【产品名称】
商品名称：禽传染性支气管炎病毒(AIBV)核酸试剂盒（荧光 PCR 法）
【包装规格】25T/盒、50T/盒
【检验原理】 本试剂盒采用 TaqMan 探针法实时荧光 PCR 技术，根据禽传染性支气管炎病毒基因设计特异性引物和荧光探针，用荧光 PCR技术对禽传染性支气管炎病毒的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染病料的病原学诊断。
【试剂组成】
包装规格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
反应液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶液 | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
阳性质控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
阴性质控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
说明：不同批号的试剂盒组分不可交互使用
【储存条件及有效期】
-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。
【适用仪器】 ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
【使用方法】
1.样品处理（样本处理区）
核酸提取 推荐采用核酸提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提取， 请按照试剂说明书进行操作。
2.试剂配制（试剂准备区） 根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；反应管数 每满 10 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：
将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中，20μL/管。
3.加样（样本处理区） 将步骤 1 提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取 5μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀， 短暂离心。
4.PCR 扩增（核酸扩增区）
2.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；
2.2 设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL； 荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM，淬灭通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光，选择 None 即可。
2.3 推荐循环参数设置：
步骤 | 循环数 | 温度 | 时间 | 收集荧光信号 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是 |
5.结果分析判定
5.1结果分析条件设定（请参照各仪器使用说明书进行设置，以分析 ABI7500 仪器为例） 反应结束后自动保存结果，根据分析后图像调节 Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值（用户可根 据实际情况自行调整，Start 值可设在 3～15、End 值可设在 5～20，使阈值线位于扩增曲线指数期，阴性质控 品的扩增曲线平直或低于阈值线），点击 Analyze 自动获得分析结果。
5.2结果判断
阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线；
阴性：样本检测结果无 Ct 值，且无特异性扩增曲线；
可疑：样本检测结果 40＜Ct 值≤45，建议重复检测，如果检测通道仍为 40值≤45，且曲线有明显的增长 曲线，判定为阳性，否则为阴性。
5.3 质控标准 阴性质控品：无特异性扩增曲线或无 Ct 值显示； 阳性质控品：扩增曲线有明显指数增长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
3. 检测方法的局限性
1. 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
2. 样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
3. 阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
4. 病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
5. 不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
6. 试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；
7. 本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
【注意事项】
1.所有操作严格按照说明书进行；
2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3.反应液应避光保存；
4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
我司的实时荧光探针法试剂盒种类齐全（涵盖禽病、猪病、马牛羊病和水产动物病原体检测），精准高效，多重检测（一重、双重、三重），现货供应欢迎广大新老客户前来选购。
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