草酸铵结晶紫染色液1%
简介:
草酸铵分子式为C2H10N2O5,分子量为142.11,结晶紫分子式为C25H30ClN3,分子量为407.99。结晶紫染色液(Crystal Violet Staining Solution)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成深紫色的染色液。用于革兰氏染色。结晶紫是一种碱性染料,可以和细胞核中的DNA结合,从而产生细胞核染色。
BIOISCO 草酸铵结晶紫染色液是革兰氏染色法中的一种成分,主要由草酸铵、结晶紫、乙醇等组成。在革兰阳性菌染色中,细胞经草酸铵结晶紫染色后再经Gram碘液处理,形成不溶性复合物,该复合物不能通过细胞壁,不易被脱色,所以保持紫色。其染色结果为pH0.5(绿)~pH 2.0(蓝),染色后细菌与环境形成鲜明对比,因此可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。该产品仅适用于科研实验,不可做他用。
组成:
产品名称
SM095-100ml
SM095-500ml
Storage
100ml
500ml
RT避光
说明书
一份
保存条件:
室温避光保存,一年有效。
自备材料:
接种环戒挑取细菌的其他工具、酒精灯、载玻片、光学显微镜。
操作步骤(仅供参考):
按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。
涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水,取菌液与水混合均匀,涂成薄层。
干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。
固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3~5次,每次1 s,温度不宜过高,防止菌体蛋白变性,放置待凉后染色。也可以用甲醇戒乙醇固定。
初染:滴加结晶紫染色液染色1-2 min,清水冲洗去染色液。
媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片室温放置1-2 min,水洗。
脱色:滴加脱色液摇动,摇动10~30 s,直至流下的脱色液不出现紫色为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。
复染:滴加沙黄染色液染色,30~60 s,水洗。
干燥。镜检:置油镜观察。
染色结果:
革兰氏阳性菌
蓝色至紫色
革兰氏阴性菌
红色
注意事项:
涂片之前,应事先在背面做好圆圈标记,以便判断后续试验的位置。
取细菌时,应注意自我防护,拔试管塞时,应将试管口通过火焰略加烧灼,最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
加热固定涂片时,应注意玻片勿太靠近火焰,一般要求玱片温度不超过60℃,以玱片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜。
革兰氏染色的关键在于严格掌握脱色程度,脱色时间应根据经验判断。脱色过度,阳性菌可被误染为阴性菌;脱色不够,阴性菌可被误染为阳性菌。
待检细菌培养时间会影响染色,阳性菌培养时间过长或已死亡戒细菌溶解,常呈阴性。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司
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