甘油三酯(triglyceride, TG)含量测定试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
TG 是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。
测定原理:
用异丙醇提取 TG,脂蛋白酯酶水解 TG 生成甘油和脂肪酸(FFA),甘油与三磷酸腺苷在甘油激酶和 磷酸甘油氧化酶催化下生成 H2O2,过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合 物,在 505 nm 处有特征吸收峰。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液枪、1ml 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水
TG 的提取:
1、组织中 TG 的提取:按照组织质量(g):试剂一体积(ml)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织, 加入 1ml 试剂一)进行冰浴匀浆,8000g,4℃离心 10min,取上清,即 TG 待测液。
2、细胞、细菌中 TG 的提取:先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内,离心后弃上清,加 1ml 试剂一, 超声波破碎 1min(强度 20%,超声 2s,停 1s),8000g,4℃离心 10min,取上清,即 TG 待测液。
3、血清(浆)样品:直接测定。
伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司
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