hCMEC/D3 Cells人脑微血管内皮细胞低代次保种|STR图谱

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【培养观察】

定期观察hCMEC/D3 Cells人脑微血管内皮细胞低代次保种|STR图谱生长状态，注意培养基的pH值变化和细胞密度，及时换液和传代。

【细胞复苏】

复苏细胞时，应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻，然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成，以确保细胞的高存活率。

【细胞传代】

传代时，应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化，并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团，需要吹打吹散。传代后，应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。

【细胞冻存】

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存，并置于液氮中储存。

【hCMEC/D3 Cells人脑微血管内皮细胞低代次保种|STR图谱英文别名】

HCMEC/D3; CMEC/D3; human Cortical Microvessels Endothelial Cells/D3

【细胞培养经验分享】启蒙老师的重要性：一般进实验室都有师兄师姐带着做，他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则，如营养液、细胞瓶的摆放位置、灭菌处理程序、开盖手法、细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作，在第一次的时候就要重视。像养孩子一样养细胞，细胞有时真的很脆弱，最好每天都去看看它，以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象，也好及时解决这些意外，避免重复实验带来的更大痛苦。好细胞要及时保种：细胞要分批传代，这样即使有一批出了问题，还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。

当T25瓶复苏细胞收到货时，请观察好细胞状态后，将T25细胞瓶壁进行75%酒精消毒，将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状态，当细胞密度达80%-90%，即可进行首次传代培养；干冰运输的细胞冻存管收到货后，需立即转入液氮保存或直接进行复苏(第三天换液并检查复苏细胞密度，以便进行下一步)。 能够在实验室条件下进行大量培养和繁殖。这种细胞系在分子生物学和生物技术研究中十分常用。

【背景信息】

hCMEC/D3 Cells人脑微血管内皮细胞低代次保种|STR图谱脑微血管；内皮细胞

【传代比例】

1:2-1:4(hCMEC/D3 Cells人脑微血管内皮细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)

【来源说明】

hCMEC/D3 Cells人脑微血管内皮细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库

【生长特性】

hCMEC/D3 Cells人脑微血管内皮细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长

【形态特性】

hCMEC/D3 Cells人脑微血管内皮细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样

【换液周期】

hCMEC/D3 Cells人脑微血管内皮细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次

【产品包装】

复苏发货：hCMEC/D3 Cells人脑微血管内皮细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货：1ml冻存管(两支)

细胞消化注意事项（二）：细胞状态:在消化前，应确保细胞处于适宜的状态，如生长密度、形态和活力等。后续操作:消化后的细胞应立即进行后续操作，如传代、分离或计数等，以避免细胞在体外过长时间暴露而导致损伤或死亡。细胞消化是细胞培养中的一个关键步骤，需要严格遵循操作规程和注意事项，以确保细胞的良好分离和后续实验的顺利进行。

细胞系在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，你可以尝试，准备100%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来，即使是成片的(比如Calu-3细胞)，吹打不超过20次(一般10次即可)，成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的，不要再去延长消化时间，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞：润洗方法5min还不能消化，以结肠癌细胞为例，比如：HCT15、LS411和KM12细胞，胰酶消化，一般10 cm培养皿，一次加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞，一般不超过5min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。

【物种来源】

hCMEC/D3 Cells人脑微血管内皮细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源

【培养条件】

37°C、5%CO₂、饱和湿度环境，使用含10%-20%FBS的基础培养基。

【消化传代】

使用0.25%胰酶-EDTA溶液，37°C孵育1-2分钟，轻拍培养瓶促进细胞脱落。（悬浮细胞可省略这步操作）

【污染防控】

严格无菌操作，定期检测支原体污染，必要时使用双抗预防细菌污染。

【细胞状态】

传代和消化过程中，应密切关注细胞状态，避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。

【污染检测】

支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。

【细胞接收流程】

收到细胞后，应首先观察细胞状态，然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定hCMEC/D3 Cells人脑微血管内皮细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时，即可进行首次传代培养。

【操作规范】

在细胞培养和处理过程中，需严格遵守无菌操作规范，以避免细胞污染和交叉污染。

【消化条件】

室温下用胰酶消化1-3分钟。

【生物安全等级】

1级。

【空泡现象】

在密集培养时，细胞中可见巨大的空泡，这是细胞的正常特性，无需担心。

【血清比例】

使用10%-20%的血清浓度有助于优化hCMEC/D3 Cells人脑微血管内皮细胞低代次保种|STR图谱实验条件，提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证，被认为是较为适宜的选择。

细胞传代如同为生命搭建一座崭新的舞台，是细胞培养艺术中的关键一笔。这项精妙的操作犹如园丁移栽幼苗，将蓬勃生长的细胞从拥挤的旧培养瓶温柔地迁入宽敞的新居，让这些微小的生命之花得以继续绽放。在显微镜下，细胞们如同训练有素的舞者，遵循着精密的生命韵律，在新的培养环境中舒展身姿，延续着它们与生俱来的生命密码。这不仅是一次简单的空间转移，更是一场精心编排的生命接力，确保每一代细胞都能完美传承其独特的生物学禀赋。

胰蛋白酶的发现使屈内成为首次发现“一种能够降解蛋白质的酶(即胰蛋白酶)”的科学家，并首次提出了酶(Enzyme)的概念。在那个时期，科学家们开始研究酶在生物体中的作用，并尝试将其应用于实验室研究中。随着研究的深入，科学家们逐渐认识到胰酶在细胞传代中的潜在应用。经过大量的实验和研究，探索胰酶的最佳使用条件、浓度和作用时间等参数，以确保其在细胞传代中的有效性和安全性。经过不断的努力和改进，胰酶在细胞传代中的应用逐渐得到了完善和优化。如今，胰酶已成为细胞培养技术中不可或缺的工具之一，广泛应用于生物医学研究、药物开发和工业生产等领域。需要注意的是，虽然胰酶在细胞传代中发挥着重要作用，但其使用也需要遵循一定的规范和注意事项。

TGW-nu-1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：神经元细胞;相关产品有：Hep2细胞、SW 626细胞、SF-539 BT细胞

NCIH596 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：４-１：８传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：Tu-212细胞、NCIH2066细胞、CL1细胞

Reuber H-35 Cells;背景说明：在糖皮质激素、胰岛素或cAMP衍生物的诱导下可以产生酪酸基转移酶；可被逆转录病毒感染；可产生白蛋白、转铁蛋白、凝血酶原；在AxC大鼠中可以成瘤。;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：STO细胞、Hs940-T细胞、PL 5细胞

MDCC MSB1 Cells;背景说明：淋巴瘤;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MLA-144细胞、DoTc2-4510细胞、Porcine Kidney-13细胞

SNU739 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：CF-PAC1细胞、149 PT细胞、SNU-484细胞

H184B5-F5 Cells(提供STR鉴定图谱)

HAP1 PTPN3 (-) 2 Cells(提供STR鉴定图谱)

RWPE-1 Cells;背景说明：肿瘤抑制基因： p５３ + [PubMed: ９２１４６０５] pRB + [PubMed: ９２１４６０５] 一位正常男性前列腺组织切片的周围区域的上皮细胞用单拷贝的人乳头瘤病毒的１８(HPV-１８)进行转化，建立了RWPE-１ (ATCC CRL-１１６０９) 细胞株 [PubMed: ９２１４６０５]. 在三维Matrigel培养时，在雄激素作用下，RWPE-１细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA。[PubMed: １１１７０１４２]. 当与Matrigel或基质细胞混合注射雄性裸鼠时，RWPE-１细胞也能形成腺胞[PubMed: １１３０４７２４] 并产生PSA。 来源于RWPE-１的细胞再用Kirstin鼠类肿瘤病毒转染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-２细胞株(ATCC CRL-１１６１０) [PubMed: ９２１４６０５] 和 RWPE２-W９９ (ATCC CRL-２８５３) 细胞株。 另外，用N--N-(MNU)处理RWPE-１，建立了一系列模拟前列腺癌进程中不同时期的成瘤细胞株。 它们是 WPE１-NA２２ (ATCC CRL-２８４９), WPE１-NB１４ (ATCC CRL-２８５０, WPE１-NB１１ (ATCC CRL-２８５１) 和 WPE１-NB２６ (ATCC CRL-２８５２) 细胞株。 据提供者报道，RWPE-１ 细胞株(ATCC CRL-１１６０９)经过检测，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈阴性。;传代方法：１：３传代,２-３天传一代。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞;相关产品有：NCI-H2073细胞、EFM192A细胞、TE3细胞

SNT-8 Cells;背景说明：NK/T细胞淋巴瘤；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Vero E-6细胞、HPAEC细胞、HET-1A细胞

High5 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：C2BBe 1细胞、Kit225 K6细胞、BrCL15细胞

SGC-7901 Cells;背景说明：１９７９年建系；这株细胞源自一位５６岁女性胃腺癌患者的淋巴结转移灶。RPMI-１６４０培养１２天，细胞开始生长，首次传代１０天；３１个月中传代１８６代。免疫抑制的ICR小鼠、乳犬皮下移植成功，家兔、乳犬眼前房移植成功；淋巴结转移，从小鼠皮下侵袭至肌层。;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：NCIH596细胞、NK-92细胞、V-79-4细胞

KS-SLK Cells;背景说明：肉瘤;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：SNU-668细胞、Mink Lung细胞、Nthy-ori 3-1细胞

TR146 Cells;背景说明：食管鳞癌;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞、T98 G细胞、TF-1细胞

SW 1783 Cells;背景说明：间变性星形细胞瘤；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：BEL7404细胞、P-388细胞、LTPA细胞

L02 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NCI-H1651细胞、NCI-H1435细胞、B958细胞

HuH7-SLC17A2-KO-c3 Cells(提供STR鉴定图谱)

L1210/0 Cells(提供STR鉴定图谱)

MST-2 Cells(提供STR鉴定图谱)

OKM-2T Cells(提供STR鉴定图谱)

Royan C14 Cells(提供STR鉴定图谱)

Ubigene 4T1 Pigr KO Cells(提供STR鉴定图谱)

UNESP-CM11 Cells(提供STR鉴定图谱)

HAP1 STX17 (-) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)

RGC-5 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：B16F0细胞、Human Epidermoid carcinoma #2细胞、A 72细胞

HTSMC Cells;背景说明：气管平滑肌;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：LIM-1215细胞、Ej138细胞、HTori-3细胞

Panc-8_13 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：HUV-EC-C细胞、KMST6细胞、NCIH838细胞

OVCAR-3 Cells;背景说明：该细胞１９８２年由T.C. Hamilton等建系，源自一位６０卵巢腺癌的腹水，是卵巢癌抗药性研究的模型。;传代方法：１：２—１：４传代，每周换液２—３次;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：TE10细胞、SW1417细胞、LN-382细胞

OVCAR432 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：LU-65M细胞、Malme-3M细胞、H-2030细胞

OVCAR432 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：LU-65M细胞、Malme-3M细胞、H-2030细胞

SKMEL-31 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：４-１：６传代，２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞;相关产品有：NOMO1细胞、EST81细胞、b.End3细胞

BIU87 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：H2591细胞、NCI-H358细胞、HSAEC1-KT细胞

32D clone3 Cells;背景说明：骨髓淋巴瘤；C３H/HeJ;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：A9细胞、4T1-A细胞、PANC-02-03细胞

HOSEpiC Cells;背景说明：卵巢；上皮 Cells;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Toledo细胞、Hs-27细胞、P-36细胞

OVCAR5 Cells;背景说明：卵巢癌；腹水转移；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：SK-NSH细胞、C3H10T1/2 clone8细胞、H524细胞

P 3 HR 1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：每２-３天换液;生长特性：悬浮生长 ;形态特性：淋巴母细胞样;相关产品有：SK-MEL-31细胞、Monomac-1细胞、NCI-HUT-460细胞

KGN Cells;背景说明：该细胞株是颗粒细胞瘤。细胞在加入人体绒膜促性腺激素后可能产生孕酮。细胞生长缓慢。;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：SO-RB50细胞、HS688AT细胞、SKCO1细胞

N-2a Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：４传代；２-３天换液１次;生长特性：贴壁生长;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：SUDHL16细胞、B16-BL6细胞、NCI.H226细胞

RT-4 Cells人膀胱移行细胞乳头瘤细胞|有STR图谱

MHCC97-H-luc Cells人高转移潜能肝癌细胞|有STR图谱

HCT-116-LUC Cells人结肠癌细胞|有STR图谱

PC-12 Cells大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞|有STR图谱

B-CPAP-Luc Cells人甲状腺癌乳头状细胞|有STR图谱

MFE-280 Cells人子宫内膜腺癌细胞|有STR图谱

MKN45-Luc Cells人胃癌细胞|有STR图谱

Caki-2 Cells人乳头状肾细胞癌细胞|有STR图谱

AsPC-1 Cells人转移胰腺腺癌细胞|有STR图谱

LoVo-Luc Cells人结直肠癌细胞|有STR图谱

IAR20 Cells大鼠肝细胞|有STR图谱

JEG-3 Cells人绒毛膜癌细胞|有STR图谱

DLD-1 Cells人结直肠腺癌上皮细胞|有STR图谱

Hs888Lu Cells人肺成纤维细胞|有STR图谱

EoL-1 Cells人急性髓性(嗜酸性)白血病细胞|有STR图谱

PC-12 Cells大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞|有STR图谱

Malme-3M Cells人皮肤恶性黑色素瘤细胞|有STR图谱

RBL-2H3 Cells大鼠嗜碱性细胞白血病细胞|有STR图谱

GM21081 Cells人淋巴细胞|有STR图谱

769-P Cells人肾细胞腺癌细胞|有STR图谱

Ect1/E6E7 Cells人宫颈上皮细胞|有STR图谱

HTh83 Cells人甲状腺癌细胞|有STR图谱

Farage Cells人B淋巴瘤细胞|有STR图谱

LS174T-Luc Cells人结直肠腺癌细胞|有STR图谱

HuLEC-5a Cells人肺微血管内皮细胞|有STR图谱

CCD-841CoN Cells人正常结肠上皮细胞|有STR图谱

Hep-G2 Cells人肝癌细胞|有STR图谱

ACT I Cells人甲状腺癌细胞|有STR图谱

WB-F344 Cells大鼠肝上皮样干细胞|有STR图谱

ZR-75-30 Cells人乳腺癌细胞|有STR图谱

SJCRH30 Cells人骨髓横纹肌肉癌细胞|有STR图谱

B16/OVA Cells小鼠黑色素瘤细胞|有STR图谱

Caov-3 Cells人卵巢腺癌细胞|有STR图谱

MiCl1 (S+L-) Cells貂肺成纤维细胞|有STR图谱

PANC-1 Cells人胰腺癌细胞|有STR图谱

ZR-75-1-luc Cells人乳腺癌细胞|有STR图谱

NCI-H2052 Cells人肺间皮瘤细胞|有STR图谱

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