A-375 Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱

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【培养观察】

定期观察A-375 Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱生长状态，注意培养基的pH值变化和细胞密度，及时换液和传代。

【细胞复苏】

复苏细胞时，应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻，然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成，以确保细胞的高存活率。

【细胞传代】

传代时，应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化，并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团，需要吹打吹散。传代后，应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。

【细胞冻存】

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存，并置于液氮中储存。

【A-375 Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱英文别名】

A 375; A375; A375-MEL; A375-mel; A375mel; 375

传代细胞培养是细胞生物学研究中的基础技术，其成功与否直接影响实验结果的可靠性。在操作过程中，细胞的消化时间和浓度控制尤为关键。消化时间过短会导致细胞难以从培养瓶壁脱落，影响后续传代效率；而消化时间过长则可能造成细胞膜损伤甚至死亡。研究表明，细胞的最佳消化时间通常控制在1-3分钟，具体需根据细胞状态和培养条件进行调整。消化浓度方面，当使用较高浓度（0.25%胰酶-EDTA）时，消化时间应缩短至1-2分钟；若使用较低浓度（0.05%），则需延长至3-5分钟。建议在显微镜下密切观察细胞形态变化，当细胞间隙增大、边缘回缩时立即终止消化。

当T25瓶复苏细胞收到货时，请观察好细胞状态后，将T25细胞瓶壁进行75%酒精消毒，将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状态，当细胞密度达80%-90%，即可进行首次传代培养；干冰运输的细胞冻存管收到货后，需立即转入液氮保存或直接进行复苏(第三天换液并检查复苏细胞密度，以便进行下一步)。 能够在实验室条件下进行大量培养和繁殖。这种细胞系在分子生物学和生物技术研究中十分常用。

【背景信息】

A-375 Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱A３７５源自一位５４岁女性，是Giard DJ等人建立的一系列细胞株中的一株。该细胞可在免疫抑制小鼠上成瘤，在琼脂上形成克隆。

【传代比例】

1:2-1:4(A-375 Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)

【来源说明】

A-375 Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库

【生长特性】

A-375 Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长

【形态特性】

A-375 Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样

【换液周期】

A-375 Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次

【产品包装】

复苏发货：A-375 Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货：1ml冻存管(两支)

细胞消化注意事项（二）：细胞状态:在消化前，应确保细胞处于适宜的状态，如生长密度、形态和活力等。后续操作:消化后的细胞应立即进行后续操作，如传代、分离或计数等，以避免细胞在体外过长时间暴露而导致损伤或死亡。细胞消化是细胞培养中的一个关键步骤，需要严格遵循操作规程和注意事项，以确保细胞的良好分离和后续实验的顺利进行。

细胞根据其形态和功能可以分为多种类型，其中上皮细胞、成纤维细胞和淋巴母细胞是常见的三种类型。成纤维细胞，或称纤维母细胞，是一种存在于蜂窝组织或纤维结缔组织中的梭形细胞，能够分泌构成细胞外基质(ECM)的结构蛋白。这类细胞最初由德国病理学家鲁道夫·菲尔绍与法国解剖学家马蒂亚斯·杜瓦尔于19世纪中叶描述。成纤维细胞特异性标志物包括FAP(成纤维细胞激活蛋白)、α-SMA(α-平滑肌肌动蛋白)、骨膜蛋白、PDGFRα(血小板衍生生长因子受体α)、胶原蛋白、波形蛋白、纤连蛋白和胸腺细胞抗原1等。成纤维细胞在形态上是扁平的纺锤形细胞，缺乏基底膜，细胞核呈圆形拉长，被巨大的内质网包围。在培养中，它们表现出不同的形态学和生化特征，这取决于其起源位置、分化状态和培养条件。

【物种来源】

A-375 Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源

【培养条件】

37°C、5%CO₂、饱和湿度环境，使用含10%-20%FBS的基础培养基。

【消化传代】

使用0.25%胰酶-EDTA溶液，37°C孵育1-2分钟，轻拍培养瓶促进细胞脱落。（悬浮细胞可省略这步操作）

【污染防控】

严格无菌操作，定期检测支原体污染，必要时使用双抗预防细菌污染。

【细胞状态】

传代和消化过程中，应密切关注细胞状态，避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。

【污染检测】

支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。

【细胞接收流程】

收到细胞后，应首先观察细胞状态，然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定A-375 Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时，即可进行首次传代培养。

【操作规范】

在细胞培养和处理过程中，需严格遵守无菌操作规范，以避免细胞污染和交叉污染。

【消化条件】

室温下用胰酶消化1-3分钟。

【生物安全等级】

1级。

【空泡现象】

在密集培养时，细胞中可见巨大的空泡，这是细胞的正常特性，无需担心。

【血清比例】

使用10%-20%的血清浓度有助于优化A-375 Cells人恶性黑色素瘤细胞低代次保种|STR图谱实验条件，提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证，被认为是较为适宜的选择。

传代消化是细胞培养的关键步骤，但许多新手因担心胰酶损伤细胞而过早终止消化。实际上，适度延长消化时间（如等待细胞完全变圆）反而能减少机械吹打对细胞的伤害。过早终止消化会导致细胞未完全脱离，用力吹打产生的气泡和剪切力对细胞的损伤远大于胰酶本身。常规操作中，建议在显微镜下监控消化过程，待80%-90%细胞变圆后轻柔晃动培养瓶，使细胞自然脱落。此外，吹打时应避免产生气泡，因为气泡破裂时的机械应力会直接损伤细胞膜。

细胞冻存密度为1×10^6 cells/mL，复苏后活率可达85%以上，而密度降至5×10^5 cells/mL时活率可能下降20%-30%。维持1×10^6 cells/mL以上的冻存密度是保障细胞复苏率的基石，但需结合细胞类型、冻存工艺和终端用途进行系统优化。这一标准的建立不仅提升了基础研究可靠性，更为再生医学和精准医疗提供了关键技术支撑。随着新型冻存技术的发展，密度与存活率的关联机制将进一步被揭示，推动细胞保存技术迈向更高水平。

SJ-RH30 Cells;背景说明：肺泡横纹肌肉瘤；骨髓转移;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：SCC-7细胞、ZR75-1细胞、HFB细胞

SUDHL4 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：淋巴母细胞;相关产品有：3T3-Swiss albino细胞、MPC-11细胞、GM0637细胞

TMD-8 Cells;背景说明：弥漫大B淋巴瘤；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：293-FT细胞、SKNBE-2细胞、CEM-0细胞

EB2 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：４ X １０５ cells/mL and maintain at between ４ X １０５ and １ X １０６ cells/mL.，每２-３天换液;生长特性：悬浮生长 ;形态特性：淋巴母细胞样;相关产品有：CX1细胞、786O细胞、NCIH524细胞

HEK (AD293) Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：WI 38细胞、HT 1197细胞、BAEC细胞

GM22138 Cells(提供STR鉴定图谱)

HAP1 MED13L (-) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)

Wien 133 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NCI-H1404细胞、KLM-1细胞、MNNG细胞

T 98 G Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：按１：３传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：FHs74Int细胞、MLA144细胞、MPC-83细胞

NK92-MI Cells;背景说明：NK细胞；淋巴瘤；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MPP 89细胞、CHP 126细胞、BRL3A细胞

NCI-H1694 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：３-４天换液１次。;生长特性：悬浮生长;形态特性：聚团悬浮;相关产品有：H1048细胞、OKAC1细胞、NCI-H441细胞

VMCUB1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：H-508细胞、CEMC1细胞、PANC0403细胞

OV-CA 432 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：KLM-1细胞、CV-1 in Origin Simian-1细胞、OP-9细胞

WM451Lu Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：HS 1.Tes细胞、U-138 MG细胞、NK10a细胞

MDA-157 Cells;背景说明：该细胞源自一位患有乳腺髓样癌的４４岁黑人女性，表达WNT７B癌基因，细胞与细胞边界处有细胞桥粒、微绒毛、张力细丝。;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：SJ-RH30细胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞、NCIH820细胞

HPSI0816i-daah_6 Cells(提供STR鉴定图谱)

KB8025 Cells(提供STR鉴定图谱)

MeWo VIN 0.5 Cells(提供STR鉴定图谱)

NIH 3T3 Atg5 KO Cells(提供STR鉴定图谱)

Ramos/B95-8 Cells(提供STR鉴定图谱)

Ubigene HEK293 GNA12 KO Cells(提供STR鉴定图谱)

WG1391 Cells(提供STR鉴定图谱)

HG01668 Cells(提供STR鉴定图谱)

N1E-115 Cells;背景说明：神经母细胞瘤；雄性；A/J;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：87MG细胞、MDA-MB-175-VII细胞、AML193细胞

H1672 Cells;背景说明：小细胞肺癌；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MIHA细胞、H-1437细胞、HS-695T细胞

D 407 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长　;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：HCT 15细胞、293 HEK细胞、ECC12细胞

HIEC6 Cells;背景说明：肠；上皮 Cells;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：JeKo-1细胞、Ramos-RA1细胞、LNCaP FGC细胞

NCI-H647 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：３-１：６传代；每周换液２次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：HCCLM6细胞、SPC-A-1细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞

NCI-H647 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：３-１：６传代；每周换液２次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：HCCLM6细胞、SPC-A-1细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞

WEHI 164 TC Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Hs683T细胞、OVCA 432细胞、MARC 145细胞

MPC5 Cells;背景说明：肾足细胞；SV４０转化;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：COLO-HSR细胞、CCRF.CEM细胞、H-2052细胞

VE Cells;背景说明：血管；内皮 Cells;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：GC-2spd(ts)细胞、LM3细胞、EA.Hy926细胞

H-196 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：４-１：６传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：HCC941122细胞、NCIH510细胞、X63Ag8-653细胞

NCI-H735 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：OVCA433细胞、MES-SA Dx5细胞、OsACL细胞

NCI-H838 Cells;背景说明：该细胞于１９８４年建系，源于一位５９岁患有非小细胞肺癌的白人男性吸烟者，从患者淋巴结转移灶分离而来。;传代方法：１：３-１：６传代；２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：hTERT-RPE-1细胞、R1610细胞、Okayama University Medical School-23细胞

H1650 Cells;背景说明：该细胞是从一名２７岁白人男性（１０年烟龄）支气管肺泡癌患者的胸腔积液中分离得到的。;传代方法：１：４-１：６传代；２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：H2171细胞、PLB-985细胞、HCCLM6细胞

EnCa1 Cells;背景说明：内膜腺癌；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：K7M2-WT细胞、CHL-11细胞、NCI-H2023细胞

C8166 Cells人T淋巴细胞白血病细胞|有STR图谱

LN-229-Luc Cells人胶质瘤细胞|有STR图谱

B82 Cells小鼠肿瘤细胞|有STR图谱

HCC1806 Cells人乳腺癌细胞|有STR图谱

Hs 888.Lu Cells人肺成纤维细胞|有STR图谱

NCI-H2286 Cells人小细胞肺癌细胞|有STR图谱

WM115 Cells人恶性黑色素瘤细胞|有STR图谱

SW1783 Cells人脑星形胶质细胞瘤细胞|有STR图谱

MDBK Cells牛肾细胞|有STR图谱

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Sc-1 Cells人B细胞淋巴瘤细胞|有STR图谱

MeT-5A Cells人间皮细胞|有STR图谱

K7M2-WT Cells小鼠骨肉瘤成骨细胞|有STR图谱

U-87MG-GFP Cells人恶性胶质瘤细胞|有STR图谱

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Vero C1008 Cells非洲绿猴肾细胞|有STR图谱

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LoVo-Luc Cells人结直肠癌细胞|有STR图谱

SACC-LM Cells人涎腺腺样囊性癌细胞|有STR图谱

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