糖原PAS染色液

糖原PAS染色液

简介：

糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该染色试剂盒不仅能够显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂，它能氧化糖类及有关物质中的1，2-乙二醇基，使之变为二醛，醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物，产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质，使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间，使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化，这是很关键的步骤。  

BIOISCO糖原PAS染色液(培养细胞专用)专门用于培养细胞的染色，是采用BIOISCO特有配方技术，大大增强了染色效果；性能稳定，特异性强；操作简捷，仅需1h;。该试剂适用于科研领域，不适用于临床诊断。

组成：

保存条件：。

一年有效。

自备材料：

1、10%福尔马林固定液

2、蒸馏水

3、系列乙醇

操作步骤(仅供参考)：

1. 常规固定，常采用10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。

2. 石蜡切片二甲苯或脱蜡透明液脱蜡入蒸馏水﹔冰冻切片直接入蒸馏水。

3. 自来水冲洗2~3min，再用蒸馏水浸洗2次。入过碘酸溶液室温氧化。

4. 入过碘酸溶液室温放置5~8min，一般不宜超过10min。

5. 自来水冲洗1次，再用蒸馏水浸洗2次。

6. 入Schiff Reagent置于室温阴暗处浸染10～20min，自来水冲洗10min。

7. 入苏木素染色液，染细胞核1~2min，酸性乙醇分化液分化2~5s。

8. 自来水冲洗10~15min，更换蒸馏水清洗，使其返蓝。

9. 逐级常规乙醇脱水，二甲苯或脱蜡透明液透明，中性树胶封固。

染色结果：  

备注：颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间的长短。  

阴性对照(可选)：

1、取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3)100ml，处理30~60min，与其他切片共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。

2、(备选方案)取唾液片(过滤后用)处理30~60min，与其他切片共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。

3、(备选方案)如果对照片采用其自身样本，对照片不经过碘酸溶液这一步，直接入SchiffReagent，结果应为阴性。

注意事项：

1. 过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时的温度以18～22℃最佳。

2. 过碘酸溶液、SchiffReagent、苏木素染色液应置于4℃密闭保存，使用时避免接触过多的阳光和空气，使用前最好提前30min取出恢复至室温，避光暗处使用。

3. 过碘酸和Schiff中作用时间非常重要，该依据切片厚薄、细胞或组织的类别等决定。

4. 本试剂常用于细胞、极其薄的切片，如果常规切片建议采购糖原PAS染色液。

5. 切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。

6. 酸性乙醇分化液应经常更换新液，其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和分化液的新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够。

7. 冷冻切片染色时间尽量要短。