3.尽量避免实验过程中的损失或污染。
萃园生物科技 (biocuiyuan.com)
槲皮素(QR;槲皮素-3-O-鼠李糖苷)以前曾被用作抗菌剂,并已被证明可以抑制低密度脂蛋白的氧化并防止过敏反应。此外,研究表明,槲皮苷对 H2O2 诱导的肺成纤维细胞功能障碍具有保护作用。然而,槲皮素对癌细胞增殖和凋亡的作用机制尚不清楚。本研究的目的是研究槲皮苷的细胞毒性和凋亡作用以及槲皮素诱导的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系凋亡的分子机制。方法和结果:通过 WST-1 细胞增殖测定、乳酸脱氢酶 (LDH) 细胞毒性测定、核小体富集因子测定、caspase-3 活性的变化、线粒体膜电位 (MMP) 的丧失以及磷脂酰丝氨酸在质膜中的定位来测定槲皮素的时间和剂量依赖性抗增殖和凋亡作用。通过Illumina Human HT-12v4 beadchip微阵列检查全基因组基因表达水平的变化。 在 A549 和 NCI-H358 NSCLC 细胞中,槲皮素对槲皮素的响应显着增加 caspase-3 活性显着增加、MMP 丢失和凋亡细胞群增加,且呈时间和剂量依赖性方式。结论:NCI-H358和A549细胞中参与白细胞跨内皮迁移、细胞粘附和磷脂酰肌醇信号系统通路的基因是最具统计学意义的通路。这些结果表明,槲皮苷通过调节免疫反应对肺癌细胞具有抗增殖和凋亡作用。在体内证实其抗癌作用后,槲皮素可能成为一种新型且强效的抗癌药,可对抗非小细胞肺癌。
评价槲皮素和脱氧野尻霉素(DNJ)的协同作用以及它们对变形链球菌毒力途径的单独抑制作用。方法和结果:采用微量稀释法测定两种化合物的MICs,然后使用CHECKERBOARD和TIME KILL法进行体外协同作用。根据分数抑制浓度指数(FICI)值为≤0.5,相互作用的性质被分类为协同作用。此外,还分别评估了槲皮素和DNJ的活性,并结合变异链球菌UA159的各种致腐特性,如产酸性、酸尿率、葡聚糖产生、疏水性、生物膜和粘附性。此外,通过定量RT-PCR(qRT-PCR)分析了变形链球菌中毒力基因的表达,并评估了F1F0-ATP酶、乳酸脱氢酶和烯醇化酶的抑制作用。最后,采用扫描电子显微镜(SEM)技术研究了生物膜的结构湮灭。 观察到槲皮精与DNJ的体外协同作用,FICI为0.313。它们的MIC值分别为64μg/ml和16μg/ml。与单独使用槲皮菌素和 DNJ 相比,协同组合始终对所有毒力因子表现出最佳活性。在生长的不同阶段观察到葡聚糖合成和生物膜形成减少。qRT-PCR显示各种毒力基因显著下调。电子显微照片描绘了与对照组相比,生物膜的湮灭,并且致龋酶的活性也受到抑制。结论:整个研究反映了槲皮素和 DNJ 联合使用作为抗变形链球菌的强效抗龋活性剂的前景。
槲皮素是一种常见的抗氧化剂类黄酮,存在于蔬菜中,通常以糖基化形式存在,如槲皮素(3-鼠李糖基槲皮素)。先前的体外实验表明,槲皮素在下调炎症反应方面比槲皮素发挥更大的作用。 然而,这样的结果尚未在肠道炎症的体内实验模型中得到重现,其中槲皮素没有显示出有益的作用,而其糖苷、槲皮素或芦丁已经证明了它们的有效性。方法和结果:在这项研究中,我们报道了右旋糖酐硫酸钠诱导的大鼠结肠炎实验模型中槲皮素的体内作用可以通过肠道菌群裂解糖苷后产生的槲皮素的释放来介导。槲皮素(但不是槲皮素)能够在体外下调骨髓来源的巨噬细胞的炎症反应,这一事实支持了这一点。此外,我们已经证明,槲皮素通过抑制 NF-κB 通路来抑制细胞因子和诱导型一氧化氮合酶表达,而不改变 c-Jun N 末端激酶活性(在体外和体内)。结论:作为结论,我们的报告表明,槲皮素释放槲皮素以发挥其抗炎作用,这是通过抑制 NF-κB 通路介导的。
本研究探讨了槲皮素(QE)对RAW264.7巨噬细胞氧化应激诱导的细胞毒性作用的保护机制。方法和结果:Western blotting结果显示,QE而非其糖苷芦丁(RUT)和喹西林诱导的HO-1蛋白表达呈时间和剂量依赖性方式,QE诱导的HO-1蛋白被添加环己酰亚胺或放线菌素D阻断。 QE诱导HO-1基因表达伴有诱导ERKs,但未伴有JNKs或p38, 蛋白质磷酸化。添加 PD98059,但不添加 SB203580或SP600125,显着减弱 QE 诱导的 HO-1 蛋白和与阻断磷酸化 ERKs 蛋白表达相关的 mRNA 表达。通过MTT测定,H(2)O(2)添加降低了细胞的活力,并检测到DNA分子量标准、亚二倍体细胞的出现和细胞内过氧化物水平的增加。添加 QE,但不添加 QI 或 RUT,显着降低了 H(2)O(2) 诱导的细胞毒性作用,这些效应与阻断细胞内过氧化物、DNA ladder 和亚二倍体细胞的产生有关。添加HO抑制剂SnPP或ERKs抑制剂PD98059显著抑制了H(2)O(2)诱导的细胞凋亡的QE保护。此外,QE 可保护细胞免受 H(2)O(2) 诱导的线粒体膜电位降低和细胞色素 c 从线粒体释放到胞质溶胶的影响,分别通过 DiOC6 和 Western 印迹测定。通过蛋白质印迹法和酶活性测定法在 H(2)O(2) 处理的细胞中发现了包括 caspase 3、caspase 9、PARP、D4-GDI 蛋白在内的凋亡蛋白的激活,并且添加 QE 可显着阻断该蛋白,但 RUT 和 QI 未阻断。此外,HO-1催化代谢物一氧化碳(CO),而非Fe(2+)、Fe(3+)、胆绿素或胆红素,对H(2)O(2)诱导的细胞死亡具有保护作用,增加HO-1蛋白表达和ERKs蛋白磷酸化。结论:HO-1蛋白的诱导可能参与QE对氧化应激(H(2)O(2))诱导的细胞凋亡的保护机制,参与细胞内ROS产生减少和线粒体功能障碍阻断凋亡事件。还描绘了 QE 及其糖苷 RUT 和 QI 通过不同的 HO-1 蛋白诱导产生的不同抗凋亡作用。
槲皮素是最丰富的生物类黄酮化合物,主要以槲皮苷的形式存在于槲皮素的糖苷形式中。尽管不同的研究表明槲皮苷是一种有效的抗氧化剂,但这种化合物的作用尚不清楚.在这项研究中,我们研究了槲皮苷是否在 DLD-1 结肠癌细胞系中具有凋亡和抗增殖作用。方法和结果:随后通过 WST-1 细胞增殖试验、乳酸脱氢酶 (LDH) 细胞毒性试验、核小体富集因子检测、caspase-3 活性变化、线粒体膜电位 (MMP) 丧失以及磷脂酰丝氨酸 (PS) 在质膜中的定位来确定槲皮素的时间和剂量依赖性抗增殖和凋亡作用。DLD-1 结肠癌细胞中 caspase-3 活性显着增加,MMP 丢失,凋亡细胞群响应于 DLD-1 结肠癌细胞,呈时间和剂量依赖性方式增加。结论:这些结果表明,槲皮苷对结肠癌细胞具有抗增殖和凋亡作用。体内分析支持的槲皮素活性可能是早期结直肠癌的生物标志物。
黄酮类化合物是天然抗氧化剂,对骨骼代谢有积极影响。本研究通过筛选不同的黄酮类化合物,鉴定出在骨再生中具有潜在用途的生物分子。为此,我们使用 MC3T3-E1 和 RAW264.7 细胞来评估它们对细胞活力和细胞分化的影响。方法和结果:首先,分析不同剂量的白杨素、薯蓣美汀、高良姜苷、槲皮素和紫杉叶素,确定诱导成骨细胞分化的最佳浓度。处理48小时后,剂量≥100μM的薯蓣素和高良周素以及500μM紫杉叶素对细胞有毒性作用。在处理14天后用≥100μM白杨素剂量处理的细胞中观察到相同的效果。然而,安全剂量的槲皮苷(200 和 500μM)和紫杉叶素(100 和 200μM)诱导骨唾液蛋白和骨钙素 mRNA 表达。此外,与对照样品相比,在100μM紫杉叶林成骨细胞处理的样品中测定了更高的骨钙素分泌水平。另一方面,槲皮素和紫杉叶素降低了成骨细胞中Rankl基因的表达,表明抑制了破骨细胞的形成。事实上,在 RAW264.7 细胞中观察到槲皮素和紫杉叶林处理抑制破骨细胞生成。结论:基于这些发现,本研究表明,槲皮素和紫杉叶素可促进MC3T3-E1细胞成骨细胞分化,同时抑制RAW264.7细胞的破骨细胞生成,表明这些黄酮类化合物对骨代谢具有积极作用。
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刘盼盼