
维百奥生物库存现货,特价销售Puromycin Sterile 1mL!
| 产品信息
品名:Puromycin Sterile 1mL
品牌:MCE
货号:HY-K1057
规格:1 ml
| 产品描述

MCE 即用型嘌呤霉素无菌溶液,已过滤除菌,可直接用于细胞培养。嘌呤霉素来源于白黑链霉菌(Streptomyces alboniger),是一种氨基糖苷类抗生素,可以通过抑制蛋白质合成从而杀死多数革兰氏阳性菌及各种动物或昆虫细胞,在某种特殊情况下也可有效作用于大肠杆菌。
嘌呤霉素被广泛用作哺乳动物细胞培养系统中的筛选抗生素。其抗性来自于嘌呤霉素产生(Streptomyces alboniger)内发现的 pac 基因,将此基因导入细胞可使细胞获得嘌呤霉素抗性,从而用于筛选和维持培养携带 pac 基因的哺乳动物稳定转染细胞株。在某些特定情况下,也可以用来筛选表达 pac 基因的大肠杆菌菌株。
| 操作流程
1. 嘌呤霉素溶液的工作浓度需要根据细胞类型、培养基、生长条件和细胞代谢率而适当调整。
2. 对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),来确定最佳筛选浓度
1) 以 20-25% 的细胞密度铺板,铺足够量的孔以进行后续的梯度实验,37℃孵育过夜。
2) 准备含梯度浓度嘌呤霉素的新鲜培养基为筛选培养基,至少 5 个梯度。
3) 细胞过夜培养后,使用上述配制的筛选培养基替换旧培养基,孵育细胞。 每个浓度做 3 个平行对照。
4) 约 2-3 天更换新鲜的筛选培养基。每日监测细胞,观察活细胞比例。通常 7-10 天内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为筛选用的工作浓度。
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