"IMR-32 Cells人神经母细胞瘤细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察IMR-32 Cells人神经母细胞瘤细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【IMR-32 Cells人神经母细胞瘤细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
IMR 32; IMR32; Institute for Medical Research-32; GM03320; GM3320C; GM03320D; AG03320; AG3320
【细胞培养经验分享】启蒙老师的重要性:一般进实验室都有师兄师姐带着做,他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则,如营养液、细胞瓶的摆放位置、灭菌处理程序、开盖手法、细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作,在第一次的时候就要重视。像养孩子一样养细胞,细胞有时真的很脆弱,最好每天都去看看它,以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象,也好及时解决这些意外,避免重复实验带来的更大痛苦。好细胞要及时保种:细胞要分批传代,这样即使有一批出了问题,还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。
细胞代谢随温度降低而逐渐减慢。当温度降至冰点以下时,细胞内的游离水会形成冰晶,导致细胞膜和细胞器结构的机械损伤,最终引发细胞死亡。然而,通过添加冷冻保护剂(如二甲亚砜或甘油),可以显著提高细胞在深低温环境下的存活率。这些保护剂能够降低冰晶的形成概率,并减少低温对细胞结构的破坏。
【背景信息】
IMR-32 Cells人神经母细胞瘤细胞低代次保种|STR图谱是一种人类神经母细胞瘤细胞系,来源于一名患有神经母细胞瘤的儿童患者的骨髓标本。神经母细胞瘤是一种起源于交感神经系统的恶性肿瘤,主要发生在儿童中。是由W·W·Nichols、J·Lee和S·Dwight于1967年4月从一位13个月大的男婴下腹部肿瘤中分离建系。诊断认为是神经母细胞瘤,并有少部分区域的器质性分化。
【传代比例】
1:2-1:4(IMR-32 Cells人神经母细胞瘤细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
IMR-32 Cells人神经母细胞瘤细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
IMR-32 Cells人神经母细胞瘤细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
IMR-32 Cells人神经母细胞瘤细胞低代次保种|STR图谱成纤维细胞样
【换液周期】
IMR-32 Cells人神经母细胞瘤细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:IMR-32 Cells人神经母细胞瘤细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
无菌操作是预防污染的核心。以下是一些关键的无菌操作要点:实验前用75%酒精擦拭超净工作台台面,并开启紫外灯照射20-30分钟。操作时关闭紫外灯,开启风机,避免气流干扰。实验人员需穿戴无菌实验服、口罩和手套,并避免在操作过程中说话或咳嗽,以减少飞沫污染。所有打开的试剂瓶和培养瓶应倾斜放置,避免垂直开口暴露于空气中。使用后的移液枪头等废弃物应及时清理,避免交叉污染。
细胞系在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来,即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的,不要再去延长消化时间,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞:润洗方法5min还不能消化,以结肠癌细胞为例,比如:HCT15、LS411和KM12细胞,胰酶消化,一般10 cm培养皿,一次加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。
【物种来源】
IMR-32 Cells人神经母细胞瘤细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定IMR-32 Cells人神经母细胞瘤细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化IMR-32 Cells人神经母细胞瘤细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
CO₂细胞培养箱作为细胞培养的核心设备,通过精确控制温度(通常37℃)、湿度(95%左右)和CO₂浓度(5%),模拟体内生理环境。现代培养箱采用HEPA过滤系统实现空气净化,部分型号配备紫外灯或铜质内胆增强抑菌能力。值得注意的是,有些新型智能CO₂培养箱已实现远程监控,通过传感器实时反馈箱内O₂含量和pH值变化,大幅降低污染风险。使用时需定期校准气体浓度传感器,并避免频繁开门导致环境波动。
细胞冻存过程中,密度过低会导致细胞在复苏时因缺乏足够的细胞间接触和旁分泌信号而存活率下降。当冻存密度低于1×10^6 cells/mL时,细胞在解冻后可能面临以下问题:营养竞争不足:低密度下细胞分泌的促存活因子(如生长因子)浓度不足,无法有效支持细胞贴壁和增殖;物理损伤加剧:冻存时形成的冰晶会破坏细胞膜结构,而高密度细胞群可通过相互缓冲减轻机械损伤;氧化应激增加:单个细胞暴露在冻存液中的表面积更大,更容易受到自由基攻击。
SKG-IIIa Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:2x10^4 cells/ml;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:IOSE80细胞、BC-019细胞、H-2196细胞
NEC-8 Cells;背景说明:睾丸胚胎性癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:TE-10细胞、Panc2_03细胞、KTA7细胞
C2BBe 1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:6—1:10传代,每周换液2次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:KYSE-510细胞、Hepa-RG细胞、130T细胞
Ca9-22 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:C643细胞、MV-4-11细胞、NCIH128细胞
Eph4 1424 Cells;背景说明:乳腺癌;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HDMEC细胞、RBMVEC细胞、LC-2-Ad细胞
GM13557 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 FOXA2 (-) Cells(提供STR鉴定图谱)
rRMECs Cells;背景说明:视网膜微血管;内皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NEC-8细胞、751-NA细胞、U 937细胞
OVCAR-8 Cells;背景说明:卵巢癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:578T细胞、Epstein-Barr-1细胞、BJA-B1细胞
KM-H2 Cells;背景说明:霍奇金淋巴瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HMC-1细胞、CaSki细胞、KP-2细胞
OCI-Ly19 Cells;背景说明:弥漫大B淋巴瘤;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:T84细胞、K-1735细胞、TNC-1B12B4细胞
SUM-149 Cells;背景说明:乳腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:RAMOS2G64C10细胞、HMEC-1细胞、KYSE-150细胞
FU-MMT-1 Cells;背景说明:子宫肉瘤;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:KG-1a细胞、H-522细胞、SK-Mel 2细胞
NCI-H146 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2—1:6传代,每周换液2-3次;生长特性:悬浮生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:B16-F10细胞、HCC1143细胞、DLD-1细胞
ECC 12 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:GC-2细胞、J774细胞、3T3 J2细胞
HMC3 Cells(提供STR鉴定图谱)
Ishikawa 2-C-7 Cells(提供STR鉴定图谱)
MCF-7/HER2-18 Cells(提供STR鉴定图谱)
ND13309 Cells(提供STR鉴定图谱)
PPMI.I.1017.1 Cells(提供STR鉴定图谱)
Ubigene A-549 TICAM1 KO Cells(提供STR鉴定图谱)
V79-B310H Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 USP31 (-) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)
RAW-264.7 Cells;背景说明:单核巨噬细胞白血病;雄性;BALB/c;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HCC1937细胞、G361细胞、NCIH2029细胞
MonoMac1 Cells;背景说明:急性单核细胞白血病;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HSC-3细胞、95C细胞、C38细胞
H-2405 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:5-1:8传代;生长特性:混合生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Lu-99A细胞、WiDr细胞、WM115F细胞
H-2023 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2次;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Kelly细胞、NCI-H102细胞、Reh细胞
P3JHR-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每2-3天换液;生长特性:悬浮生长 ;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:SV40-MES13细胞、NCI-H920细胞、SKNBE细胞
P3JHR-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每2-3天换液;生长特性:悬浮生长 ;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:SV40-MES13细胞、NCI-H920细胞、SKNBE细胞
HEC251 Cells;背景说明:子宫内膜癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:CL1-0细胞、IHH4细胞、MDA453细胞
Granta-519 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:RMS13细胞、RPMI 8226/S细胞、SUM 102PT细胞
Metastatic Variant-522 Cells;背景说明:肺腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI-H2291细胞、GH 3细胞、Granta 519细胞
KE 37 Cells;背景说明:急性T淋巴细胞白血病;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SU-DHL-4细胞、NCI-H747细胞、KP-N-RT细胞
P3X63 Ag8.653 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、HHL-5细胞、MDA231-LM2-4175细胞
P3-X63Ag8.653 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:PL-11细胞、RMS1598细胞、MUTZ-1细胞
HO-8910 PM Cells;背景说明:高转移卵巢癌 Cells;传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:CL-40细胞、H-2227细胞、NCI-H345细胞
NCI-SNU-878 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:VERO C 1008细胞、CCRF-CEM C7细胞、COR L279细胞
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关键字: IMR-32 Cells人神经母细胞瘤细;复苏细胞系;细胞STR鉴定报告;细胞STR鉴定图谱;ATCC|DSMZ细胞库;
公司提供ATCC、DSMZ、ECACC、NCI-DTP、RCB(Riken)等细胞系