精准检测,洞悉生命 - 上海心语生物科技有限公司 心语检测(XinYu BioDetect),您的可靠科研伙伴
项目 | 参数值 |
检测指标 | 小鼠中性粒细胞胞外诱捕网 (NETs) ELISA试剂盒 |
品牌 | 心语检测(XinYu BioDetect) |
应用物种 | 人Human, 小鼠Mouse, 大鼠Rat等 |
样本类型 | 血清, 血浆, 细胞上清, 组织匀浆等 |
试剂盒规格 | 48T/96T |
保存条件 | 2-8°C (未拆封) |
有效期 | 6个月 |
反应时间 | 1.5h |
服务 | elisa试剂盒均可免费代测,全程Elisa实验技术指导。 |
试剂盒检测范围、 OD值 | 具体请咨询在线客服 |
ELISA试剂盒的典型组成:
一个标准的ELISA试剂盒通常包含以下组件:
1、预包被微孔板: 96孔或48孔塑料板,孔内已预先包被好捕获抗体或抗原(根据类型而定)。这是反应发生的场所。
2、酶标二抗(或酶标检测抗体/抗原): 根据ELISA类型,提供辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的二抗(用于间接法或夹心法),或酶标抗原(用于竞争法)。
3、标准品: 已知精确浓度的抗原(或抗体)系列梯度溶液。用于绘制标准曲线,计算样本中待测物的浓度。
4、检测抗体(仅夹心法): 未标记的、针对抗原另一表位的抗体。
5、样品稀释液: 用于稀释样本,使其基质与标准品和缓冲体系匹配,减少非特异性干扰。
6、洗涤缓冲液: 通常为含吐温-20的磷酸盐缓冲液。用于在各步骤之间洗去未结合的物质,减少背景干扰。洗涤是否彻底是实验成败的关键!
7、封闭液: 常用牛血清白蛋白或脱脂奶粉溶液。用于在包被后封闭微孔板上未结合的位点,防止后续步骤中的非特异性吸附,降低背景。
8、底物溶液:
对于HRP:常用四甲基联苯胺或3,3',5,5'-四甲基联苯胺。
对于AP:常用对硝基苯磷酸酯。
9、终止液:
对于HRP-TMB:常用稀硫酸溶液。
对于AP-pNPP:常用氢氧化钠溶液。用于终止酶促反应,稳定最终颜色。
10、板封膜: 在孵育步骤中覆盖微孔板,防止蒸发和污染。
11、说明书: 详细的操作步骤、试剂保存条件、注意事项、预期结果和标准曲线绘制方法等。
样本处理及要求:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
5. 其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测。
6. 样品外观:样品应清澈透明,悬浮物应离心去除。
7. 样品保存:样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(6个月内检测),避免反复冻融,标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
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上海心语生物科技有限公司成立于上海,公司主力提供的生化产品有:酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)、标准品、培养基、对照品、抗体、生化试剂、血清、细胞株、金标试剂盒、染色液等试剂产品。 公司所有产品用于实验室
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