L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞低代次保种|STR图谱

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【培养观察】

定期观察L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞低代次保种|STR图谱生长状态，注意培养基的pH值变化和细胞密度，及时换液和传代。

【细胞复苏】

复苏细胞时，应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻，然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成，以确保细胞的高存活率。

【细胞传代】

传代时，应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化，并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团，需要吹打吹散。传代后，应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。

【细胞冻存】

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存，并置于液氮中储存。

【L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞低代次保种|STR图谱英文别名】

L-M[TK-]; LM TK negative; L-M (TK-); L M (TK-); LM(TK-); LM(tk-); LM-TK-; LMTK-; L cells (TK-); L(TK-); L(tk-)

烘箱（干燥箱）的干热灭菌功能对玻璃器皿至关重要。鼓风式设计确保160℃高温下热量均匀分布，但操作中存在三个技术要点：一是必须同步启动鼓风与加热功能，避免局部过热；二是100℃以下才能开启箱门，防止玻璃器皿因骤冷破裂；三是需使用耐高温牛皮纸包裹器械，普通棉质材料在高温下碳化产生的微粒可能影响细胞贴壁。有新研发的真空烘箱将灭菌时间缩短30%，同时降低能源消耗。

细胞代谢随温度降低而逐渐减慢。当温度降至冰点以下时，细胞内的游离水会形成冰晶，导致细胞膜和细胞器结构的机械损伤，最终引发细胞死亡。然而，通过添加冷冻保护剂（如二甲亚砜或甘油），可以显著提高细胞在深低温环境下的存活率。这些保护剂能够降低冰晶的形成概率，并减少低温对细胞结构的破坏。

【背景信息】

L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞低代次保种|STR图谱详见相关文献介绍

【传代比例】

1:2-1:4(L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞低代次保种|STR图谱首次传代建议1:2)

【来源说明】

L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞低代次保种|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库

【生长特性】

L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞低代次保种|STR图谱贴壁生长

【形态特性】

L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞低代次保种|STR图谱上皮细胞样

【换液周期】

L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞低代次保种|STR图谱每周2-3次

【产品包装】

复苏发货：L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞低代次保种|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货：1ml冻存管(两支)

细胞消化注意事项（二）：细胞状态:在消化前，应确保细胞处于适宜的状态，如生长密度、形态和活力等。后续操作:消化后的细胞应立即进行后续操作，如传代、分离或计数等，以避免细胞在体外过长时间暴露而导致损伤或死亡。细胞消化是细胞培养中的一个关键步骤，需要严格遵循操作规程和注意事项，以确保细胞的良好分离和后续实验的顺利进行。

在细胞培养基选择方面，不同细胞系有特定要求。常用的DMEM培养基适合大多数贴壁细胞，而1640培养基则更适用于悬浮细胞。肿瘤细胞系一般生长较快，需要更频繁的传代，而正常细胞系生长较慢，传代间隔较长。悬浮细胞则不需要消化步骤，直接通过离心即可传代。污染防控是细胞培养不可忽视的环节。细菌污染通常表现为培养基迅速浑浊；真菌污染可见菌丝状结构；支原体污染则较为隐蔽，可能导致细胞生长缓慢、形态改变等。一旦发现污染，最安全的做法是立即废弃，并对培养箱和工作台进行彻底消毒。平时操作应严格遵循无菌规范，包括穿戴实验服、戴手套、使用75%酒精消毒等。所有进入超净台的物品都应经过酒精消毒，操作尽量快速准确，减少开放时间。

【物种来源】

L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞低代次保种|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源

【培养条件】

37°C、5%CO₂、饱和湿度环境，使用含10%-20%FBS的基础培养基。

【消化传代】

使用0.25%胰酶-EDTA溶液，37°C孵育1-2分钟，轻拍培养瓶促进细胞脱落。（悬浮细胞可省略这步操作）

【污染防控】

严格无菌操作，定期检测支原体污染，必要时使用双抗预防细菌污染。

【细胞状态】

传代和消化过程中，应密切关注细胞状态，避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。

【污染检测】

支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。

【细胞接收流程】

收到细胞后，应首先观察细胞状态，然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞低代次保种|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时，即可进行首次传代培养。

【操作规范】

在细胞培养和处理过程中，需严格遵守无菌操作规范，以避免细胞污染和交叉污染。

【消化条件】

室温下用胰酶消化1-3分钟。

【生物安全等级】

1级。

【空泡现象】

在密集培养时，细胞中可见巨大的空泡，这是细胞的正常特性，无需担心。

【血清比例】

使用10%-20%的血清浓度有助于优化L-M(TK-) Cells小鼠胸腺激酶缺陷细胞低代次保种|STR图谱实验条件，提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证，被认为是较为适宜的选择。

细胞传代步骤（二）：终止消化:当观察到大部分细胞已经脱落时，向培养皿中加入适量的完全培养基以终止胰蛋白酶的消化作用。细胞悬液转移与离心:用吸管轻轻吹打培养皿底部的细胞，使其形成均匀的细胞悬液。然后，将细胞悬液转移至无菌离心管中，以适当的转速(通常为800-1000rpm)离心3-5分钟。重悬与接种:离心后，轻轻倒掉上清液，用适量的完全培养基重悬细胞沉淀。根据实验需要，将细胞悬液按照适当的比例接种到新的培养皿或培养瓶中，置于37℃、5% CO2的培养箱中继续培养。

一般来说，在开始细胞消化时，可以先根据经验设定一个大致的消化时间，然后在这个时间点前后密切观察细胞的状态。如果消化时间过长，可能会导致细胞受损，影响细胞的活性和功能；而消化时间过短，则可能导致细胞没有完全分离，影响传代效果。还可以通过观察消化液的浑浊程度来判断。在消化开始时，消化液通常是比较澄清的。随着消化的进行，当细胞逐渐脱落进入消化液中，消化液会变得浑浊。当浑浊度达到一定程度，且细胞形态也符合消化完成的特征时，可以认为消化好了。总之，在细胞传代用胰酶消化时，需要综合考虑细胞形态变化、拍打或晃动的反应、消化时间以及消化液的浑浊程度等多个因素，来准确判断消化是否完成。

MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI Cells;背景说明：该细胞１９７３年由R. Cailleau建系，源自７４岁乳腺导管癌女性患者的胸腔积液，细胞生长缓慢，松散贴壁，生长过程中会脱落到培养基，不会汇合，过表达FGF受体;传代方法：１：２—１：４传代，每周换液２—３次;生长特性：松散贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞

PIGI Cells;背景说明：皮肤；黑色素细胞；HPV１６转化；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：GTL 16细胞、HS-683细胞、Y3细胞

AM Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞;相关产品有：HFLS-RA细胞、GLC-15细胞、HO1N1细胞

PLC PRF 5 Cells;背景说明：该细胞系分泌乙肝病毒表面抗原（HBsAg）。 此细胞系原先被支原体污染，后用BM-cycline去除支原体;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：RLE-6TN细胞、U-2932细胞、DMS-53细胞

TKB-1 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Human Embryo Lung-1细胞、AMC-HN-8细胞、KYSE270细胞

GM21851 Cells(提供STR鉴定图谱)

HAP1 MAPKAPK2 (-) 1 Cells(提供STR鉴定图谱)

Mevo Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：３-１：５传代，２-３天换液１次。;生长特性：混合生长;形态特性：成纤维细胞;相关产品有：Sci-1细胞、BxPC-3细胞、MDA2B细胞

NCI-H292 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：３-１：８传代；２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：FC33细胞、GM04671细胞、Eca-109细胞

NCI-SNU-449 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：５-１：１０传代；每周２-３次;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样；多角形;相关产品有：MDA-MB-330细胞、D-341Med细胞、EOC20细胞

OV2008 Cells;背景说明：宫颈鳞癌；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NS1-Ag4/1细胞、HRC-99细胞、NCI-H727细胞

H-1650 Cells;背景说明：该细胞是从一名２７岁白人男性（１０年烟龄）支气管肺泡癌患者的胸腔积液中分离得到的。;传代方法：１：４-１：６传代；２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：IPLB-SF 21细胞、DAKIKI Clone 1细胞、U 266细胞

Vero-E6 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：LS-513细胞、KMH-2细胞、PSN1细胞

LCLC103H Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：CHO-S细胞、OAC-P4C细胞、MDA-MB-134细胞

SUM-52 Cells;背景说明：乳腺癌；胸腔积液转移；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：AG 9细胞、B16/F0细胞、HCC 2185细胞

HPSI0614i-qunz_3 Cells(提供STR鉴定图谱)

KATO II Cells(提供STR鉴定图谱)

MelHOrPLX4032_10muM Cells(提供STR鉴定图谱)

NH50375 Cells(提供STR鉴定图谱)

Rag2-/- pro-B cells Cells(提供STR鉴定图谱)

Ubigene A-549 KCNH1 KO Cells(提供STR鉴定图谱)

UROtsa Cd#1 Cells(提供STR鉴定图谱)

HEK-SLC12A3-KO-c8 Cells(提供STR鉴定图谱)

beta TC6 Cells;背景说明：这株细胞来源于转基因小鼠中生长的一个胰肿瘤(胰岛素瘤)。这种小鼠携带了大鼠胰岛素II基因启动子调控的SV４０早期基因的假基因结构。细胞包含丰富的胰岛素和小量的胰高血糖素及生长抑素。响应葡萄糖而分泌胰岛素;传代方法：１：２-１：４传代，每２-３天换液一次;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：RPMI1788细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞、STTG1细胞

HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma] Cells;背景说明：皮肤鳞癌；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Y3M细胞、HPAF2细胞、MLM细胞

PANC0327 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：3T3 L1细胞、EU-2细胞、Granta-519细胞

ECC12 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：HEK-EBNA细胞、U-118 MG细胞、Tadarida brasiliensis 1 lung细胞

Detroit562 Cells;背景说明：器官：咽头 疾病：癌 取材转移灶：胸水;传代方法：１：２-１：４传代，２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞;相关产品有：NALM-6细胞、OE-33细胞、UCD-MLA-144细胞

Detroit562 Cells;背景说明：器官：咽头 疾病：癌 取材转移灶：胸水;传代方法：１：２-１：４传代，２-３天换液１次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞;相关产品有：NALM-6细胞、OE-33细胞、UCD-MLA-144细胞

P 815 Cells;背景说明：肥大细胞瘤；雄性；DBA/２;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：SPCA1细胞、SNU354细胞、EU-3细胞

SKNSH Cells;背景说明：SK-N-SH细胞系由J.L.Bieder建系，它与SK-N-MC所不同的是倍增时间较长且多巴胺-β-羟基酶水平较高。 SK-N-SH在细胞介导的细胞毒性试验中用作靶细胞系。;传代方法：１：２传代;生长特性：悬浮生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：OVCAR 432细胞、Pfeiffer细胞、AR41P细胞

OUMS27 Cells;背景说明：软骨肉瘤；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Tu-177细胞、SK-GT-2细胞、Panc_02_03细胞

WILL-2 Cells;背景说明：弥漫大B淋巴瘤；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、BMF细胞、NCIH2172细胞

DHL10 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：悬浮;形态特性：淋巴母细胞;相关产品有：H1793细胞、TB-1 Lu细胞、32D CL3细胞

DHL5 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：B16 BL6细胞、HCC-366细胞、PL-12细胞

MT-2 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代;生长特性：悬浮生长;形态特性：淋巴母细胞;相关产品有：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞、SKNO-1细胞、RPTEC TERT1细胞

KOSC-2 Cells;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：２.２ x １０^４ cells/ml ;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：OAW42细胞、Mel-MeWo细胞、T-ALL-1细胞

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