜液中，完全浸湿。

3、将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟，去除胶表面的SDS；随后将凝胶浸泡在1×超快

转膜液中。

注意：水中漂洗时间一定不能超过2分钟，否则分子量较大的蛋白不能完全转移。

4、按照以下顺序做好转印三明治结构。

半干转时，滤纸、胶、膜之间的大小，一般是下层滤纸≥膜大于等于胶≥上层滤纸。上下两层的滤纸一定不能接触；滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡。接触的滤纸和气泡会造成短路。

注意：PVDF膜使用前需用无水甲醇润湿30秒。

三、转移条件

1、湿转

 推荐使用恒流转移，电流可设置350-400mA，转膜液中离子成分较多，可以承受大电流，并且发热量较低。

注：不推荐使用恒压转移，因转膜液中离子成分较多，当电压在100v左右时，电流会达到400mA，此时已达到普通电泳仪器zui大电流，随着时间延长，可能无法达到稳定的100v电压。

2、半干转

保存：常温保存。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。