NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱

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【培养观察】

定期观察NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱生长状态，注意培养基的pH值变化和细胞密度，及时换液和传代。

【细胞复苏】

复苏细胞时，应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻，然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成，以确保细胞的高存活率。

【细胞传代】

传代时，应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化，并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团，需要吹打吹散。传代后，应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。

【细胞冻存】

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存，并置于液氮中储存。

【NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱英文别名】

H1299; H-1299; NCIH1299

【细胞培养经验分享】启蒙老师的重要性：一般进实验室都有师兄师姐带着做，他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则，如营养液、细胞瓶的摆放位置、灭菌处理程序、开盖手法、细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作，在第一次的时候就要重视。像养孩子一样养细胞，细胞有时真的很脆弱，最好每天都去看看它，以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象，也好及时解决这些意外，避免重复实验带来的更大痛苦。好细胞要及时保种：细胞要分批传代，这样即使有一批出了问题，还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。

血清作为细胞培养基的重要成分，为细胞生长提供了必需的营养物质和生长因子。当细胞增殖速率异常时，可考虑逐步提高血清浓度至15-20%。这一范围的血清浓度能够为细胞提供更丰富的营养支持，促进其增殖。然而，这一过程必须谨慎进行。建议将血清浓度的提升分为2-3个阶段，每个阶段维持3-5天，让细胞有足够的时间适应新的环境。例如，可以从常规的10%血清浓度开始，先提升至12-15%，观察细胞状态后再决定是否继续提高至15-20%。

【背景信息】

NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱这株细胞来源于一个淋巴结转移。患者接受了初期放疗。细胞均一性的部分缺失p５３蛋白，并缺少p５３蛋白表达。细胞可以合成０.１pmol/毫克蛋白的NMB蛋白，而不合成促胃释放肽(GRP)。

【传代比例】

1:2-1:4(NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)

【来源说明】

NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库

【生长特性】

NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长

【形态特性】

NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样

【换液周期】

NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次

【产品包装】

复苏发货：NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货：1ml冻存管(两支)

在生命科学研究的微观世界里，细胞培养技术犹如搭建了一座精密运转的舞台，而细胞消化过程则是这台大戏中至关重要的场景转换环节。当科研人员需要为细胞进行传代培养、开展单细胞分离或执行精确计数时，胰蛋白酶便化身成为舞台幕后的魔法师，用其精妙的生物化学机制完成这场细胞集体的""温柔离散""。

细胞系在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，你可以尝试，准备100%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来，即使是成片的(比如Calu-3细胞)，吹打不超过20次(一般10次即可)，成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的，不要再去延长消化时间，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞：润洗方法5min还不能消化，以结肠癌细胞为例，比如：HCT15、LS411和KM12细胞，胰酶消化，一般10 cm培养皿，一次加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞，一般不超过5min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。

【物种来源】

NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源

【培养条件】

37°C、5%CO₂、饱和湿度环境，使用含10%-20%FBS的基础培养基。

【消化传代】

使用0.25%胰酶-EDTA溶液，37°C孵育1-2分钟，轻拍培养瓶促进细胞脱落。（悬浮细胞可省略这步操作）

【污染防控】

严格无菌操作，定期检测支原体污染，必要时使用双抗预防细菌污染。

【细胞状态】

传代和消化过程中，应密切关注细胞状态，避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。

【污染检测】

支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。

【细胞接收流程】

收到细胞后，应首先观察细胞状态，然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时，即可进行首次传代培养。

【操作规范】

在细胞培养和处理过程中，需严格遵守无菌操作规范，以避免细胞污染和交叉污染。

【消化条件】

室温下用胰酶消化1-3分钟。

【生物安全等级】

1级。

【空泡现象】

在密集培养时，细胞中可见巨大的空泡，这是细胞的正常特性，无需担心。

【血清比例】

使用10%-20%的血清浓度有助于优化NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞低代次保种|STR图谱实验条件，提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证，被认为是较为适宜的选择。

细胞传代如同为生命搭建一座崭新的舞台，是细胞培养艺术中的关键一笔。这项精妙的操作犹如园丁移栽幼苗，将蓬勃生长的细胞从拥挤的旧培养瓶温柔地迁入宽敞的新居，让这些微小的生命之花得以继续绽放。在显微镜下，细胞们如同训练有素的舞者，遵循着精密的生命韵律，在新的培养环境中舒展身姿，延续着它们与生俱来的生命密码。这不仅是一次简单的空间转移，更是一场精心编排的生命接力，确保每一代细胞都能完美传承其独特的生物学禀赋。

瓶装500ml血清的解冻需要采用逐步升温的""阶梯式解冻法""，这是保证血清质量的关键步骤。具体操作流程如下：首先将血清从–20℃或–70℃转移至4℃冰箱，缓慢溶解24小时。这一低温过渡阶段可以让血清中的各种成分逐渐适应温度变化，避免突然的温度波动导致蛋白质变性。待血清完全溶解后，再将其移至室温环境使其完全解冻。在解冻过程中，需要每隔2-3小时轻轻摇晃瓶身，使血清各部分的温度和成分均匀分布，这一操作能显著减少沉淀物的形成。但需特别注意摇晃力度，避免产生气泡，因为气泡可能导致血清中的蛋白质变性。

Hs 606 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２—１：３传代，２—３天换液一次;生长特性：贴壁生长;形态特性：成纤维细胞;相关产品有：L132细胞、NCI-H2081细胞、NTERA-2 clone D1细胞

CCRF SB Cells;背景说明：急性T淋巴细胞白血病；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：H-1355细胞、KTCTL-140细胞、A101D细胞

SCC4 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：COLO 201细胞、SMA 560细胞、Pt K2细胞

Natural Killer-92 Cells;背景说明：NK细胞；淋巴瘤；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：BrCL15细胞、BEL7405细胞、H-865细胞

H1836 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：每周换液２-３次。;生长特性：悬浮生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：H-1581细胞、MUGCHOR1细胞、GM00215A细胞

GM50082 Cells(提供STR鉴定图谱)

HAP1 PHKG1 (-) 3 Cells(提供STR鉴定图谱)

NSH Cells;背景说明：SK-N-SH细胞系由J.L.Bieder建系，它与SK-N-MC所不同的是倍增时间较长且多巴胺-β-羟基酶水平较高。 SK-N-SH在细胞介导的细胞毒性试验中用作靶细胞系。;传代方法：１：２传代;生长特性：悬浮生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：THC-8307细胞、LA-N-6细胞、HEK 293 EBNA细胞

H-2023 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：每周换液２次;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Kelly细胞、NCI-H102细胞、Reh细胞

SK-MEL-28 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：３-１：８传代，２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：星形的;相关产品有：HSF细胞、AQ-Mel细胞、4-1st细胞

A375mel Cells;背景说明：A３７５源自一位５４岁女性，是Giard DJ等人建立的一系列细胞株中的一株。该细胞可在免疫抑制小鼠上成瘤，在琼脂上形成克隆。;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：SKLMS-1细胞、SGC-7901细胞、JHH2细胞

SKG-3a Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：２x１０^４ cells/ml;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：TALL1细胞、NIT-1细胞、Hs 604.T细胞

293/EBNA Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：４-１：１０传代；每周２次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：LS-180细胞、Line 870 Emory University-4细胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞

OCM1 Cells;背景说明：葡萄膜黑色素瘤；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：CTV-1细胞、hTERTHME1细胞、CL-11细胞

H1435 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：３-１：６传代，每周换液２-３次;生长特性：贴壁生长，松散;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Panc5.04细胞、NCIH1395细胞、190PT细胞

HSCR-iPSC 3 Cells(提供STR鉴定图谱)

KOLF2.1J VCP 11.4KBDEL DEL/WT Cells(提供STR鉴定图谱)

Moo3 Cells(提供STR鉴定图谱)

NYSCF-10005-401-401-Skin-mR-iPSC Cells(提供STR鉴定图谱)

RG-417 Cells(提供STR鉴定图谱)

Ubigene Vero E6 ZDHHC20 KO Cells(提供STR鉴定图谱)

Zfp57-/- clone 634 Cells(提供STR鉴定图谱)

HG01841 Cells(提供STR鉴定图谱)

Ca759 Cells;背景说明：乳腺癌；雌性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：130T细胞、C3H10T1/2CL8细胞、OAC-P4C细胞

DC 2.4 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长　;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：526细胞、HFLS-OA细胞、NBL-S细胞

WM266-4 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MeT 5A细胞、OUMS23细胞、SGC7901细胞

McG-1 Cells;背景说明：皮肤T淋巴瘤；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Y3.AG.1.2.3细胞、HPDEC细胞、ECV-304细胞

BJA-B1 Cells;背景说明：Burkitt's淋巴瘤;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Me Wo细胞、Granta 519细胞、TR146细胞

BJA-B1 Cells;背景说明：Burkitt's淋巴瘤;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Me Wo细胞、Granta 519细胞、TR146细胞

DI TNC-1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：成纤维母细胞样;相关产品有：MXI细胞、KP-4细胞、SW948细胞

SGC7901 Cells;背景说明：１９７９年建系；这株细胞源自一位５６岁女性胃腺癌患者的淋巴结转移灶。RPMI-１６４０培养１２天，细胞开始生长，首次传代１０天；３１个月中传代１８６代。免疫抑制的ICR小鼠、乳犬皮下移植成功，家兔、乳犬眼前房移植成功；淋巴结转移，从小鼠皮下侵袭至肌层。;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：Daoy细胞、Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDA-415细胞

NCI H157 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长　;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Hs-606-T细胞、HPAF/CD18细胞、KGN细胞

NCI-SNU-761 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：293细胞、KM12细胞、SNU-182细胞

BIC1 Cells;背景说明：食管腺癌；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞

BIU-87 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：HUT 28细胞、COLO320DM细胞、MDA-MB-468-RED细胞

Chang liver Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：COS-7细胞、IB-RS2细胞、L-6TG细胞

Panc02.03 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：H2198细胞、U118MG细胞、UWB1-289细胞

Hep-G2/2.2.15 Cells人肝癌细胞|有STR图谱

RKO-AS45-1 Cells人结肠癌转基因细胞|有STR图谱

OCI-AML-3 Cells人急性髓系白血病细胞|有STR图谱

SW1417 Cells人结肠直肠腺癌细胞|有STR图谱

LCC Cells人喉癌细胞|有STR图谱

E0771-LUC Cells小鼠乳腺癌细胞|有STR图谱

LLC-PK1 Cells猪肾细胞|有STR图谱

HMC3 Cells人小胶质细胞|有STR图谱

EO771 Cells小鼠髓样乳腺癌细胞|有STR图谱

HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma] Cells人弥漫大B淋巴瘤细胞|有STR图谱

SK-N-SH Cells人神经母细胞瘤细胞|有STR图谱

SYF Cells小鼠胚成纤维细胞|有STR图谱

NUGC-3 Cells人胃癌细胞|有STR图谱

NPC/HK-1 Cells人鼻咽癌细胞|有STR图谱

TE354.T Cells人皮肤基底细胞癌细胞|有STR图谱

M-1 [Mouse kidney] Cells小鼠肾集合管细胞|有STR图谱

SW480+luc Cells人结肠腺癌细胞|有STR图谱

NCI-H2110 Cells人非小细胞肺癌细胞|有STR图谱

PK-15 Cells猪肾细胞|有STR图谱

Capan-1 Cells人胰腺癌细胞|有STR图谱

ASMC Cells小鼠气道平滑肌细胞|有STR图谱

A2058 Cells人黑色素瘤细胞|有STR图谱

4T1-RFP Cells小鼠乳腺癌细胞|有STR图谱

Hs 578Bst Cells人正常乳腺细胞|有STR图谱

BFTC-905 Cells人膀胱癌细胞|有STR图谱

Jurkat clone A3 Cells人T淋巴细胞白血病细胞|有STR图谱

C8-D1A Cells小鼠小脑星形胶质细胞|有STR图谱

mlMCD-3 Cells小鼠肾髓质细胞|有STR图谱

NRK-52E Cells大鼠肾细胞|有STR图谱

8E5 Cells人外周血淋巴细胞|有STR图谱

XC Cells大鼠Wistar肉瘤细胞|有STR图谱

Hs 683 Cells人脑神经胶质瘤细胞|有STR图谱

HUVEC Cells人脐静脉内皮细胞|有STR图谱

L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞|有STR图谱

PLA-801D Cells人高转移肺癌细胞|有STR图谱

HepG2-GS Cells人肝癌细胞|有STR图谱

MM.1R Cells人多发性骨髓瘤细胞|有STR图谱

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