总糖含量试剂盒说明书
微量法 100 管/96 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖也可称为碳 水化合物,包括可溶性的单糖,二糖以及不溶性的淀粉,纤维素,几丁质等。
测定原理:
总糖酸水解为还原糖,在 NaOH 和丙三醇存在下,DNS 试剂与还原糖共热后被还原成氨基化合物,在 过量的 NaOH 碱性溶液中呈桔红色,在 540nm 处有最大吸收峰,以此测定样品中的总糖含量。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、沸水浴、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、蒸馏水。
样品中总糖的提取:
组织:称取约 0.1g 样品,加入 1ml 试剂一,1.5ml 蒸馏水,匀浆,95℃水浴中加热 30min,加入 1ml 试剂二,混匀,用蒸馏水定容至 10ml,8000g 25℃离心 10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项) 液体样本:取 0.1ml 样本,加入 1ml 试剂一,1.5ml 蒸馏水,匀浆,95℃水浴中加热 30min,加入 1ml 试 剂二,8000g 25℃离心 10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项)
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
2、调节水浴锅至 95 度。
伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司
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