成骨细胞矿化结节染色液（茜素红S法）

成骨细胞矿化结节染色液(茜素红 S 法)

 简介：

成骨细胞分化是其主导骨形成的前提与基础。在成骨分化过程中，其最基本的生物学特征是骨基质合成、分泌、矿化及成熟，而矿化结节是成骨细胞分化成熟的标志，同时也是成骨细胞行使成骨功能的主要形态学表现，观察成骨细胞的矿化结节是研究成骨细胞分化的常用手段之一。成骨细胞矿化结节染色常用方法有四环素法和茜素红S法，应用茜素红溶液对成骨细胞染色，茜素红可与钙离子螯合，产生深红色或紫红色的复合物，可用于鉴定干细胞是否已成功向成骨细胞分化。 

组成：

保存条件：

室温,避光保存,12个月有效。

自备材料：

1、磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁)

2、蒸馏水

3、显微镜

操作步骤(仅供参考)： 

1、成骨细胞经培养，胰酶消化，接种培养于 6 孔板中，每孔有 1×10 5 个细胞。

2、细胞连续观察、换液，培养 14 天。

3、小心吸除培养液，加入足量 Ob 固定液固定。

4、磷酸缓冲盐溶液(1×PBS)洗涤各孔 3 次，每次。

5、加入茜素红 S 染色液染色 30min，可根据染色情况酌情增加或减少染色时间。

6、蒸馏水洗去染色液。肉眼可见细胞呈明显的紫红色。

7、光镜下观察拍照。 

染色结果：

钙结节：紫红色-深红色  

注意事项：

1、茜素红 S 染色时间要根据钙盐的含量来确定。一般 30min 即可。

2、Ob 固定液宜挥发，开启后应密封保存；如使用量大可用 95%乙醇替代。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4、本产品仅由于科研，严禁他用。