"HeLa Cells人宫颈癌细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察HeLa Cells人宫颈癌细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【HeLa Cells人宫颈癌细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
HELA; Hela; He La; He-La; HeLa-CCL2; Henrietta Lacks cells; Helacyton gartleri
【细胞培养经验分享】启蒙老师的重要性:一般进实验室都有师兄师姐带着做,他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则,如营养液、细胞瓶的摆放位置、灭菌处理程序、开盖手法、细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作,在第一次的时候就要重视。像养孩子一样养细胞,细胞有时真的很脆弱,最好每天都去看看它,以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象,也好及时解决这些意外,避免重复实验带来的更大痛苦。好细胞要及时保种:细胞要分批传代,这样即使有一批出了问题,还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。
细胞培养瓶破裂或渗漏是实验室最紧急的情况之一。当发现容器破损时,应立即执行三级处理流程:首先将破损培养瓶放入生物安全柜,用消毒剂浸泡的纱布覆盖裂口;随后将培养物转移至备用培养瓶,转移过程需严格保证无菌操作;最后对工作台面进行彻底消毒。值得注意的是,聚乙烯材质的培养瓶在反复冻融后更易产生微裂纹,建议使用前进行透光检查。对于珍贵细胞系,可预先分装冻存备份,并建立定期镜检制度,每周至少两次检查培养容器完整性。
【背景信息】
HeLa Cells人宫颈癌细胞低代次保种|STR图谱HeLa是第一个来自人体组织经连续培养获得的非整倍体上皮样细胞系,它由GeyGO等在1951年从31岁女性黑人的宫颈癌组织建立。经原始组织切片重新观察,Jones等将其诊断为腺癌。已知该细胞系含有人乳头状瘤病毒HPV18序列,需在2级生物安全防护台操作。该细胞角蛋白阳性,p53表达量较低,但表达正常水平的pRB(视网膜母细胞瘤抑制因子)。
【传代比例】
1:2-1:4(HeLa Cells人宫颈癌细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
HeLa Cells人宫颈癌细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
HeLa Cells人宫颈癌细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
HeLa Cells人宫颈癌细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
HeLa Cells人宫颈癌细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:HeLa Cells人宫颈癌细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
无菌操作是预防污染的核心。以下是一些关键的无菌操作要点:实验前用75%酒精擦拭超净工作台台面,并开启紫外灯照射20-30分钟。操作时关闭紫外灯,开启风机,避免气流干扰。实验人员需穿戴无菌实验服、口罩和手套,并避免在操作过程中说话或咳嗽,以减少飞沫污染。所有打开的试剂瓶和培养瓶应倾斜放置,避免垂直开口暴露于空气中。使用后的移液枪头等废弃物应及时清理,避免交叉污染。
上皮细胞(epithelial cell)是构成上皮组织的基本单位,广泛分布在人体的各个表面和体腔内,外胚层来源:皮肤、腺垂体、内耳膜、角膜、晶状体、鼻腔、口腔、肛门等处的上皮细胞由外胚层发育而来。中胚层来源:间皮、内皮等上皮细胞由中胚层发育而来。内胚层来源:中耳、呼吸道、肺、胸腺、消化道、消化腺、膀胱、阴道、甲状腺、甲状旁腺等处的上皮细胞由内胚层发育而来。许多癌症起源于上皮细胞,如肝细胞癌、结直肠癌、乳腺癌、肺癌、胃癌、前列腺癌、卵巢癌和子宫内膜癌。这些癌症中的上皮细胞通常表现出细胞标志物的变化,如E-cadherin的缺失和N-cadherin、vimentin等间充质细胞标志物的表达上调。
【物种来源】
HeLa Cells人宫颈癌细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定HeLa Cells人宫颈癌细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化HeLa Cells人宫颈癌细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代准备工作:预热培养基和PBS:在开始传代前,将完全培养基和磷酸盐缓冲液(PBS),预热至37℃,以确保细胞在操作过程中不会受到温度冲击。准备无菌器材:包括无菌吸管、移液枪、离心管、培养皿、胰蛋白酶(或EDTA)溶液、完全培养基等。检查细胞状态:在显微镜下观察细胞的生长密度和形态,确保细胞处于对数生长期且状态良好。
细胞冻存密度为1×10^6 cells/mL,复苏后活率可达85%以上,而密度降至5×10^5 cells/mL时活率可能下降20%-30%。维持1×10^6 cells/mL以上的冻存密度是保障细胞复苏率的基石,但需结合细胞类型、冻存工艺和终端用途进行系统优化。这一标准的建立不仅提升了基础研究可靠性,更为再生医学和精准医疗提供了关键技术支撑。随着新型冻存技术的发展,密度与存活率的关联机制将进一步被揭示,推动细胞保存技术迈向更高水平。
Normal fibroblast-10 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:58F细胞、PNT1A细胞、JVM-2细胞
HDLM2 Cells;背景说明:霍奇金淋巴瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HT-115细胞、HIC细胞、Duke University 4475细胞
RPMI6666 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:CCRF/CEM-C7细胞、MPP89细胞、DH 82细胞
RPMI6666 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:CCRF/CEM-C7细胞、MPP89细胞、DH 82细胞
H-1876 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:DHL-6细胞、SNU-182细胞、AML-193细胞
GM09668 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 B4GALNT4 (-) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)
MPP-89 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Adeno-293细胞、COLO 738细胞、IBRS2细胞
Karpas-299 Cells;背景说明:间变性大细胞淋巴瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HCM细胞、SHIN-3细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞
SK N SH Cells;背景说明:SK-N-SH细胞系由J.L.Bieder建系,它与SK-N-MC所不同的是倍增时间较长且多巴胺-β-羟基酶水平较高。 SK-N-SH在细胞介导的细胞毒性试验中用作靶细胞系。;传代方法:1:2传代;生长特性:悬浮生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞
Hela-Ap-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:LC-2/ad细胞、HSKMC细胞、MKN1细胞
IPLB-Sf21AE Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI-H378细胞、NCI-SNU-520细胞、hFOB细胞
Dakiki Cells;背景说明:B淋巴细胞;EBV转染;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:LS411N细胞、DU 145细胞、U031细胞
T98 G Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:按1:3传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Colon38细胞、MMQ细胞、32D.cl3细胞
SK-RC-20 Cells;背景说明:肾癌;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:CT 26细胞、L 1210细胞、TE 32.T细胞
HG03109 Cells(提供STR鉴定图谱)
iBMK W2.Raf-16 Cells(提供STR鉴定图谱)
LLD 138 Cells(提供STR鉴定图谱)
NCI-H1299-Luc Cells(提供STR鉴定图谱)
PathHunter CHO-K1 mC5AR1 beta-arrestin Cells(提供STR鉴定图谱)
Ubigene HCT 116 ADORA1 KO Cells(提供STR鉴定图谱)
vFOP4-1 Cells(提供STR鉴定图谱)
HCT 116 SFN(-/-) Cells(提供STR鉴定图谱)
Malme-3M Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:4传代,2天换液1次。;生长特性:混合生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:NCI-H920细胞、HEK-EBNA细胞、Hs 343.T细胞
HCS-2/8 Cells;背景说明:软骨肉瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:293 c18细胞、PVEC细胞、GM03570细胞
JB6Cl30 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:MLO-Y4细胞、H661细胞、DHL4细胞
H-1792 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:8传代。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:Detroit 562细胞、NTERA-2 clone D1细胞、HuPT3细胞
OKT3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:TNC-1B12B4细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞、343 MG细胞
OKT3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:TNC-1B12B4细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞、343 MG细胞
AD-293 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:C4-2 Bone metastatic细胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞、Hs 888Lu细胞
Human Embryo Lung-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:H-1437细胞、SKNBE(1)细胞、TKB-1细胞
H-522 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:6传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:HEK-293-F细胞、HTR8/SVneo细胞、H-1703细胞
KAT5 Cells;背景说明:甲状腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HTori-3.1细胞、MHH-CALL2细胞、H-1404细胞
OKT3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:TNC-1B12B4细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞、343 MG细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4 Cells;背景说明:急性髓系白血病;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Hs 294T细胞、U-118MG细胞、HNE-1细胞
MKN 45 Cells;背景说明:该细胞系由S Akiyama建立,源于一位35岁患有印戒细胞癌的女性的胃淋巴结。;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁+悬浮;形态特性:淋巴母细胞;相关产品有:hRPTC细胞、SK-MEL-2-LUC细胞、T2细胞
SW839 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:RC-2细胞、Kit 225 K6细胞、SNU182细胞
SW1088 Cells人脑星形胶质瘤细胞|有STR图谱
SJCRH30 Cells人骨髓横纹肌肉癌细胞|有STR图谱
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关键字: HeLa Cells人宫颈癌细胞低代次保;复苏细胞系;细胞STR鉴定报告;细胞STR鉴定图谱;ATCC|DSMZ细胞库;
公司提供ATCC、DSMZ、ECACC、NCI-DTP、RCB(Riken)等细胞系