"MEG-01 Cells人成巨核细胞白血病细胞复苏率高|STR图谱
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【形态特性】
MEG-01 Cells人成巨核细胞白血病细胞复苏率高|STR图谱淋巴母细胞样
【MEG-01 Cells人成巨核细胞白血病细胞复苏率高|STR图谱英文别名】
Meg-01; MEG01; Meg01
【背景信息】
MEG-01 Cells人成巨核细胞白血病细胞复苏率高|STR图谱MEG-01细胞株源自一位CML患者成巨核细胞转换期的骨髓细胞。细胞质因子VIII和表面球蛋白IIb/IIIa,-Schiff()反应,α醋酯酶和性酶阳性。髓过氧化物酶,α酯酶,化醋AS-D酯酶和碱性酶阴性。用单克隆抗体BA-1(抗B细胞,粒性白细胞),HPL-3(抗球蛋白IIb/IIIa)和20.3(抗单核细胞,血小板)染色成阳性。其他淋巴和骨髓类抗体成阴性。
传代培养是细胞培养技术中的关键环节,其核心目的是维持细胞的健康增殖并获取稳定的实验材料。当细胞在培养瓶中生长至80%-90%汇合度时,细胞间的接触抑制和营养竞争会导致生长速率下降,此时必须通过传代操作将细胞分散并重新接种。这一过程不仅解决了培养空间限制问题,还能通过细胞扩增建立可持续研究的细胞株系。然而值得注意的是,反复传代可能导致细胞表型改变,例如间充质干细胞多次传代后可能出现分化能力下降,因此需严格控制传代次数和操作规范。
在-80℃或-196℃(液氮温度)的条件下,细胞的代谢活动几乎完全停滞,进入“休眠”状态。这种超低温保存技术使得细胞能够长期存储,并在需要时通过复苏恢复活性。例如,在生物医学研究中,许多实验室会利用液氮罐保存珍贵的细胞系,以便后续实验使用。
【换液周期】
MEG-01 Cells人成巨核细胞白血病细胞复苏率高|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:MEG-01 Cells人成巨核细胞白血病细胞复苏率高|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
【物种来源】
MEG-01 Cells人成巨核细胞白血病细胞复苏率高|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【生长特性】
MEG-01 Cells人成巨核细胞白血病细胞复苏率高|STR图谱悬浮生长
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定MEG-01 Cells人成巨核细胞白血病细胞复苏率高|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【传代比例】
1:2-1:4(MEG-01 Cells人成巨核细胞白血病细胞复苏率高|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
MEG-01 Cells人成巨核细胞白血病细胞复苏率高|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
在实际应用中,不同细胞系需要定制化的冻存方案。例如,悬浮细胞比贴壁细胞更易冻存;原代细胞比永生化细胞系更脆弱;某些特殊细胞株可能需要特殊的保护剂组合。实验室间的细胞交换更凸显标准化冻存流程的重要性。国际细胞库提供的标准操作流程值得借鉴,包括使用无血清冻存培养基、严格控制降温速率等细节。统计表明,采用标准化冻存流程可使细胞复苏存活率提升至90%以上,而随意操作可能导致存活率不足50%。
定期检测细胞培养液的无菌状态是必要的。可以通过以下方法进行检测:污染的培养液通常会出现浑浊、变色或沉淀物增多的现象。定期在显微镜下观察细胞状态,如发现异常漂浮物或细胞形态改变,可能提示污染。取少量培养液接种于细菌或真菌培养基中,37°C培养24-48小时,观察是否有微生物生长。
【培养观察】
定期观察MEG-01 Cells人成巨核细胞白血病细胞复苏率高|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化MEG-01 Cells人成巨核细胞白血病细胞复苏率高|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代步骤(二):终止消化:当观察到大部分细胞已经脱落时,向培养皿中加入适量的完全培养基以终止胰蛋白酶的消化作用。细胞悬液转移与离心:用吸管轻轻吹打培养皿底部的细胞,使其形成均匀的细胞悬液。然后,将细胞悬液转移至无菌离心管中,以适当的转速(通常为800-1000rpm)离心3-5分钟。重悬与接种:离心后,轻轻倒掉上清液,用适量的完全培养基重悬细胞沉淀。根据实验需要,将细胞悬液按照适当的比例接种到新的培养皿或培养瓶中,置于37℃、5% CO2的培养箱中继续培养。
标准复苏流程包括:快速解冻:将冻存管从液氮中取出后立即置于37℃水浴,持续摇动直至仅剩少量冰晶(通常需1-2分钟),梯度稀释:将细胞悬液缓慢加入预热的完全培养基(含10%血清),逐步降低DMSO浓度离心清洗:1000rpm离心5分钟去除冻存保护剂,重悬接种:按适当密度接种于预处理好的培养器皿。
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NCI-H196 Cells人小细胞肺癌细胞传代性好|STR图谱
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PAC2 Cells斑马鱼胚胎成纤维细胞传代性好|STR图谱
SW1271 Cells人小细胞肺癌细胞传代性好|STR图谱
JeKo-1细胞复苏实验室;背景说明:一位套细胞淋巴瘤患者的巨细胞变种显示白血病转变,从其外周血单核细胞出发建立了MCL细胞株JeKo-1。 JeKo-1细胞EB病毒阴性,并表达一种B细胞表型的IgM。 细胞过表达cyclin D1, Bcl-2, c-Myc 及 Rb 蛋白。 Bcl-1/J(H)基因重排得到了PCR证实。 JeKo-1细胞在SCID小鼠中高成瘤。 [PubMed: 9753063];传代方法:1:2传代。3天内可长满。;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:UM2细胞复苏实验室、BCP-1细胞复苏实验室、H1734细胞复苏实验室
Hs578Bst细胞复苏实验室;背景说明:乳腺 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:RCC10 RGB细胞复苏实验室、A427细胞复苏实验室、EFM192C细胞复苏实验室
Psi2 DAP细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCIH128细胞复苏实验室、A9(Hamprecht)细胞复苏实验室、ML2细胞复苏实验室
SupB15WT细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代。3天内可长满。;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞;相关产品有:H-1944细胞复苏实验室、IGROV 1细胞复苏实验室、ME 180细胞复苏实验室
MDA-MB-468-RED细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:GM346细胞复苏实验室、Medical Research Council cell strain-5细胞复苏实验室、Me Wo细胞复苏实验室
HCC-1171细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MCF-10A细胞复苏实验室、LNCaP.FGC细胞复苏实验室、FDC-P1细胞复苏实验室
HAPI细胞复苏实验室;背景说明:小胶质细胞;自发永生;Wistar;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:半贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:ARO细胞复苏实验室、H1944细胞复苏实验室、NCIH2227细胞复苏实验室
U-251细胞复苏实验室;背景说明:U-251 MG分离至一位患者的胶质母细胞瘤组织。;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:成纤维细胞样;相关产品有:Hs 606细胞复苏实验室、293E细胞复苏实验室、CT26-clone 25细胞复苏实验室
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SK.MEL.28细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:8传代,2-3天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:星形的;相关产品有:H-1770细胞复苏实验室、U-251细胞复苏实验室、Z138细胞复苏实验室
Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:2-3天换液1次;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞;相关产品有:HeLa S-3细胞复苏实验室、RPMI-8402细胞复苏实验室、G-Olig2细胞复苏实验室
Roswell Park Memorial Institute 1846细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:PLC PRF 5细胞复苏实验室、HuT-102细胞复苏实验室、GM02219细胞复苏实验室
IM 9细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3传代,2-3天传一代;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:3T3 J2细胞复苏实验室、16HBEo-细胞复苏实验室、PANC 203细胞复苏实验室
NGEC细胞复苏实验室;背景说明:胃黏膜;上皮 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Duke University 145细胞复苏实验室、TCam-2细胞复苏实验室、SF-763细胞复苏实验室
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T2-Luc Cells人淋巴母细胞传代性好|STR图谱
P3HRI细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每2-3天换液;生长特性:悬浮生长 ;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:SCL I细胞复苏实验室、CCF-STTG1细胞复苏实验室、MDST8细胞复苏实验室
H-2198细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:KMS-11细胞复苏实验室、NCCIT细胞复苏实验室、JJN-3细胞复苏实验室
UPCI:SCC90细胞复苏实验室;背景说明:舌鳞癌细胞;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Jurkat (clone E6-1)细胞复苏实验室、NCIH1155细胞复苏实验室、GM00637B细胞复苏实验室
NCI-H676B细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:J82细胞复苏实验室、CPAE细胞复苏实验室、A-427细胞复苏实验室
STBCi063-C Cells(提供STR鉴定图谱)
HL-60 clone15细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:维持细胞浓度在1×105-1×106/ml,每2-3天换液1次。;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:MLOY4细胞复苏实验室、Tn-5B1-4细胞复苏实验室、NIH-OVCAR-3细胞复苏实验室
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P30OHK细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:10^5 cells/60mm dish;生长特性:悬浮生长;形态特性:淋巴母细胞;相关产品有:Rat-2细胞复苏实验室、H-4-II-E细胞复苏实验室、SK-MEL-5细胞复苏实验室
KOPN-8细胞复苏实验室;背景说明:B淋巴细胞白血病;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI-H1954细胞复苏实验室、FRO 81-2细胞复苏实验室、SW 1088细胞复苏实验室
HL-7702细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Ly3细胞复苏实验室、H508细胞复苏实验室、BPH1细胞复苏实验室
GM15452细胞复苏实验室;背景说明:1957年,PuckTT从成年中国仓鼠卵巢的活检组织建立了CHO细胞,CHO-K1是CHO的一个亚克隆。CHO-K1的生长需要脯酸。;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:Hs 343.T细胞复苏实验室、Human Hepatocyte Line 5细胞复苏实验室、COLO 320细胞复苏实验室
C42细胞复苏实验室;背景说明:前列腺癌;左锁骨上淋巴结转移;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:LUDLU-1细胞复苏实验室、1E8-H细胞复苏实验室、PLA 802细胞复苏实验室
P388.D1细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SKHEP1细胞复苏实验室、BT 549细胞复苏实验室、U-87MG ATCC细胞复苏实验室
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SKOV3/LUC KO sik2 Cells人卵巢癌细胞传代性好|STR图谱
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GS-9L细胞复苏实验室;背景说明:胶质瘤;Fischer 344;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:BC-028细胞复苏实验室、Neukoplast细胞复苏实验室、OAW42细胞复苏实验室
University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞复苏实验室;背景说明:肾透明细胞癌;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HT 1376.T细胞复苏实验室、OVCAR 433细胞复苏实验室、PANC 1005细胞复苏实验室
BetaTC6细胞复苏实验室;背景说明:这株细胞来源于转基因小鼠中生长的一个胰肿瘤(胰岛素瘤)。这种小鼠携带了大鼠胰岛素II基因启动子调控的SV40早期基因的假基因结构。细胞包含丰富的胰岛素和小量的胰高血糖素及生长抑素。响应葡萄糖而分泌胰岛素;传代方法:1:2-1:4传代,每2-3天换液一次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:NIH-OVCAR-3细胞复苏实验室、Hs895.T细胞复苏实验室、A-172细胞复苏实验室
DHL6细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3—1:6传代,3—4天换液1次;生长特性:悬浮生长 ;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:KASUMI6细胞复苏实验室、C22细胞复苏实验室、LM(TK-)细胞复苏实验室
SW839细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:RC-2细胞复苏实验室、Kit 225 K6细胞复苏实验室、SNU182细胞复苏实验室
HCC2218细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2—3次;生长特性:悬浮生长;形态特性:上皮样;相关产品有:Hs 819.T细胞复苏实验室、rHSC-99细胞复苏实验室、HCC-78细胞复苏实验室
MOLP8细胞复苏实验室;背景说明:浆细胞骨髓瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:D341MD细胞复苏实验室、LX-2细胞复苏实验室、McCoy B细胞复苏实验室
SK Mel 24细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:4传代,2-3天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:星形的;相关产品有:Earle's L cells细胞复苏实验室、SNK-6细胞复苏实验室、Mono Mac 6细胞复苏实验室
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