SimpleChIP? Plus 超声法染色质免疫沉淀试剂盒

产品概述

SimpleChIP® Plus Sonication Chromatin IP Kit 是基于染色质免疫沉淀（Chromatin Immunoprecipitation, ChIP）技术开发的完整试剂解决方案，专为研究体内蛋白质与DNA相互作用而设计。该试剂盒通过优化超声破碎（Sonication）技术实现染色质片段化，结合高特异性抗体与免疫沉淀（IP）技术，可精准富集与目标蛋白结合的DNA片段，适用于表观遗传学、转录调控及基因组功能研究。

技术原理与优势

1. 超声破碎染色质制备

• 采用物理剪切方式，通过优化超声参数（如功率、循环次数），将交联的染色质断裂为200-1000 bp的片段（对应1-5个核小体长度），完整保留蛋白质-DNA相互作用界面。

• 配套专用细胞与细胞核裂解缓冲液，最大限度减少非特异性片段化，尤其适用于转录因子、辅因子等瞬时结合蛋白的研究，避免过度超声导致的表位破坏。

2. 免疫沉淀系统优化

• 包含ChIP级Protein G磁珠（Magnetic Beads），提供低背景、高结合容量的纯化平台，支持手动或自动化操作。

• 预装经ChIP验证的阳性对照（Histone H3抗体）与阴性对照（Normal Rabbit IgG），确保实验可重复性；配套人/小鼠核糖体蛋白L30（RPL30）基因引物，作为通用阳性对照靶标。

3. 下游分析兼容性

• 纯化后的DNA片段可直接用于qPCR、ChIP-seq、微阵列杂交（ChIP-chip）等分析，覆盖从靶向验证到全基因组定位的全流程需求。

实验流程与性能

• 样本处理：支持4×10⁶细胞或25 mg组织起始量，通过甲醛固定交联蛋白质-DNA复合物，经超声破碎后获得可溶性染色质。

• 免疫沉淀：使用ChIP验证抗体（如组蛋白修饰抗体、转录因子抗体）孵育，结合磁珠捕获目标复合物。

• 解交联与DNA纯化：通过离心柱法高效回收DNA，省略传统酚氯仿提取步骤，减少样本损失。

• 数据分析：阳性对照Histone H3抗体可富集全基因组广泛分布位点，阴性对照评估非特异性结合，确保结果可靠性。

应用领域

1. 表观遗传学研究：分析组蛋白修饰（如乙酰化、甲基化）的基因组分布。

2. 转录调控机制：定位转录因子结合位点，解析基因表达调控网络。

3. 药物靶点发现：鉴定疾病相关蛋白的DNA结合特性，辅助药物开发。

4. 环境因子响应：研究染色质结构动态变化对外部刺激的应答。

质量控制与支持

• 试剂盒组分均通过严格质检，包含DNA酶、蛋白酶抑制剂及缓冲液体系，确保染色质完整性。

• 提供详细实验方案与技术支持，兼容多种细胞类型（哺乳动物、酵母等）及组织样本。

总结

SimpleChIP® Plus Sonication Chromatin IP Kit 整合了超声破碎、免疫沉淀及DNA纯化技术，以标准化流程与高稳定性试剂为核心，为研究者提供从染色质制备到数据分析的全链条解决方案。其卓越的特异性与灵敏度，使其成为表观遗传学、功能基因组学及生物医学研究领域的核心工具。