产品描述
gelred是一种独特的油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内。不易挥发升华,人体不会吸入。艾姆斯氏测试结果也表明gelred在凝胶染色浓度下完全无诱变性,相对于EB的强致癌性是一种安全无毒的核酸染料。gelred与EB具有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置(普通紫外凝胶透射仪),在300nm处紫外光激发检测即可。gelred适用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的dsDNA,ssDNA以及RNA染色,可以选择胶染法或泡染法进行染色,使用非常方便和灵活。
使用方法
一、胶染法(同EB,电泳前染色)
1) 制胶时加入gelred 核酸染料(每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL gelred 10,000×水溶液)。
2) 按照常规方法进行电泳。
注意事项
1)此方法比较节省染料,500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。
2) 由于gelred具有良好的热稳定性,可以直接添加到热的琼脂糖溶液中而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将gelred储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。
3)gelred兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
4)含有染料的预制凝胶溶液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
5)如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
6)胶染法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
二、泡染法(电泳后染色)
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用H2O将gelred 10,000×水溶液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(如将15μL gelred 10,000×水溶液和 5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
3.将凝胶小心地放入合适的容器中,缓慢加入足量的3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,染色时间根据凝胶厚 度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5~10%聚丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min到1h,并随聚丙烯酰胺含 量增加而延长。
注意事项
1)用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
2)3× gelred染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
关键字: Biotium原装 41003 Gelred
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