Tris抗原修复液(10×,pH9.5)
简介:
柠檬酸盐、EDTA或Tris等缓冲液在热的条件下可以使被福尔马林屏蔽的抗原重新暴露出来,同时又不会对抗原表位造成破坏,从而提高抗原的检出率,降低背景染色,提高诊断的准确率。
Tris抗原修复液(10×,pH9.5)由Tris、微量Tween20等组成,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其他醛类试剂固定后的抗原修复。抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。当冰冻切片免疫染色效果不理想时,可考虑进行抗原修复。按照每个片子需要10ml抗原修复液(1×)计算,100ml抗原修复液(10×)可以用于100个样本的抗原修复。
组成:
产品名称 | IH027-100ml | Storage |
Tris抗原修复液(10×,pH9.5) | 100ml | 4℃ |
说明书 | 一份 |
保存条件:
4℃保存,一年有效
自备材料:
1、系列乙醇
2、双蒸水或去离子水
3、加热设备
4、免疫染色洗涤液
操作步骤(仅供参考):
一)石蜡切片
1、脱蜡至水
①二甲苯3次,每次3~5min。
②无水乙醇脱水,每次3~5min。
③95%乙醇脱水,每次3~5min。
④85%乙醇脱水,每次3~5min。
⑤75%乙醇脱水,每次3~5min。
⑥蒸馏水水冲2次,每次3~5min。
2、抗原修复
①用去离子水或双蒸水稀释Tris抗原修复液(10×,pH9.5)至1×。
②将切片浸泡在Tris-EDTA抗原修复液(1×)中,加热约10~30min。
③抗原修复液(1×)使用前需预热。如果使用微波炉加热,避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20~30min内冷却至室温。
3、免疫染色洗涤液洗涤1~2次,每次3~5min。
4、封闭等后续的免疫染色步骤。
二)冰冻切片:
1、用去离子水或双蒸水稀释Tris抗原修复液(10×,pH9.5)至1×。
2、免疫染色洗涤液洗涤切片5min。
3、将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95℃或沸水加热约10~30min。
4、抗原修复液(1×)使用前预热至95~100℃。如果使用微波炉加热,避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20~30min内冷却至室温。
5、免疫染色洗涤液洗涤1~2次,每次3~5min。
6、进行封闭等后续的免疫染色步骤。
三)其它样品:
其他样品参考石蜡切片或冰冻切片进行操作。
注意事项:
1、浸泡在抗原修复液(1×)中,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、本产品仅供科研使用,严禁它用。
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