以台盼蓝死/活细胞染色和显微图像识别为基本工作原理的细胞计数仪被广泛应用于生物技术 产业中,用于取代人工显微镜计数方法,具有操作简便、测量快捷、参数多样等优点。本标准物质 主要用于台盼蓝原理显微图像式细胞计数仪的活/死细胞浓度与活细胞比例测量项目的校准或相关 检测测量质量评价等工作。
一、 样品制备
本标准物质候选物采用模拟台盼蓝原理的活/死细胞的高分子聚合物微球为原料,通过特殊工艺 进行处理,得到一定细胞浓度与比例的微球溶液,在无菌洁净环境条件下通过移液器进行分装。
二、 溯源性及定值方法
本溶液标准物质的活/死细胞浓度与活细胞比例采用显微镜直接计数法进行定值。通过使用显微 镜人工镜检计数细胞计数板固定体积内总细胞模拟微球和活/死细胞模拟微球的数量,通过计算得到 活/死细胞浓度值与活细胞比例值。通过使用经确认的、满足计量学特性要求的测量方法和经检定校 准的显微镜、细胞计数板等计量器具,确保本标准物质的量值溯源至实体数基本单位“ 一”(符号:1)。
三、 特性量值及不确定度
编号
名称
标准值
扩展不确定度(k=2)
NIM-RM
台盼蓝染色原理模拟活/死细 胞浓度与比例标准物质(I)
活细胞浓度
1018 个/μL
145
活细胞比例
100.00%
0.44%
台盼蓝染色原理模拟活/死细 胞浓度与比例标准物质(II)
死细胞浓度
981 个/μL
54
0.03%
0. 14%
所赋特性量值的不确定度综合考虑了显微镜细胞板直接计数法测量重复性、均匀性和稳定性等 不确定度分量。
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