胰蛋白酶溶液(1%)
简介:
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶,能够继续活化更多胰蛋白酶原,这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作,它会将蛋白质水解为肽,进而分解为氨基酸,其最适温度约为 37℃。可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化,通常室温下 1min 左右就可以消化下大多数贴壁细胞
组成:
产品名称 | 规格 | Storage |
Trypsin solution(1%) | 100ml | -20℃ |
说明书 | 一份 |
自备材料:
1、 PBS、Hanks 液或无血清培养液
2、 显微镜
3、 离心机
操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量Trypsin solution,略盖过细胞即可,不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入Trypsin solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。
2、组织的消化 不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
3、改良Tyrode's Solution(无钙)如果产生少许沉淀,可以加热溶解或过滤后使用,产生大量沉淀应弃用。
4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
注意事项:
尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
2. 在使用Trypsin solution 过程中,要特别注意避免消化液被细菌污染。
3. Trypsin solution 消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
关键字: 胰蛋白酶溶液;
伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司,成立于2019年,坐落于新亚欧大陆桥东方桥头堡连云港市。公司由资深行业专家和双一流高校博士联合创办,主要从事生化检测、病理检测和原料酶等相关试剂的研发和生产。
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