"4T1 Cells小鼠乳腺癌细胞低代次保种|STR图谱
【培养观察】
定期观察4T1 Cells小鼠乳腺癌细胞低代次保种|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【4T1 Cells小鼠乳腺癌细胞低代次保种|STR图谱英文别名】
4T1-A; 4T1.0; 4T1/WT
传代细胞培养是细胞生物学研究中的基础技术,其成功与否直接影响实验结果的可靠性。在操作过程中,细胞的消化时间和浓度控制尤为关键。消化时间过短会导致细胞难以从培养瓶壁脱落,影响后续传代效率;而消化时间过长则可能造成细胞膜损伤甚至死亡。研究表明,细胞的最佳消化时间通常控制在1-3分钟,具体需根据细胞状态和培养条件进行调整。消化浓度方面,当使用较高浓度(0.25%胰酶-EDTA)时,消化时间应缩短至1-2分钟;若使用较低浓度(0.05%),则需延长至3-5分钟。建议在显微镜下密切观察细胞形态变化,当细胞间隙增大、边缘回缩时立即终止消化。
细胞代谢随温度降低而逐渐减慢。当温度降至冰点以下时,细胞内的游离水会形成冰晶,导致细胞膜和细胞器结构的机械损伤,最终引发细胞死亡。然而,通过添加冷冻保护剂(如二甲亚砜或甘油),可以显著提高细胞在深低温环境下的存活率。这些保护剂能够降低冰晶的形成概率,并减少低温对细胞结构的破坏。
【背景信息】
4T1 Cells小鼠乳腺癌细胞低代次保种|STR图谱4T1是从410.4瘤株中未经诱变筛得的6-鸟嘌噙抗性细胞株。当注射到BALB/c小鼠中时,4T1自发产生高转移肿瘤,可转移到肺,肝,淋巴结和大脑,同时在注射部位形成始发灶。诱导转移时不需要摘除始发灶。4T1细胞在BALB/c小鼠中的生长与转移特性与人体中的乳腺癌十分相近。这种肿瘤是人VI期乳腺癌的动物模型。4T1-诱导的肿瘤在手术后及未手术情况下转移的动力学相近,可以用作手术后及未手术模型。跟其他肿瘤模型相比,由于4T1的抗6-鸟嘌噙特性,微小的转移细胞团(少到仅仅1个)也可以在许多远端器官中检测到。没必要数淋巴结或称重器官。
【传代比例】
1:2-1:4(4T1 Cells小鼠乳腺癌细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
4T1 Cells小鼠乳腺癌细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【生长特性】
4T1 Cells小鼠乳腺癌细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长
【形态特性】
4T1 Cells小鼠乳腺癌细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样
【换液周期】
4T1 Cells小鼠乳腺癌细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:4T1 Cells小鼠乳腺癌细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
细胞传代是细胞培养中的一项基本操作技术,其目的是使细胞持续保持良好的生长状态,同时扩大细胞培养规模。细胞传代操作看似简单,但其中涉及诸多细节和注意事项,需要实验人员严格遵循操作规程,才能确保细胞培养的成功。
细胞系在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来,即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的,不要再去延长消化时间,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞:润洗方法5min还不能消化,以结肠癌细胞为例,比如:HCT15、LS411和KM12细胞,胰酶消化,一般10 cm培养皿,一次加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。
【物种来源】
4T1 Cells小鼠乳腺癌细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定4T1 Cells小鼠乳腺癌细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化4T1 Cells小鼠乳腺癌细胞低代次保种|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代步骤(二):终止消化:当观察到大部分细胞已经脱落时,向培养皿中加入适量的完全培养基以终止胰蛋白酶的消化作用。细胞悬液转移与离心:用吸管轻轻吹打培养皿底部的细胞,使其形成均匀的细胞悬液。然后,将细胞悬液转移至无菌离心管中,以适当的转速(通常为800-1000rpm)离心3-5分钟。重悬与接种:离心后,轻轻倒掉上清液,用适量的完全培养基重悬细胞沉淀。根据实验需要,将细胞悬液按照适当的比例接种到新的培养皿或培养瓶中,置于37℃、5% CO2的培养箱中继续培养。
瓶装500ml血清的解冻需要采用逐步升温的""阶梯式解冻法"",这是保证血清质量的关键步骤。具体操作流程如下:首先将血清从–20℃或–70℃转移至4℃冰箱,缓慢溶解24小时。这一低温过渡阶段可以让血清中的各种成分逐渐适应温度变化,避免突然的温度波动导致蛋白质变性。待血清完全溶解后,再将其移至室温环境使其完全解冻。在解冻过程中,需要每隔2-3小时轻轻摇晃瓶身,使血清各部分的温度和成分均匀分布,这一操作能显著减少沉淀物的形成。但需特别注意摇晃力度,避免产生气泡,因为气泡可能导致血清中的蛋白质变性。
HCC1438 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SK-N-BE-2细胞、OVCA-433细胞、A-673细胞
LLCPK1 Cells;背景说明:肾;自发永生;Hampshire;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SK-NMC细胞、B-CPAP细胞、HBEpiC细胞
OVCAR 5 Cells;背景说明:卵巢癌;腹水转移;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Nb-2细胞、MTC-TT细胞、SW527细胞
H-23 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3传代;3-4天1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:L 363细胞、SK-N-BE(2C)细胞、NCI-H187细胞
MDA-MB-468-RED Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:GM346细胞、Medical Research Council cell strain-5细胞、Me Wo细胞
GM09793 Cells(提供STR鉴定图谱)
HAP1 BCR (-) 3 Cells(提供STR鉴定图谱)
COLO-357 Cells;背景说明:胰腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SNU449细胞、S91细胞、MM1.S细胞
HEC1A Cells;背景说明:这株细胞及其亚株HEC-1-B是H.Kuramoto及其同事1968年从一位IA期子宫内膜癌患者身上分离得到的。PAF可以诱导其c-fos的表达。;传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:NCIH2029细胞、GES1细胞、Bac12F5细胞
Hs863T Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:NCIH1836细胞、LC-1细胞、RDES-1细胞
SNU1040 Cells;背景说明:结肠癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:16HBE14o-细胞、PLA-801D细胞、RSC 96细胞
CT26.WT Cells;背景说明:CT26细胞是被N-亚硝基-N-甲基脲烷(NNMU)诱导得到的未分化的小鼠结肠癌细胞,该细胞的一个克隆形成的细胞系被命名为CT26.WT。CT26.WT被逆转录病毒载体LXSN稳定转化形成了一个致死性的亚克隆CT26.CL25,这一病毒载体含有lacZ基因、编码肿瘤相关抗原(TAA)和beta半乳糖苷酶。CT26.WT和CT26.CL25细胞在小鼠中生长速度和致死率都很相似,不同的是CT26.CL25细胞可以表达肿瘤相关抗原和beta半乳糖苷酶,因此这两株细胞可以联合用于免疫治疗和宿主免疫反应的研究。 ;传代方法:1:4-1:10传代,2-3天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:NCIH1341细胞、SCC-25细胞、SN-12C细胞
TF-1 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:维持细胞浓度在3×104-5×105 cells/ml;2-3天换液1次。;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样 ;相关产品有:Chang liver细胞、Alexander cells细胞、hTERT RPE1细胞
CA 46 Cells;背景说明:该细胞源自Burkitt's淋巴瘤患者的B淋巴细胞,EBNA、Fc阴性。;传代方法:1:2传代;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:D283 Med细胞、WERI-Rb 1细胞、Colo741细胞
H1048 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:8传代;;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:IGROV1细胞、HT55细胞、NL20细胞
HG03269 Cells(提供STR鉴定图谱)
ICGi034-B Cells(提供STR鉴定图谱)
LN229/CD20 Cells(提供STR鉴定图谱)
NCI-H2228-Luc Cells(提供STR鉴定图谱)
PathHunter CHO-K1 PTAFR beta-arrestin Cells(提供STR鉴定图谱)
Ubigene A-549 CXCR4 KO Cells(提供STR鉴定图谱)
UOK268 Cells(提供STR鉴定图谱)
HG02131 Cells(提供STR鉴定图谱)
SK RC 20 Cells;背景说明:肾癌;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:OV1-P细胞、3T3-J2细胞、P3X63Ag8细胞
RPMI-7951 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:4传代,2天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:HDQP1细胞、SBC-3细胞、TC-1 [Mouse lung]细胞
LNCaP-FGC Cells;背景说明:人前列腺癌细胞LNCaP克隆FGC是从一位50岁白人男性(血型B+)的左锁骨淋巴结针刺活检中分离,该患者经确诊为前列腺癌转移。 这株细胞对5-α-二睾酮(生长调节子和酸性脂酶产物)有响应。这株细胞并不形成一致的单层,而是形成集落,在传代时可以用滴管反复吹吸打碎。它们仅仅轻轻地吸附在基底上,不形成汇合,很快使培养基变酸。生长很慢。传代后48小时内不应扰动。当培养瓶封包后,多数细胞从培养瓶底分离,悬浮在培养基中。收到后,在通常培养单层细胞的条件下培养24到48小时,以合细胞再贴壁。;传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞;相关产品有:CORL26细胞、NCI-H250细胞、RA 1细胞
HANK1 Cells;背景说明:NK/T细胞淋巴瘤;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MCA-38细胞、H-1781细胞、NCI-H322细胞
Y3.AG.1.2.3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Rat Fetal Lung-6细胞、MES-SA/Dx5细胞、TALL 1细胞
Y3.AG.1.2.3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Rat Fetal Lung-6细胞、MES-SA/Dx5细胞、TALL 1细胞
NEC Cells;背景说明:食管癌;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:U14细胞、H1355细胞、Clone M-3细胞
TE32 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:4传代,3-4天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:梭型和大的多核细胞;相关产品有:NIH-3T3细胞、LC1-Sq细胞、MDA-MB-415细胞
H522 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:6传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:HUASMC细胞、JHH-2细胞、Daudi细胞
UCLA RO-81-A-1 Cells;背景说明:甲状腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:293 EBNA细胞、Molm 13细胞、SUDHL8细胞
Y3-Ag1.2.3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HuH1细胞、NBL-1细胞、ETCC007细胞
Y3-Ag 1.2.3 Cells;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:0V-1063细胞、DU_145细胞、ECC-10细胞
GM00215A Cells;背景说明:肺;自发永生;雄性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HOSEpiC细胞、H2122细胞、GM02219D细胞
GM01232 Cells;背景说明:1971年1月,该细胞由ReidTW及其同事从病人右眼切除的肿瘤进行原代培养建立而成,此病人有很强的视网膜母细胞瘤的母系家族遗传性。该细胞的超微结构,如核膜内折、三层膜结构、大的被膜小泡、环孔板、微管、中心粒、基粒等都与原始肿瘤相似。;传代方法:1:2传代;生长特性:悬浮生长;形态特性:圆形,成簇生长;相关产品有:Tu212细胞、32D.3细胞、J82 COT细胞
BJ Cells人皮肤成纤维细胞|有STR图谱
SW1990 Cells人胰腺癌细胞|有STR图谱
Hs 578T Cells人乳腺癌细胞|有STR图谱
CCC-HPF-1 Cells人胚肺成纤维细胞|有STR图谱
SK-GT-4 Cells人食道癌肿瘤细胞|有STR图谱
Neuro-2a Cells小鼠神经母细胞瘤细胞|有STR图谱
MC3T3-E1 Subclone 24 Cells小鼠胚胎成骨细胞前体细胞|有STR图谱
Hs 888.Lu Cells人肺成纤维细胞|有STR图谱
EoL-1 Cells人急性髓性(嗜酸性)白血病细胞|有STR图谱
BEAS-2B Cells人支气管上皮细胞|有STR图谱
SK-OV-3 Cells人卵巢腺癌细胞|有STR图谱
PaTu 8988s Cells人胰腺癌细胞|有STR图谱
A549/OVA Cells人肺癌细胞|有STR图谱
Raji-Luc Cells人Burkitt’s淋巴瘤细胞|有STR图谱
MOLT-4 Cells人急性淋巴母细胞白血病细胞|有STR图谱
HCT116-GFP Cells人结肠癌细胞|有STR图谱
SU-DHL-6 Cells人B淋巴瘤细胞|有STR图谱
CTX Cells大鼠脑星形胶质细胞|有STR图谱
4T1/OVA Cells小鼠乳腺癌细胞|有STR图谱
HMy2.C1R Cells人B淋巴母细胞|有STR图谱
Hs888Lu Cells人肺成纤维细胞|有STR图谱
TE-3 Cells人食管癌细胞|有STR图谱
IOSE-80 Cells人正常卵巢上皮细胞|有STR图谱
OAW28 Cells人卵巢上皮性肿瘤细胞|有STR图谱
NCI-H460 Cells人大细胞肺癌细胞|有STR图谱
MDA-MB-468 Cells人乳腺癌细胞|有STR图谱
Neuro-2a-Luc Cells小鼠脑神经瘤细胞|有STR图谱
HuLEC-5a Cells人肺微血管内皮细胞|有STR图谱
LLC-MK2 Cells猴肾细胞|有STR图谱
5637-Luc Cells人膀胱癌细胞|有STR图谱
CCD-18Co Cells人结肠组织细胞|有STR图谱
LN-18 Cells人脑胶质母细胞瘤细胞|有STR图谱
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RD-ES Cells人尤文氏肉瘤细胞|有STR图谱
HCC1500 Cells人乳腺导管癌细胞|有STR图谱
HepG2.2.15-LUC Cells人肝细胞|有STR图谱
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关键字: 4T1 Cells小鼠乳腺癌细胞低代次保;复苏细胞系;细胞STR鉴定报告;细胞STR鉴定图谱;ATCC|DSMZ细胞库;
公司提供ATCC、DSMZ、ECACC、NCI-DTP、RCB(Riken)等细胞系