NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱

"NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱

【操作规范】

在细胞培养和处理过程中，需严格遵守无菌操作规范，以避免细胞污染和交叉污染。

【消化条件】

室温下用胰酶消化1-3分钟。

【生物安全等级】

1级。

【形态特性】

NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱上皮细胞样

【NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱英文别名】

H446; H-446; NCI-446; NCIH446

【背景信息】

NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱该细胞是１９８２年由CarneyD和GazdarAF等从一位小细胞肺癌患者的胸腔积中建立的。细胞的原始形态并不具有小细胞肺癌特征。这个细胞株是小细胞肺癌的生化和形态学上的变种，表达神经元特有的烯醇酶和脑型肌激酶同工酶；左旋多巴脱羧酶、蚕素、抗利尿激素、催产素或胃泌激素释放肽未达到可检测水平。与正常细胞相比，该细胞c-mycDNA序列扩增约２０倍，RNA增加１５倍。Zui初传代培养基用含有５%FBS的RPMI１６４０，另外添加１０nM化可的松、０.００５mg/ml胰岛素、０.０１mg/ml转铁

传代培养是细胞培养技术中的关键环节，其核心目的是维持细胞的健康增殖并获取稳定的实验材料。当细胞在培养瓶中生长至80%-90%汇合度时，细胞间的接触抑制和营养竞争会导致生长速率下降，此时必须通过传代操作将细胞分散并重新接种。这一过程不仅解决了培养空间限制问题，还能通过细胞扩增建立可持续研究的细胞株系。然而值得注意的是，反复传代可能导致细胞表型改变，例如间充质干细胞多次传代后可能出现分化能力下降，因此需严格控制传代次数和操作规范。

公司细胞系主要引进ATCC、DSMZ、JCRB、KCLB、RIKEN、ECACC等细胞库，细胞系体外培养，它们会成长为单层细胞，附着或紧贴在培养瓶上，或悬浮在体外的溶液中，细胞系复苏周期短，公司细胞系状态良好，饱满，有光泽等优点。EDTA的作用：许多人不用胰酶，只用EDTA，或者用胰酶/EDTA联合作用。这里要明白，胰酶切割细胞外基质的一些负责粘连和附着的蛋白，而EDTA通过螯合Ca离子，作用于整联蛋白的活性，所以EDTA的作用更加温和。有的人在胰酶里添加一些EDTA，或者对付特别难消化的细胞，添加多一些EDTA，就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果5min还消化不下来的话)，而应该想其它办法。

【换液周期】

NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱每周2-3次

【产品包装】

复苏发货：NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货：1ml冻存管(两支)

【物种来源】

NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源

【培养条件】

37°C、5%CO₂、饱和湿度环境，使用含10%-20%FBS的基础培养基。

【生长特性】

NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱贴壁生长

【污染检测】

支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。

【细胞接收流程】

收到细胞后，应首先观察细胞状态，然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时，即可进行首次传代培养。

【消化传代】

使用0.25%胰酶-EDTA溶液，37°C孵育1-2分钟，轻拍培养瓶促进细胞脱落。（悬浮细胞可省略这步操作）

【传代比例】

1:2-1:4(NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱首次传代建议1:2)

【来源说明】

NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库

【污染防控】

严格无菌操作，定期检测支原体污染，必要时使用双抗预防细菌污染。

实验人员需佩戴防爆面罩及双层无菌手套，尤其当发现冻存管液氮渗入时（管壁出现冰晶凝结为典型标志）。建议使用专门设计的液氮罐提取器，避免徒手接触-196℃的冻存管导致低温灼伤。解冻前准备37℃恒温水浴锅，水位需完全浸没冻存管液面线以上，并预热至温度稳定（±0.5℃波动范围）。

准确判断胰酶消化是否完成，首先，观察细胞形态变化是判断胰酶消化程度的重要依据。在加入胰酶后，随着消化的进行，原本贴壁生长的细胞会逐渐变圆。当大部分细胞呈现出圆形，且细胞之间的连接变得松散时，说明消化正在进行中。如果细胞完全脱离培养瓶底部，变成单个的圆形细胞悬浮在消化液中，这通常是消化完成的一个重要标志。此时，在显微镜下观察，细胞应该是圆润、饱满且边界清晰的。其次，可以通过轻轻拍打培养瓶或轻轻晃动培养板来辅助判断。如果细胞很容易从瓶底或板底脱落并在液体中悬浮，说明消化程度可能已经比较合适。但要注意动作要轻柔，避免过度剧烈的晃动对细胞造成损伤。

【培养观察】

定期观察NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱生长状态，注意培养基的pH值变化和细胞密度，及时换液和传代。

【细胞复苏】

复苏细胞时，应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻，然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成，以确保细胞的高存活率。

【细胞传代】

传代时，应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化，并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团，需要吹打吹散。传代后，应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。

【细胞冻存】

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存，并置于液氮中储存。

【细胞状态】

传代和消化过程中，应密切关注细胞状态，避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。

【空泡现象】

在密集培养时，细胞中可见巨大的空泡，这是细胞的正常特性，无需担心。

【血清比例】

使用10%-20%的血清浓度有助于优化NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱实验条件，提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证，被认为是较为适宜的选择。

传代消化是细胞培养的关键步骤，但许多新手因担心胰酶损伤细胞而过早终止消化。实际上，适度延长消化时间（如等待细胞完全变圆）反而能减少机械吹打对细胞的伤害。过早终止消化会导致细胞未完全脱离，用力吹打产生的气泡和剪切力对细胞的损伤远大于胰酶本身。常规操作中，建议在显微镜下监控消化过程，待80%-90%细胞变圆后轻柔晃动培养瓶，使细胞自然脱落。此外，吹打时应避免产生气泡，因为气泡破裂时的机械应力会直接损伤细胞膜。

标准复苏流程包括：快速解冻：将冻存管从液氮中取出后立即置于37℃水浴，持续摇动直至仅剩少量冰晶（通常需1-2分钟），梯度稀释：将细胞悬液缓慢加入预热的完全培养基（含10%血清），逐步降低DMSO浓度离心清洗：1000rpm离心5分钟去除冻存保护剂，重悬接种：按适当密度接种于预处理好的培养器皿。

HeLa Cells人宫颈癌细胞传代性好|STR图谱

HUVEC-GFP Cells人脐静脉内皮细胞传代性好|STR图谱

Hepa 1-6/OVA Cells小鼠肝癌细胞传代性好|STR图谱

NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱

HMC3+RFP Cells人小胶质细胞传代性好|STR图谱

ISHIKAWA-Luc Cells人子宫内膜癌细胞传代性好|STR图谱

NCI-H1299 Cells人非小细胞肺癌细胞传代性好|STR图谱

MFM223细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：TMD8细胞复苏实验室、Hepatoma 22细胞复苏实验室、P3J-HR-1细胞复苏实验室

H-2081细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：随细胞的密度而增加;生长特性：悬浮生长;形态特性：聚团悬浮;相关产品有：PK 15细胞复苏实验室、NuTu-19细胞复苏实验室、HCC-1569细胞复苏实验室

FHC细胞复苏实验室;背景说明：胎儿；结肠；自发永生；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：HELA-GFP细胞复苏实验室、T-24细胞复苏实验室、S91细胞复苏实验室

H1694细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：３-４天换液１次。;生长特性：悬浮生长;形态特性：聚团悬浮;相关产品有：beta TC6细胞复苏实验室、TE671细胞复苏实验室、CCRF/CEM/0细胞复苏实验室

TCam-2细胞复苏实验室;背景说明：睾丸精原细胞瘤；男性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：SKMES-1细胞复苏实验室、NB-9细胞复苏实验室、HFF细胞复苏实验室

PANC403细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：MFM223细胞复苏实验室、Hs294T细胞复苏实验室、H-929细胞复苏实验室

SSP-25细胞复苏实验室;背景说明：肝内胆管癌；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：NIH 3T3细胞复苏实验室、MDCK细胞复苏实验室、MCF10-A细胞复苏实验室

SK-OV-433细胞复苏实验室;背景说明：卵巢癌；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：KYSE-450细胞复苏实验室、WIL2S细胞复苏实验室、DMS 273细胞复苏实验室

NCI-H1648 Cells人肺癌腺癌细胞传代性好|STR图谱

CCC-SMC-1 Cells兔主动脉平滑肌细胞传代性好|STR图谱

INS-1 Cells大鼠胰岛细胞瘤细胞传代性好|STR图谱

IB-RS-2 Cells猪肾细胞传代性好|STR图谱

MDA-MB-157 Cells人乳腺癌细胞传代性好|STR图谱

JeKo-1 Cells人套细胞淋巴瘤细胞传代性好|STR图谱

SNU-368 Cells人肝癌细胞传代性好|STR图谱

NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱

EBC-1 Cells人肺癌鳞癌细胞传代性好|STR图谱

HGFLBV067 Cells(提供STR鉴定图谱)

INS-1 832/2 Cells(提供STR鉴定图谱)

M229 R10 Cells(提供STR鉴定图谱)

ND05995 Cells(提供STR鉴定图谱)

PENN103i-330-4 Cells(提供STR鉴定图谱)

Ubigene A-549 ROCK1 KO Cells(提供STR鉴定图谱)

UVU1 Cells(提供STR鉴定图谱)

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SK-MEL-5 Cells人皮肤黑色素瘤细胞传代性好|STR图谱

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RKO-AS45-1 Cells人结肠癌转基因细胞传代性好|STR图谱

HCT116-NIPAL2-KO-c3 Cells(提供STR鉴定图谱)

MC 116细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：每周换液２-３次。;生长特性：悬浮生长 ;形态特性：淋巴母细胞样;相关产品有：GM06141细胞复苏实验室、KFB细胞复苏实验室、MH-S细胞复苏实验室

NTERA2D1细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MARC145细胞复苏实验室、MGH-U3细胞复苏实验室、H2195细胞复苏实验室

BrCL15细胞复苏实验室;背景说明：MDA-MB-４３５S是一种纺锤形的细胞，１９７６年由其亲本(４３５)中筛选得到。４３５是从３１岁的转移性乳腺导管腺癌女性患者胸水中分离得到。当用荧光染料对微管蛋白进行染色时亲本细胞显现散布特征(II型)。最近通过cDNA阵列研究表明，亲本(MDA-MB-４３５)可归入黑素瘤起源。;传代方法：消化３-５分钟，１：２,３天内可长满;生长特性：贴壁生长;形态特性：纺锤形;相关产品有：Hep II细胞复苏实验室、Cates 1B细胞复苏实验室、P388-D1细胞复苏实验室

HSAS3细胞复苏实验室;背景说明：皮肤；成纤维 Cells;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：PE/CA-PJ-34细胞复苏实验室、Buffalo Rat Liver-3A细胞复苏实验室、HUTU80细胞复苏实验室

NG108-15细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MRAEC细胞复苏实验室、Centre Antoine Lacassagne-78细胞复苏实验室、AA-Mel细胞复苏实验室

L6565 Cells小鼠白血病克隆细胞传代性好|STR图谱

NCI-H23 Cells人非小细胞肺癌细胞传代性好|STR图谱

IPAM 3D4/21 Cells猪肺泡巨噬细胞传代性好|STR图谱

JIMT-1 Cells人乳腺癌细胞传代性好|STR图谱

UMR-106+luc Cells大鼠骨肉瘤细胞传代性好|STR图谱

NIH3T3-L1细胞复苏实验室;背景说明：３T３-L１是从３T３细胞（Swissalbino）中经克隆分离得到的连续传代的亚系。该细胞从快速分裂到汇合和接触性抑制状态经历了前脂肪细胞到脂肪样细胞的转变。该细胞鼠痘病毒阴性；可产生甘油三酯，高浓度血清可增强细胞内脂肪堆积。;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：成纤维细胞样;相关产品有：KE 37细胞复苏实验室、Hs294细胞复苏实验室、HCC38细胞复苏实验室

3T3(A31)细胞复苏实验室;背景说明：胚胎；成纤维；自发永生；雄性；BALB/c;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MKN-1细胞复苏实验室、H-548细胞复苏实验室、PL-11细胞复苏实验室

HDSMC细胞复苏实验室;背景说明：表皮血管平滑肌;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：LTEPsm细胞复苏实验室、MHH-CALL-2细胞复苏实验室、Kit 225-K6细胞复苏实验室

H.Ep. No. 2细胞复苏实验室;背景说明：最初认为这个细胞源自喉上皮癌，但随后通过同功酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹分析发现，起源细胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：RBL 2H3细胞复苏实验室、Immortalized Human Hepatocytes细胞复苏实验室、OVCAR8/ADR细胞复苏实验室

SDUBMSi008-A Cells(提供STR鉴定图谱)

Hs 822.T细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：４传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：SK-N-MC细胞复苏实验室、CV 1细胞复苏实验室、GCT0404细胞复苏实验室

HEL-Luc Cells人红白细胞白血病细胞传代性好|STR图谱

U-251MG-GFP Cells人神经胶质细胞瘤细胞传代性好|STR图谱

SNU-761 Cells人肝癌细胞传代性好|STR图谱

OKT 11 Cells小鼠杂交瘤细胞传代性好|STR图谱

CL-11 Cells人结肠癌细胞传代性好|STR图谱

NG108-15细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MRAEC细胞复苏实验室、Centre Antoine Lacassagne-78细胞复苏实验室、AA-Mel细胞复苏实验室

HPAF-I细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：KM.12细胞复苏实验室、HC11 Mammary Epithelium细胞复苏实验室、Hs 832(C).T细胞复苏实验室

Caov-3细胞复苏实验室;背景说明：该细胞１９７６年建系，源自一位５４岁白人女性的卵巢腺癌组织。;传代方法：１：３传代，２—３天换液一次;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮样;相关产品有：BLO 11细胞复苏实验室、LUDLU 1细胞复苏实验室、SUM-52细胞复苏实验室

HBZY1细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：VeroE6细胞复苏实验室、Mac-1细胞复苏实验室、LS 174T细胞复苏实验室

HCC2108细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：BNCL2细胞复苏实验室、MXI细胞复苏实验室、SW1783细胞复苏实验室

NHA细胞复苏实验室;背景说明：星形胶质 Cells;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：MPP-89细胞复苏实验室、CNE细胞复苏实验室、NIE 115细胞复苏实验室

OAW42 Cells人卵巢癌细胞传代性好|STR图谱

SW10 Cells小鼠神经元细胞传代性好|STR图谱

HT22 Cells小鼠海马神经元细胞传代性好|STR图谱

HCMEC Cells人心脏微血管内皮细胞传代性好|STR图谱

NCI-H446 Cells人肺癌细胞复苏率高|STR图谱

Li-7 Cells人肝癌细胞传代性好|STR图谱

HS68 Cells人龟头细胞传代性好|STR图谱

NCI-H510细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：３-１：８传代；每周换液２次。;生长特性：混合生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：NCI-H1755细胞复苏实验室、BE(2)M17细胞复苏实验室、BI-Mel细胞复苏实验室

SW 756细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：G422细胞复苏实验室、RBL-1细胞复苏实验室、CCD 966SK细胞复苏实验室

HOS (TE85, Clone F5)细胞复苏实验室;背景说明：骨肉瘤；女性;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：JurkatE6-1细胞复苏实验室、HGE细胞复苏实验室、OCI-Ly03细胞复苏实验室

HCC366细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：L-363细胞复苏实验室、KYSE70细胞复苏实验室、GM00637H细胞复苏实验室

OVCAR3细胞复苏实验室;背景说明：该细胞１９８２年由T.C. Hamilton等建系，源自一位６０卵巢腺癌的腹水，是卵巢癌抗药性研究的模型。;传代方法：１：２—１：４传代，每周换液２—３次;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：BLO-11细胞复苏实验室、SNB.19细胞复苏实验室、NCI-H711细胞复苏实验室

WEHI-279细胞复苏实验室;背景说明：详见相关文献介绍;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁或悬浮，详见产品说明书部分;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：P31FUJ细胞复苏实验室、LICCF细胞复苏实验室、PC14细胞复苏实验室

RINm5F细胞复苏实验室;背景说明：胰岛β细胞瘤；雄性；NEDH;传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。;生长特性：贴壁;形态特性：详见产品说明书;相关产品有：AMO1细胞复苏实验室、U138MG细胞复苏实验室、SKHEP-1细胞复苏实验室

GBCSD细胞复苏实验室;背景说明：GBC-SD 细胞株是王展明等２０００年从一位６１岁的男性低分化胆囊癌患者中建立的。 细胞的形状有多边形、纺锤形和正方形。 分泌CEA和CA１９-９。倍增时间大约为２１.４小时。 可移植到裸鼠。 生成的肿瘤与原发肿瘤相似。;传代方法：１：２传代;生长特性：贴壁生长;形态特性：上皮细胞样;相关产品有：Vx2细胞复苏实验室、IGROV细胞复苏实验室、Hs 274.T细胞复苏实验室

HUVEC-GFP Cells人脐静脉内皮细胞传代性好|STR图谱

MDA-MB-231 Cells人乳腺癌细胞传代性好|STR图谱

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