基本描述
产品名称:重组全能核酸酶
规格或纯度:ActiBioPure™, 生物活性, EnzymoPure™, 无载体, 无菌, ≥99%(SDS-PAGE), ≥250 U/uL
产品介绍:
全能核酸酶(UltraNuclease),又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶;是一种来源于 Serratia Marcescen 的非特异性核酸内切酶,可在链内任意核苷酸间进行切割,将核酸完全消化成2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸,能够在非常广泛的条件下降解各种形式的 DNA 和 RNA,广泛用于去除生物制品中的核酸。
【反应条件 Reaction conditions】
| 条件 Condition | 最佳 Optimum | 有效 Effective | | Mg2+ | 1-2 mM | 1-10 mM | | pH | 8-9 | 6-10
| | 温度/ Temperature | 37°C | 0-42°C | | DTT | 0-100 mM | >0 mM | | 巯基乙醇/ Mercaptoethanol | 0-100 mM | >0 mM | | 单价阳离子/ Monovalent cation | 0-20 mM | 0-150 mM | | 磷酸根离子/ Phosphate ion | 0-10 mM | 0-100 mM |
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【产品特性】
1、本品经利用大肠杆菌 Escherichia coli (E. coli)大规模发酵表达纯化,纯度>95%,可用于科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究,并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。
2、 本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20 mM Tris-HCl pH8.0,2mM MgCl2,20mM NaCl,50%甘油)中,无色透明液体。
【稳定性】
全能核酸酶在非常广泛的条件下,都能保持很高的稳定性和消化核酸的活性,这使其能够与多种细胞裂解液,如 RIPA,或含有多种离子和非离子型去污剂、还原剂的蛋白提取试剂等兼容。例如:>100mM 的盐酸胍会完全抑制活性,1mM 的 EDTA 会部分抑制活性,5mM 的EDTA 会使活性丧失 90%,1mM 的 PMSF 则不会抑制核酸酶活性。
【使用方法】
1、细胞处理/Cell processing:
a. 贴壁细胞去除培养基,用 PBS 洗后,1mL RIPA 裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解液)加1-2 μL全能核酸酶,室温或冰上孵育 5-30 min,收集裂解液,离心取上清即
可进行下游实验。
b. 悬浮细胞离心收集后,在离心管中加 1mL RIPA 裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解液)加 1-2 μL 全能核酸酶,室温或冰上孵育 5-30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
2、组织样品/Organizational samples: 将 30-100 mg 动物或者植物组织研磨充分后,加入 100-200 μL 裂解液,同时加入加 0.5-1 μL 全能核酸酶,室温或冰上孵育 5-30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
3、大肠杆菌或者其他细菌/Escherichia coli or other bacteria: 细菌离心收集后,用裂解液裂解或者研磨破碎后,每 1 mL 加 0.5-1μL 全能核酸酶,室温孵育 30 min,收集裂解液,离心取上清即可进行下游实验。
【用途和作用】
1、 去除疫苗类产品生产过程中的外源性核酸,提高产品的生物安全性;
2、 去除病毒颗粒表面缠绕的核酸,利于病毒颗粒的释放和纯化;
3、 降解细胞裂解液中的核酸,降低液体粘度,提高重组蛋白产量;
4、 处理用于 ELISA、电泳等分析,或柱层析纯化的样品,提高分辨率和回收率。
【注意事项 】
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
生物活性:效价: ≥250 U/μL。单位定义:在 37℃,pH 8.0 反应条件下,2.625 mL 反应体系中,在 30 min 内使△A260 吸收值变化 1.0 所用的酶量定义为一个活性单位(U)。
Accession #:P13717
级别:无载体, 生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™, 无菌
产品规格参数
储存缓冲液:20 mM Tris-HCl, 2mM MgCl2, 20mM NaCl, 50% Glycerol, pH8.0
浓度:≥250 U/uL
储存温度:-20°C储存,干燥,避免反复冻融
运输条件:超低温运输
稳定性与储存:-20℃储存(2年);收货后建议分装,避免反复冻融, 密封。
CAS编号和信息:9025-65-4
酶学委员会编号:3.1.30.2
功能和特点
Accession #:P13717
生物活性:效价: ≥250 U/μL。单位定义:在 37℃,pH 8.0 反应条件下,2.625 mL 反应体系中,在 30 min 内使△A260 吸收值变化 1.0 所用的酶量定义为一个活性单位(U)。
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关键字: 全能核酸酶 ; 核酸酶 ; 非限制性核酸内切酶 ; 广谱核酸酶
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