方法和结果:Conchocarpus fontanesianus (A. St.-Hill.)Kallunki&Pirani,芸香科,俗称pitaguará,是巴西圣保罗州和里约热内卢州的本土特有树种。基于抗胆碱酯衍生物可以作为治疗阿尔茨海默病的新原型的信息,这项工作描述了通过评估来自域塔内西娅的乙醇茎提取物的抗胆碱酯酶活性来指导的分馏。结论:该程序提供了生物碱 Dictamnine (1)、γ-fagarine (2)、skimianine (3) 和 2-phenyl-1-methyl-4-quinolone (4) 以及香豆素 marmesin (5)。
据报道,Dictamnine 是一种天然植物产品,对细菌和真菌具有抗菌活性;然而,人们对微生物的Dictamnine反应机制仍然知之甚少。方法和结果:我们已经证明,Dictamnine对模式真菌酿酒酵母具有抗菌活性,最低抑制浓度(MIC)值为64 μg/ml。商业寡核苷酸微阵列用于确定由Dictamnine处理触发的酿酒酵母的整体转录反应。我们使用分层聚类工具 T-profiler 来解释我们的微阵列数据。Dictamnine诱导了几个主要的转录反应。首先是诱导的环境胁迫响应,主要在Msn2p和Msn4p转录因子的控制下,以及含有PAC(RNA聚合酶A和C盒)和rRPE(核糖体RNA加工元件)基序的基因受到抑制的环境胁迫响应。第二个是涉及脂质生物合成的Upc2p介导的反应。第三个包括涉及多药耐药性 (MDR) 的 PDR3 和 RPN4 介导的反应。最后,用Dictamnine治疗诱导TBP介导的反应。结论:TBP是指导基因转录的重要通用转录因子。对选定的基因进行定量实时RT-PCR,以验证微阵列结果。此外,使用共聚焦激光显微镜检查了 Dictamnine 暴露于酿酒酵母 L1190 (MATa/alpha) 期间的形态转变。
白色念珠菌(C. albicans)和其他真菌是重要的人类和兽医病原体。方法和结果:检测Dictamnine单独使用和联合氟康唑(FLC)对临床22种临床白色念珠菌的最小抑制浓度(MIC),采用棋盘法分析Dictamnine和FLC联合使用的作用抑制浓度指数(FICI)。结论:结果表明,Dictamnine单独使用和与FLC联合使用对白色念珠菌均具有良好的抗真菌活性。
检测从 Dictamni Cortex 中提取和分离的乙醇提取物和 Dictamnine 的抗炎作用。方法和结果:采用高效离心分配色谱法分离必需的 Dictamnine,通过二甲苯诱导的小鼠 aruical 肿胀和小鼠腹部毛细血管通透性,研究乙醇提取物和 Dictamnine 的抗炎作用。采用己烷乙酸乙酯-乙醇-水(1∶1∶1∶1)组成的两相溶剂体系进行分离。用高效液相色谱仪测定得到的Dictamnine的纯度为98%。结果表明,与对照组相比,各添加量乙醇提取物均能显著抑制二甲苯肿胀引起的小鼠耳廓(P0.05),分别为44.26%、52.46%、44.26%。中等剂量组Dictamnine能明显抑制小鼠耳廓(P0.01),但与对照组相比,剂量在小鼠腹部毛细血管通透性上未显著增加。结论:HPCPC是一种推荐的制备和纯化方法,具有良好的分离效果,方法简单、准确且易于操作。结果表明,乙醇提取物和Dictamnine在多种动物模型的抗炎效果中均表现出不同的抗炎作用。
研究Dictamnine在体外诱导的肝毒性,并探讨其机制。方法与结果:HepG2细胞暴露于Dictamnine 2.5-800 μmol·L-1 24 h,MTT法检测细胞活力。通过检测乳酸脱氢酶(LDH)的释放率检测细胞膜损伤,并在造影显微镜下观察细胞膜损伤的形态变化。采用酶标记仪分别测定HepG2细胞培养物中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)和谷氨酰转肽酶(GGT)活性。通过激光扫描共聚焦荧光显微镜测量线粒体膜电位。结果 25-800 μmol· Dictamnine暴露后HepG2细胞活力显著降低L-1为24 h,呈浓度依赖性(r=0.965,P0.05),IC50值为(283±27)μmol·L-1.12.5-50 μmol· 暴露于Dictamnine后,HepG2细胞的LDH释放速率显著增加。L-1为24 h(P0.01)。HepG2细胞暴露于Dictamnine 100和200 μmol·L-1发生了很大的变化。细胞起皱又掉落。与对照组相比,Dictamnine 100和200 μmol后HepG2细胞培养物ALT和AST活性呈浓度依赖性显著升高(P0.05)(r=0.995,P0.05和r=0.996,P0.05)L-1 24 h,线粒体膜电位明显下降(r=0.978,P0.05)。暴露于Dictamnine 100和200 μmol·L-1 4 h,HepG2细胞培养物中GST活性显著升高(P0.05);24 h时,Dictamnine中的GST活性为50,100和200 μmol·L-1组的升高也呈浓度依赖性(r=0.987,P0.05)。暴露于Dictamnine 200 μmol·L-1 48 h,HepG2细胞培养物中GGT活性升高(P0.05)。结论:较高浓度(≥100 μmol·L-1)具有潜在的肝毒性。细胞膜损伤和线粒体膜损伤可能与Dictamnine诱导的肝氧性机制有关。
Dictamni Radicis Cortex 的甲醇提取物对鼠伤寒沙门氏菌 TA100 和 TA98 具有致突变作用。方法和结果:采用 Sephadex LH 20 色谱柱和硅胶柱层析法,采用制备型 TLC 分离 Dictamni Radicis Cortex 中的两种致突变化合物。这些通过UV、EI-Mass、1H-NMR鉴定为Dictamnine和γ-fagarine。Dictamnine 和 γ-fagarine 在菌株 TA100 和 TA98 中具有致突变性,其中 S9 混合物。剂量反应曲线在10-40μg范围内呈线性。结论:Dictamnine和γ-fagarine在TA100菌株中具有约50-70个可逆转菌落的特异性活性(His+/μg),而TA98菌株中约有30-50个可逆转菌落。
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刘盼盼