Pharmalyte pH 5-8 缓冲液

产品概述

PHARMALYTE 5-8（货号：17045301）是Cytiva（原GE Healthcare）生产的高性能两性电解质缓冲液，专为等电聚焦（Isoelectric Focusing, IEF）电泳设计。该产品覆盖pH 5-8的宽范围，能够形成连续的pH梯度，精准分离具有不同等电点（pI）的蛋白质、多肽及其他两性分子，广泛应用于蛋白质组学研究、疾病标志物发现及生物制药质量控制等领域。

核心技术特性

1. 宽pH范围覆盖

• 覆盖pH 5至8的线性梯度，适用于大多数生物样本中蛋白质的等电点分布（多数蛋白质pI位于4-7之间）。

• 梯度稳定性高，电泳过程中pH变化≤0.1单位，确保分离结果的重现性。

2. 高缓冲容量

• 含多种两性离子（如AMPHOLINE™聚合物），可有效抵抗电泳过程中的pH波动，维持稳定的分离环境。

• 缓冲容量达50-70 mEq/L，支持长时间电泳（>12小时）而不发生梯度崩溃。

3. 低背景干扰

• 无荧光背景，兼容考马斯亮蓝、银染及荧光染色等多种检测方式。

• 离子强度低（<10 mS/cm），减少对下游质谱分析（如MALDI-TOF）的抑制作用。

4. 即用型配方

• 预混两性电解质与尿素、Nonidet P-40等添加剂，简化实验流程。

• 无需额外调节pH或添加载体两性电解质，直接稀释使用。

科学应用领域

1. 蛋白质组学研究

• 一维等电聚焦-二维SDS-PAGE（2D-PAGE）的核心试剂，用于构建高分辨率蛋白质图谱。

• 分离复杂样本（如血清、细胞裂解液）中的低丰度蛋白，提升疾病标志物发现效率。

2. 生物制药质量控制

• 监测单抗药物电荷异构体，确保批次间一致性。

• 分析重组蛋白翻译后修饰（如脱酰胺、氧化），优化生产工艺。

3. 临床诊断开发

• 分离疾病相关蛋白变体（如糖基化异常蛋白），辅助诊断试剂盒开发。

• 结合免疫印迹技术，检测自身免疫病相关自身抗体。

操作优势

1. 兼容性广泛

• 适用于多种等电聚焦系统（如IPGphor、ZOOM® IEF系统）。

• 可与IPG胶条（pH 3-10 NL、pH 4-7）联用，扩展分离范围。

2. 实验流程简化

• 无需预平衡步骤，直接与样本混合后上样。

• 支持快速电泳模式（如1小时聚焦程序），缩短实验周期。

3. 结果可重复性高

• 批间CV值<5%，满足定量蛋白质组学研究需求。

• 提供详细实验协议及梯度优化指南，降低操作误差。

使用注意事项

• 避免反复冻融，分装后-20℃保存可延长有效期至24个月。

• 电泳前需彻底脱气，防止气泡干扰聚焦过程。

• 高盐样本（>150 mM NaCl）需预先透析或超滤处理，避免电流过大。

质量控制

• 每批次产品均通过HPLC检测纯度（>95%），并验证pH梯度形成能力。

• 无内毒素（<0.1 EU/mL），支持细胞实验及体内研究。

• 提供COA（分析证书）及SDS（安全数据表），确保合规使用。

总结

PHARMALYTE 5-8凭借其宽pH范围、高缓冲容量及低背景干扰特性，已成为等电聚焦电泳领域的标杆产品。从基础蛋白质组学研究到生物制药开发，该产品为科研工作者提供了高效、可靠的分离工具，助力揭示生命活动的分子机制。