可溶性酸性转化酶(Soluble acid invertase, S-AI)试剂盒说明书
微量法 100 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
蔗糖转化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代谢关键酶之 一。根据最适 pH,Ivr 分为酸性转化酶(AI)和中性转化酶(NI)两种类型。 AI 的最适 pH 为 3~5。AI 分为可溶性 AI(S-AI)和细胞壁不溶性 AI(B-AI)两种类型。S-AI 主要存在 于细胞液泡或自由空间中,最适 pH 为 4.5~5.0(酸性),通过降解液泡中蔗糖,调节液泡中蔗糖的利用 和果实内糖类的积累。
测定原理:
S-AI 催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在 510nm 有特征光吸收,在一定范围内 510nm 光吸收增加速率与 S-AI 活性成正比。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰 和蒸馏水。
粗酶液提取:
按照组织质量(g):提取液体积(ml)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1ml 提取液), 进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
温习提示:不可用于临床,详询客服。
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