中文名：葡聚糖G-25层析介质（中）
英文名：Dextran G-25 (Medium)
纯度：BioReagent，蛋白质分离与纯化，多肽脱盐
货号：D1510174
Cas号：9041-35-4
存储温度：2-8°C储存
运输条件：低温运输
稳定性存储：Store at 2-8℃ long term (12 months).
产品介绍：
葡聚糖G-25层析介质是一类以葡聚糖为基质的凝胶过滤层析（gel filtration chromatography）介质，其工作原理主要是利用具有网状结构的葡聚糖凝胶的分子筛作用，根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。
葡聚糖凝胶是一种具有三维网状结构的高分子化合物，它是由葡聚糖加入交联剂通过醚键互相交联聚合而成的，交联度越大，网孔结构就越紧密，吸水后的体积膨胀就越小，能允许进入凝胶内部的分子的分子量也就越小，反之亦然。层析时，大于凝胶孔径的大分子，被阻于凝胶相外，沿着凝胶颗粒之间的间隙走，下移速度最快，故最先洗脱下来，中分子物质部分进入凝胶内部，洗脱速度为其次，而小分子物质因全部进入凝胶，受到阻力最大，故最后被洗脱下来，如此物质得到分离。
型号G表明每克干凝胶吸水量，例如G-25表明每克干凝胶吸水2.5克，这表征了凝胶所能膨胀的倍数，亦间接表征了凝胶孔径的大小。
| 名称 | 葡聚糖G-25层析介质（中） |
| 湿球平均粒径D50（μm） | 120-140 |
| 分离范围 （葡聚糖） | 1×10² - 5×10³
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| 分离范围 （球蛋白） | 1×10³ - 5×10³
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| 溶胀因子 （ml/g） | 4-6 |
| pH 稳定范围 | 2-13 |
| 最大流速 （cm/h） | 150 |
葡聚糖G-25系列层析介质常用于蛋白溶液的脱盐，缓冲液交换和不同分子量蛋白的分离等，根据不同的用途其上样量也不可一概而论，样品溶液的缓冲液置换时最高可上样30%柱体积。
装柱说明
1、凝胶的预处理
葡聚糖G-25层析介质为干粉，初次使用前必须进行预处理。溶胀过程中严禁使用磁力搅拌，以免使微球破碎。
加入足够的水或缓冲液进行溶胀，室温3h以上或水浴90℃ 1h。如果室温溶胀则需要进行真空脱气，然后将溶胀好的微球按照3：1（v/v）加入水或缓冲液搅拌使其形成均匀的75%胶悬液。如果是重复使用的可以将20%乙醇倾去，加水或缓冲液搅拌均匀成75%的胶悬液。
2、层析柱的装填（使用储液器装填）
(1) 用去离子水冲洗层析柱底筛板与接头，确保柱底筛板上无气泡，关闭柱底出口，并在柱底部留出1-2cm的去离子水。
(2) 将填料悬浮起来，小心的将浆液连续地倒入层析柱中。用玻璃棒沿着柱壁倒入浆液可减少气泡的产生。
(3) 如果使用储液器，应立即在层析柱和储液器中加满水，将进样分配器放置于浆液表面，连接至泵上，避免在分配器或进样管中产生气泡。
(4) 打开层析柱底部出口，开启泵，使其在设定的流速下进行。最初应让缓冲液缓慢流过层析柱，然后缓慢增加至最终流速，这样可避免液压对所形成柱床的冲击，也可以避免柱床形成的不均匀。如果达不到推荐的压力或流速，可以用你所使用泵的最大流速，这样也可以得到一个很好的装填效果。（注意：在随后的色谱程序中，不要超过最大装柱流速的75%）当柱床高度稳定后，在最后的装柱流速下至少再上3倍柱床体积的去离子水。标上柱床高度。
(5) 关闭泵，关闭层析柱出口。
(6) 如果使用储液器，去除储液器，将分配器置于层析柱中。
(7) 将分配器推向柱子至标记的柱床高度处。允许装柱液进入分配器，锁紧分配器接头。
(8) 将装填好的层析柱连接至泵或色谱系统中，开始平衡。如果需要可以重新调整分配器。
纯化流程
缓冲液：期望置换到的缓冲液
(1) 柱平衡：用缓冲液平衡脱盐柱5-10CV。
(2) 样品：建议上样量小于10%柱体积，脱盐时最大样品量可达30%柱体积。为了延长填料的使用寿命，所用的样品推荐使用0.45μm的滤膜过滤。
(3) 洗脱：样品洗脱过程中使用的流速不要超过推荐的最大流速。凝胶过滤是一种非吸附性色谱技术，所有的样品物质都应在一个柱体积之内洗脱出来。完成一个操作后，如仍用同一种缓冲液，色谱柱不需要再平衡。
清洗及保存
在位清洗：为除去变性蛋白或脂肪，有时需要对脱盐柱进行原位清洗。常用的清洗液为0.1-0.2M NaOH或非离子型去垢剂。
(1) 加入一倍的柱体积0.1-0.2M NaOH，依靠重力或者低流速清洗介质。
(2) 用足够量的去离子水，冲洗介质，直至pH值至中性。
(3) 用至少三倍柱体积灭菌水冲洗介质，然后做好色谱柱的密封，置于2-8℃保存。
注：不建议介质多次重复再生和使用。
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