CellROX Green Reagent，for oxidative stress detection氧化应激检测用探针，实验步骤

参数信息

状态：浅黄色溶液

溶剂：DMSO

Ex/Em：485/520 nm

激发/发射光谱范围：可见光/可见光

亚细胞定位：线粒体、细胞核

纯度：≥95%

储存条件：-20℃避光干燥

实验步骤

样本准备

活细胞：常规培养，弃培养基后用PBS洗1次。

组织切片：石蜡或冰冻切片，透化处理以增强探针渗透。

染色流程

按说明书稀释Celirox Green（浓度：1-10 μM），避光孵育30分钟（活细胞）或1小时（固定样本）。
PBS洗涤去除未结合探针。

检测设置

激发/发射波长：常见为 Ex/Em 488 nm/520 nm。

（成像建议：使用荧光显微镜（配备蓝光激发滤片）或流式细胞仪（绿色通道检测）。

注意事项

1. 避光操作：光照可能导致荧光淬灭，建议全程使用避光容器及铝箔包裹样品。

2. 浓度调整：过量探针可能引起非特异性结合，建议通过梯度浓度预实验。

3. 对照设置

阳性对照：加入H₂O₂或脂多糖（LPS）诱导氧化应激。

阴性对照：使用抗氧化剂（如NAC）处理样本。

4. 背景干扰

若背景过高，可缩短孵育时间或增加洗涤次数。

某些细胞类型需预实验。