GAPDH (D4C6R) 小鼠单克隆抗体

产品概述

GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是糖酵解途径的关键酶，催化甘油醛-3-磷酸转化为1,3-二磷酸甘油酸。GAPDH (D4C6R) Mouse mAb（货号：97166S）是由Cell Signaling Technology (CST)研发的高特异性单克隆抗体，通过偶联辣根过氧化物酶（HRP）实现信号放大，广泛用于Western Blotting检测内源性GAPDH蛋白。该抗体以人工合成肽段（对应人类GAPDH氨基端序列）为免疫原，可识别多种物种（人、小鼠、大鼠、猴）的GAPDH蛋白，是科研实验中校正蛋白表达量的经典内参工具。

核心技术特性

1. 高特异性结合

• 靶向GAPDH蛋白氨基端功能区，避免非特异性结合。

• 经多物种组织/细胞系（如HeLa、NIH/3T3、COS-7）验证，确保交叉反应可靠性。

2. 灵敏度与稳定性

• 检测限低至ng级蛋白量，适用于微量样本分析。

• -20℃保存有效期24个月，反复冻融稳定性佳，支持长期实验规划。

3. 应用灵活性

• 稀释比例：Western Blotting推荐1:1000，可根据实验需求调整至1:5000。

• 兼容复杂样本：如全细胞裂解液、亚细胞组分，适应多样化研究场景。

科学应用领域

1. 基础代谢研究

• 监测GAPDH酶活性变化，解析糖酵解调控机制。

• 作为内参蛋白，校正Western Blotting实验中上样量差异，确保结果准确性。

2. 疾病机制探索

• 神经退行性疾病：GAPDH在亨廷顿病、阿尔茨海默病中表达异常，参与病理过程。

• 癌症研究：作为肿瘤代谢重编程标志物，揭示癌细胞能量代谢特征。

3. 药物开发支持

• 靶点验证：评估药物对GAPDH表达或活性的影响，指导药物筛选。

• 机制研究：解析药物干预对细胞代谢通路的影响。

标准化操作流程

1. 样本制备

• 细胞裂解：使用含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液，冰上操作避免蛋白降解。

• 定量：BCA或Bradford法测定蛋白浓度，确保上样量一致性。

2. 抗体孵育与检测

• 一抗稀释：按1:1000比例加入GAPDH (D4C6R) Mouse mAb，4℃过夜或室温2小时。

• 二抗选择：推荐CST HRP标记抗小鼠IgG（#7076），稀释比1:2000-1:5000。

• 显影：ECL化学发光底物，凝胶成像系统曝光，获取高信噪比结果。

严格质量控制

• 纯度验证：SDS-PAGE显示单一重链（50 kDa）和轻链（25 kDa）条带，无杂带干扰。

• 无菌检测：内毒素含量≤0.1 EU/mL，避免细胞毒性影响。

• 批间一致性：先进生产工艺确保每批次抗体性能稳定，重复实验结果可靠。

注意事项与技术支持

• 避免反复冻融，建议分装后使用以延长抗体活性。

• 特殊物种（如灵长类）应用前，需通过Western Blotting验证交叉反应性。

• CST提供中英文双语技术支持及全球物流支持，官方网站提供实验协议、应用笔记等资源，助力科研工作者高效解决实验难题。

总结

GAPDH (D4C6R) Mouse mAb凭借其高特异性、灵敏度及稳定性，已成为生命科学研究中不可或缺的工具抗体。从基础代谢研究到疾病机制探索，再到药物开发领域，该产品均展现出卓越的应用价值，为科研工作者深入解析细胞代谢与疾病机制提供有力支持。