Trap染色试剂盒
产品简介：
酸性磷酸酶(acidphosphatase，ACP)遍布各种组织，分布极为广泛，因为主要存在于细胞的溶酶体内，
所以通常被当作溶酶体标志酶。而溶酶体外的酸性磷酸酶存在于胞质内和内质网。不同种类的动物体内所
含的酸性磷酸酶也不同，酸性磷酸酶的适宜pH范围在4.5～5.5之间。白血病人脾脏和正常人肺泡巨噬细
胞存在的的抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistntacidphosphatase，TRAP)并不是释放入血液，而是在细胞
滤泡中。血液中绝大多数的TRAP来源于破骨细胞，因此可以通过测量血液中的TRAP了解破骨细胞的功
能状态。
BIOISCO抗酒石酸酸性磷酸酶染色液将萘酚AS-BI作为底物，在酸性pH条件下被酸性磷酸酶水解释
放出萘酚和磷酸，萘酚可以偶联重氮盐从而生成定位于细胞质中的有色产物，如果细胞内的ACP有抗酒
石酸的活性，则呈阳性反应。该染色液不仅可用于细胞涂片、新鲜血涂片，还可以用于石蜡切片、冰冻切
片。
储存条件：
4℃避光保存，6个月有效。
自备材料：
1、恒温箱、蒸馏水。
2、载玻片、推玻片。
3、光学显微镜。
操作步骤（仅供参考）：
(一)血液、细胞涂片：
1、推片：在载坡片上放置新鲜血液或骨髓涂片，于载玻片处将推玻片保持30度，置于细胞滴液或血液
的正前方，往后稍微移动与血液或细胞滴液接触使后者沿推片下缘散开，此时沿载玻片平面匀速平稳向前
滑动直至铺满血膜为止。
2、自然晾干后使用TRAP固定液固定。
3、水洗，略微晾干(不易过分干燥)。
(二)冰冻切片：
1、冰冻切片回温至37℃，水中浸泡1～2min。
2、自然晾干，固定液室温固定1～3min。
3、水洗，稍微晾干(不易过分干燥)。
4、轻轻向切片上滴加适量染色液，覆盖组织，置于37℃温箱，避光浸染45～60min，水洗。
5、复染：苏木素染色液染色5～8min或甲基绿染色液染色2～3min。
6、水洗、晾干、镜检。
(三)石蜡切片：
1、石蜡切片脱蜡5-10min，重复此步骤一次。
2、无水乙醇5min，90%乙醇和70%乙醇各2min。
3、水洗2min。
4、自然晾干后使用TRAP固定液固定30s-3min，多数情况下30-60s即可。
5、水洗，略微晾干(不易过分干燥)。
6、轻轻向切片上滴加适量染色液，覆盖组织，置于37℃温箱，浸染45～60min，水洗。
7、复染：苏木素染色液染色5～8min或甲基绿染色液染色2～3min。
8、水洗、晾干、镜检。
染色结果：
临床意义：
1、毛细胞白血病的毛细胞ACP染色后呈现出中度阳性或强阳性，且酒石酸无法抑制，此时其他细胞均
呈现极弱阳性或阴性。
2、原粒细胞对ACP反应不一，急性白血病幼单核细胞ACP染色呈现阳性，原淋巴细胞呈现弱阳性。
3、T淋巴细胞ACP染色呈现阳性，颗粒粗大、分布密集。B淋巴细胞呈现阴性或颗粒细小的弱阳性。
4、戈谢细胞呈现强阳性，尼曼-皮克细胞呈现阴性或弱阳性。
注意事项：
1、TRAP孵育液非常容易失效，本法适合使用皮肤穿刺血涂片，处理晾干后的样本需及时染色。
2、冰冻切片染色时，应当减少切片在室温下所暴露的时间。
3、为避免酶的活性受到影响，实验所用样本应新鲜，取材后需立即处理。
4、需在4℃冰箱内进行组织固定，固定时间不宜超过24h，否则酶的活性会出现减弱或消失。
5、组织在石蜡包埋时，温度不宜高于56℃。为防止酶活性减弱或消失。应使用熔点为52～54℃的石蜡
进行浸蜡，浸蜡时间要短。
6、应选用AR级以上的二甲苯以避免不纯的二甲苯导致的黑色沉淀。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
8、本产品仅供科研使用，严禁它用。
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伊势久（江苏连云港）生物科技有限责任公司，成立于2019年，坐落于新亚欧大陆桥东方桥头堡连云港市。公司由资深行业专家和双一流高校博士联合创办，主要从事生化检测、病理检测和原料酶等相关试剂的研发和生产。
我司位于联东U谷科技创新谷内的2000平米的生产、研发基地已建成投入运行，其中包括150平米的超十万级的洁净车间。我司坚持以自主研发为核心，现已生产出的脲酶、tRNA转运核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制剂等产品，热销市场以来收到了客户的广泛好评。
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