"RPMI-8226 Cells人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞复苏率高|STR图谱
【操作规范】
在细胞培养和处理过程中,需严格遵守无菌操作规范,以避免细胞污染和交叉污染。
【消化条件】
室温下用胰酶消化1-3分钟。
【生物安全等级】
1级。
【形态特性】
RPMI-8226 Cells人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞复苏率高|STR图谱淋巴母细胞样
【RPMI-8226 Cells人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞复苏率高|STR图谱英文别名】
RPMI 8226; RPMI.8226; RPMI8226; RPMI no. 8226; RPMI no 8226; RPMI #8226; 8226; RPMI 8226/S; RPMI-8226S; RPMI8226/S; 8226/S; Roswell Park Memorial Institute 8226; GM02132; GM2132; GM 2132; GM02132C; Simpson
【背景信息】
RPMI-8226 Cells人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞复苏率高|STR图谱来源于一位61岁的男性浆细胞瘤患者;可产生免疫球蛋白轻链,未检测到重链。
【细胞培养经验分享】启蒙老师的重要性:一般进实验室都有师兄师姐带着做,他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则,如营养液、细胞瓶的摆放位置、灭菌处理程序、开盖手法、细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作,在第一次的时候就要重视。像养孩子一样养细胞,细胞有时真的很脆弱,最好每天都去看看它,以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象,也好及时解决这些意外,避免重复实验带来的更大痛苦。好细胞要及时保种:细胞要分批传代,这样即使有一批出了问题,还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。
高浓度血清虽然能促进细胞增殖,但也可能带来一些潜在风险。其中最主要的风险是可能诱导细胞分化。血清中含有多种生长因子和激素,这些物质在浓度过高时可能改变细胞的原始特性。特别是对于需要保持未分化状态的干细胞,这种影响尤为显著。因此,在使用高浓度血清时,必须密切监测细胞的形态和标志物表达,确保其特性不发生改变。
【换液周期】
RPMI-8226 Cells人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞复苏率高|STR图谱每周2-3次
【产品包装】
复苏发货:RPMI-8226 Cells人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞复苏率高|STR图谱T25培养瓶(一瓶)或冻存发货:1ml冻存管(两支)
【物种来源】
RPMI-8226 Cells人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞复苏率高|STR图谱来源于人源、鼠源等其它物种来源
【培养条件】
37°C、5%CO₂、饱和湿度环境,使用含10%-20%FBS的基础培养基。
【生长特性】
RPMI-8226 Cells人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞复苏率高|STR图谱悬浮生长
【污染检测】
支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。
【细胞接收流程】
收到细胞后,应首先观察细胞状态,然后进行75%酒精消毒处理。将细胞置于37℃培养箱中放置2-4小时以稳定RPMI-8226 Cells人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞复苏率高|STR图谱状态。当细胞密度达到80%-90%时,即可进行首次传代培养。
【消化传代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落。(悬浮细胞可省略这步操作)
【传代比例】
1:2-1:4(RPMI-8226 Cells人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞复苏率高|STR图谱首次传代建议1:2)
【来源说明】
RPMI-8226 Cells人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞复苏率高|STR图谱主要来源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等细胞库
【污染防控】
严格无菌操作,定期检测支原体污染,必要时使用双抗预防细菌污染。
对于常规贴壁细胞,标准操作流程应遵循三步原则:首先用PBS润洗去除血清中的酶抑制剂,随后进行胰酶润洗并彻底吸除,最后依靠残留酶在37℃下的短暂作用完成消化。这个过程中,判断消化终点的标准常被错误理解。实际上,当显微镜下观察到细胞层呈现""沙状移动""时,表明细胞-基质和细胞-细胞间的连接均已断裂,此时应立即终止消化。这种状态下的细胞虽未完全离散,但已具备独立分布的特性。值得注意的是,某些肿瘤细胞即使在镜下呈现理想单细胞状态,贴壁后仍会重新聚集,这是由其生物学特性决定的自然现象,强行通过延长消化或剧烈吹打来追求绝对单分散性,只会导致细胞状态持续恶化。
定期检测细胞培养液的无菌状态是必要的。可以通过以下方法进行检测:污染的培养液通常会出现浑浊、变色或沉淀物增多的现象。定期在显微镜下观察细胞状态,如发现异常漂浮物或细胞形态改变,可能提示污染。取少量培养液接种于细菌或真菌培养基中,37°C培养24-48小时,观察是否有微生物生长。
【培养观察】
定期观察RPMI-8226 Cells人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞复苏率高|STR图谱生长状态,注意培养基的pH值变化和细胞密度,及时换液和传代。
【细胞复苏】
复苏细胞时,应快速将冻存管从液氮中取出并置于37℃水浴中解冻,然后转移到含新鲜培养基的无菌管中并吹打混匀。整个复苏过程应尽可能在5-10分钟内完成,以确保细胞的高存活率。
【细胞传代】
传代时,应使用适量的胰蛋白酶溶液进行消化,并在显微镜下观察细胞消化情况。消化下来的细胞容易成团,需要吹打吹散。传代后,应确保细胞均匀分布在培养瓶或培养皿中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。一般使用冻存液进行冻存,并置于液氮中储存。
【细胞状态】
传代和消化过程中,应密切关注细胞状态,避免过度消化或机械损伤导致细胞活性下降。
【空泡现象】
在密集培养时,细胞中可见巨大的空泡,这是细胞的正常特性,无需担心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清浓度有助于优化RPMI-8226 Cells人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞复苏率高|STR图谱实验条件,提高实验的重复性和稳定性。这一浓度范围经过多年实验和实践的验证,被认为是较为适宜的选择。
细胞传代步骤(二):终止消化:当观察到大部分细胞已经脱落时,向培养皿中加入适量的完全培养基以终止胰蛋白酶的消化作用。细胞悬液转移与离心:用吸管轻轻吹打培养皿底部的细胞,使其形成均匀的细胞悬液。然后,将细胞悬液转移至无菌离心管中,以适当的转速(通常为800-1000rpm)离心3-5分钟。重悬与接种:离心后,轻轻倒掉上清液,用适量的完全培养基重悬细胞沉淀。根据实验需要,将细胞悬液按照适当的比例接种到新的培养皿或培养瓶中,置于37℃、5% CO2的培养箱中继续培养。
常见细胞贴壁较弱原因:在遇到运输低温及震荡、室温静置太长时间、添加的培养基或其他试剂过冷、密度较高、聚集未吹散、加液吹打到细胞面等情况时会出现明显的成片脱落现象,此时若脱落现象不严重应尽快放回培养基继续培养,若呈大片脱落的情况时需要收集细胞重新消化吹散并接种;建议使用经过包被或者高贴壁培养瓶培养细胞,尽量避免接触低温或密度过高。
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NOK细胞复苏实验室;背景说明:鳞状上皮;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞复苏实验室、RPMI 1846细胞复苏实验室、DoHH2细胞复苏实验室
NCI-H2122细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:4传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:淋巴母细胞;相关产品有:R1610细胞复苏实验室、U-CH1细胞复苏实验室、HFL1细胞复苏实验室
343 MG细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长 ;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SUD6细胞复苏实验室、alpha-TC1.6细胞复苏实验室、H-747细胞复苏实验室
MPC-83细胞复苏实验室;背景说明:胰腺;腺泡 Cells;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:PL9细胞复苏实验室、MC 116细胞复苏实验室、H1355细胞复苏实验室
Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞复苏实验室;背景说明:角膜上皮细胞;Ad-SV40转化;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCIH1755细胞复苏实验室、NCI H69细胞复苏实验室、WEHI-3B细胞复苏实验室
KG-1a细胞复苏实验室;背景说明:急性髓系白血病;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HVSMC细胞复苏实验室、ROS17/28细胞复苏实验室、QG-56细胞复苏实验室
H2066细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:每周换液2-3次;生长特性:悬浮生长;形态特性:聚团悬浮;相关产品有:H889细胞复苏实验室、T-84细胞复苏实验室、PLA802细胞复苏实验室
SK-N-F1细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:4传代,每周换液2次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:Hs 274.T细胞复苏实验室、IM-95细胞复苏实验室、SW 1271细胞复苏实验室
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U-87-MG细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MFHL-2细胞复苏实验室、A375细胞复苏实验室、T98 G细胞复苏实验室
H-345细胞复苏实验室;背景说明:小细胞肺癌;骨髓转移;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:V79细胞复苏实验室、X63.Ag8.653细胞复苏实验室、MDA-PCa-2b细胞复苏实验室
MOLP-2细胞复苏实验室;背景说明:骨髓瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI-H157细胞复苏实验室、H-510A细胞复苏实验室、HCC-2935细胞复苏实验室
J 82细胞复苏实验室;背景说明:电子显微镜下未观察到桥粒但观察到数目不同的粗面内质网和突出微丝。 含ras (H-ras)癌基因。;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮细胞样;相关产品有:RK-13细胞复苏实验室、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞复苏实验室、REC细胞复苏实验室
159PT细胞复苏实验室;背景说明:乳腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI-H2122细胞复苏实验室、SuDHL 8细胞复苏实验室、CCD-1112sk细胞复苏实验室
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U-251MG-GFP Cells人神经胶质细胞瘤细胞传代性好|STR图谱
SW900 Cells人肺癌鳞癌细胞传代性好|STR图谱
143TK-细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2—1:5传代;每周换液2-3次;生长特性:贴壁生长;形态特性:混合型;相关产品有:BE(2)C细胞复苏实验室、SK Hep1细胞复苏实验室、WRL-68细胞复苏实验室
HNE-1细胞复苏实验室;背景说明:鼻咽部;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:SP-2细胞复苏实验室、DMS 79细胞复苏实验室、NCI-SNU-119细胞复苏实验室
LS-513细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3—1:4传代,每周换液2次;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:NCIH1792细胞复苏实验室、OCIAML4细胞复苏实验室、brain-derived Endothelial cells.3细胞复苏实验室
HONE-1细胞复苏实验室;背景说明:鼻咽癌;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:PG-4 S+L-细胞复苏实验室、GM05372E细胞复苏实验室、H1522细胞复苏实验室
teno-iPSC2 Cells(提供STR鉴定图谱)
RK-13细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:CALU 1细胞复苏实验室、Hep II细胞复苏实验室、MES-23.5细胞复苏实验室
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159PT细胞复苏实验室;背景说明:乳腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NCI-H2122细胞复苏实验室、SuDHL 8细胞复苏实验室、CCD-1112sk细胞复苏实验室
Wayne State University-Head and Neck 13细胞复苏实验室;背景说明:舌鳞癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:NU-GC-4细胞复苏实验室、ND7/23细胞复苏实验室、H1792细胞复苏实验室
H2172细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:3-1:6传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:alphaTC clone 6细胞复苏实验室、Med 341细胞复苏实验室、MKN74细胞复苏实验室
HSC-6细胞复苏实验室;背景说明:口腔鳞癌;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:PC3M-2B4细胞复苏实验室、OVCAR.8细胞复苏实验室、Ca Ski细胞复苏实验室
Rat-1细胞复苏实验室;背景说明:成纤维细胞;自发永生;Fischer 344;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:GM00215A细胞复苏实验室、MDA231细胞复苏实验室、KU-812-F细胞复苏实验室
143TK-细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2—1:5传代;每周换液2-3次;生长特性:贴壁生长;形态特性:混合型;相关产品有:BE(2)C细胞复苏实验室、SK Hep1细胞复苏实验室、WRL-68细胞复苏实验室
M-1 Cells小鼠肾集合管细胞传代性好|STR图谱
NCI-H596 Cells人肺腺鳞癌细胞传代性好|STR图谱
MuM-2B Cells人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞传代性好|STR图谱
ANA-1 [Mouse macrophage] Cells小鼠巨噬细胞传代性好|STR图谱
RPMI-8226 Cells人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞复苏率高|STR图谱
U-937 Cells人组织细胞淋巴瘤细胞传代性好|STR图谱
L-cell Cells小鼠皮下结缔组织细胞传代性好|STR图谱
V79细胞复苏实验室;背景说明:肺;自发永生;雄性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MDCKII-WT细胞复苏实验室、SW-948细胞复苏实验室、Tokyo Medical and Dental university 8细胞复苏实验室
Hs 611.T细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2传代;每周换液2-3次。;生长特性:混合型;形态特性:淋巴母细胞样;相关产品有:PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞复苏实验室、P3/X63-Ag8细胞复苏实验室、HPAF/CD18细胞复苏实验室
OCI-Ly03细胞复苏实验室;背景说明:弥漫大B淋巴瘤;男性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:悬浮;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:L929细胞复苏实验室、A-253细胞复苏实验室、MC/9细胞复苏实验室
H4-II-E-C3细胞复苏实验室;背景说明:在糖皮质激素、胰岛素或cAMP衍生物的诱导下可以产生酪酸基转移酶;可被逆转录病毒感染;可产生白蛋白、转铁蛋白、凝血酶原;在AxC大鼠中可以成瘤。;传代方法:1:2传代;生长特性:贴壁生长;形态特性:上皮样;相关产品有:Mel-624细胞复苏实验室、CESS细胞复苏实验室、THEECs细胞复苏实验室
IGR.OV1细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁或悬浮,详见产品说明书部分;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:HT 1197细胞复苏实验室、C38细胞复苏实验室、GM17346细胞复苏实验室
RD细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:4传代,3-4天换液1次。;生长特性:贴壁生长;形态特性:梭型和大的多核细胞;相关产品有:MDA MB231细胞复苏实验室、Hs281T细胞复苏实验室、KYSE0410细胞复苏实验室
ECC1细胞复苏实验室;背景说明:内膜腺癌;女性;传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;生长特性:贴壁;形态特性:详见产品说明书;相关产品有:MC3T3-E1 Subclone 24细胞复苏实验室、GM-3573细胞复苏实验室、DKMG细胞复苏实验室
MALME 3M细胞复苏实验室;背景说明:详见相关文献介绍;传代方法:1:2-1:4传代,2天换液1次。;生长特性:混合生长;形态特性:成纤维细胞;相关产品有:A204细胞复苏实验室、HaCaT细胞复苏实验室、MDCK II细胞复苏实验室
WEHI-164 Cells小鼠纤维肉瘤细胞传代性好|STR图谱
Hep-G2/2.2.15-Luc Cells人肝细胞传代性好|STR图谱
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